简介：摘要液相色谱-串联质谱技术在检验医学领域正在快速应用与发展，从高分辨质谱促进生物标志物的高效筛选，到三重四极杆质谱助力验证生物标志物对疾病的诊断与疗效监测，其应用贯穿于组学研究到实验诊断的不同领域与环节，逐渐成为疾病研究与诊断的一种不可或缺的技术手段。目前大部分液相色谱串联质谱平台处于医学研究阶段，临床推广与应用还存在一些挑战。

简介：摘要液相色谱串联质谱技术（LC-MS/MS）是结合液相高分离与质谱高选择及高灵敏的一种分析方法。近年来，LC-MS/MS广泛应用于临床实践，包括先天性疾病筛查、内源性化合物水平测定、生物标志物分析等方面。因LC-MS/MS可提供准确的数据，所以对临床某些疾病的精准预防及诊治具有重要价值。本文阐述LC-MS/MS在精准医疗中的应用优势，并展望其在临床实践中的未来前景，以期推动临床LC-MS/MS技术在疾病预防和诊治中的发展。

简介：摘要在质谱检测过程中，有部分目标分析物由于离子化效率低、化学稳定性不佳等原因难以通过直接分析得到高质量的定量结果。为提升检测效率，利用化学衍生技术修饰其分子结构成为关键。此项技术涉及检验医学、有机化学、分离科学等多学科交叉，在方法学建立和评价方面对实验室人员的专业水平提出较高的要求。近年来，化学衍生技术已开始广泛应用于对维生素、激素、神经递质、治疗性药物等多个项目的检测中，是未来临床质谱发展的重要方向。

简介：摘要液相色谱串联质谱技术具有高灵敏度、高特异性和高通量的特性，近年来在临床类固醇类激素、维生素、代谢小分子定量检测、药物浓度监测以及参考方法/参考物质研制等方面有快速的发展和应用，但其在临床中广泛应用仍存在一些挑战。

简介：摘要液相色谱-质谱（LC-MS）技术在临床精准化医疗中发挥着日趋重要的作用。医学检验人员应重视LC-MS技术在质量管理中的普适性和特殊性。美国临床实验室标准协会CLSI发布的C62-A指南中“额外质量保证”环节—分析批设置值得我们借鉴，应建立适应我国临床医学检验实验室的分析批规范化设置的具体方案，保证LC-MS临床应用检测结果的准确性。

简介：摘要目的建立一种基于同位素稀释液相色谱串联质谱法（ID-LC/MS/MS）检测血清糖化白蛋白（GA）的准确定量方法。方法本研究在日本临床化学学会（JSCC）推荐的ID-LC/MS方法上进行优化，采用阴离子交换色谱柱提纯白蛋白（Alb），使用重量法准确称量提纯标本、赖氨酸（Lys）和糖化赖氨酸（DOF-Lys）的标准溶液及两种的混合内标，将Alb酸水解为氨基酸，检测Lys和DOF-Lys从而定值GA。根据C62-A文件对建立的方法进行方法学评价并与常规方法进行比对研究。结果蛋白电泳鉴定标本Alb纯度结果为100%。Lys和DOF-Lys线性标准曲线R2范围分别为0.997 8~0.999 9、0.999 4~1.000 0。血清GA测定的批内、批间和总的变异系数（CV）分别为0.69%~1.97%、1.13%~2.33%、1.37%~2.54%。正确度评价中三个浓度参考物质测定结果与认定值偏差分别为-2.56%、-1.87%、-2.94%。Lys和DOF-Lys的基质效应分别为89.92%、109.98%，携带污染率分别为-1.13%、-3.27%。Lys的检测限和定量限分别为0.075、0.248 nmol/g，DOF-Lys的检测限和定量限分别为0.007、0.024 nmol/g。方法 的相对扩展不确定度为1.60%~2.03%。与常规方法的拟合回归曲线R2为0.970 7。结论建立了一种基于ID-LC/MS/MS法检测血清GA的方法，方法学评价准确可靠，有望作为血清GA检测的候选参考方法。

简介：摘要目的建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）快速检测血浆中米酵菌酸含量的方法。方法于2020年11月，血浆样品经甲醇-乙腈溶液（体积比1∶1）提取净化后直接进样，经C18色谱柱分离，以5 mmol/L乙酸铵水-乙腈溶液为流动相梯度洗脱，在优化后的仪器条件下，采用电喷雾负离子多反应监测（MRM）模式，外标法定量，并对所建立的方法进行方法学验证。结果血浆中米酵菌酸在2~100 μg/L线性关系良好，相关系数为0.999 8，平均回收率为83.7%~112.0%，批内、批间相对标准偏差均<10%；方法的检出限为0.7 μg/L，定量下限为2.0 μg/L。结论该方法简便、快速、准确，灵敏度高，可满足中毒患者血样中米酵菌酸测定的要求。

简介：摘要目的分析蜱传脑炎患者的代谢情况，研究蜱传脑炎对脂质代谢的影响，并阐明可能的发病机制。方法基于液相色谱-质谱(liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS)联用技术对呼伦贝尔地区的50名蜱传脑炎患者及39名健康组样本进行脂质组学研究。利用主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析等多元统计分析方法，对患者的血清样本进行分析。结果在样本中共检测出465个质谱峰，鉴定出磷脂及甘油酯等代谢物。对显著变化(P<0.01，VIP>1，FC>2)的差异物进行鉴定，共筛选出26种差异代谢物，与机体的抗炎等代谢通路存在一定相关性，其中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺等磷脂类整体趋于上调[log2(Fold change)>0]，甘油二酯、甘油三酯等甘油酯类呈现下降趋势[log2(Fold change)<0]。且所得潜在标志物的AUC值为0.999，可用于疾病组与健康组的诊断。结论经病毒侵染后，人体内磷脂代谢及甘油酯代谢通路会发生一定变化，且所得差异代谢物可作为潜在标志物可用于蜱传脑炎疾病诊断，为疾病进一步研究提供理论依据。

简介：摘要单细胞蛋白组学分析能够对细胞异质性进行深层次研究，进一步推动精准医疗和肿瘤研究等领域发展。近年来，基于质谱的蛋白质组学取得重大进展，然而在单细胞水平进行蛋白质组学分析仍然面临着灵敏度挑战。目前液相色谱-串联质谱已成为蛋白质组学主要分析方法，由于其具有高灵敏度，高通量，高稳定性等特点，在单细胞领域得以广泛推广。近几年具有代表性的单细胞蛋白质组学方法，根据样品处理方式的不同，可以分为单管技术、微流控平台、集合处理平台三类。不同的数据采集和分析方法各有优劣。单细胞蛋白质组学目前还停留在实验室研究，若能早日在临床应用，必将推动精准医疗和肿瘤学研究进步发展。

简介：摘要目的建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法检测血浆咖啡因浓度，评价咖啡因药物浓度监控（TDM）在早产儿呼吸窘迫综合征（RDS）治疗中的临床应用价值。方法取血浆样本于离心管中，加入咖啡因氘代同位素内标，再加入蛋白沉淀剂，充分涡旋混合后，离心取上层清液进入质谱分析。流动相为甲醇和水，梯度洗脱；柱温45 ℃，使用岛津LC-30AD-CL液相系统和AB SCIEX 4500 QTRAP质谱仪建立方法，并对该方法的敏感度、特异度、线性、准确度、不精密度、基质效应、携带污染进行评估。纳入2021年2至4月就诊于武汉大学人民医院新生儿科诊断为新生儿RSD的患者30例，检测不同RDS早产儿相同给药方案下的咖啡因谷值浓度以评估个体变异对咖啡因药物浓度的影响。结果咖啡因的检出限为0.02 μg/ml，最低定量限为0.05 μg/ml，在1.0~100.0 μg/ml浓度范围内表现出良好的线性（R2=0.998 6，R>0.99）、特异度（回收率85.52%~114.12%）、准确度（回收率85.97%~114.53%）、日内和日间不精密度（CV 6.01%~11.28%），基质效应和携带污染可忽略不计。检测30例RSD早产儿相同给药方案（10 mg/kg）后的咖啡因谷值浓度为（25.45±11.61）μg/ml，变异系数为44.88%。结论成功建立了一种UPLC-MS/MS方法用于监测咖啡因血药浓度。咖啡因TDM具有一定的临床应用价值，可用于辅助RDS诊疗，提高咖啡因疗效。

简介：摘要目的探讨建立检测RNA中m6A（N6-甲基腺苷）修饰水平的快速、稳定且灵敏的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法以及其应用。方法RNA发生m6A修饰的水平可以通过RNA中m6A和腺苷（A）的摩尔比值反应出来，通过电喷雾离子源（ESI）正离子多反应监测（MRM）模式测定RNA中m6A和A的含量。通过分析低、中、高3个不同浓度的质控样品（m6A：4、40、400 nmol/L；A：40、400、4 000 nmol/L）对所建方法进行验证。并且应用该方法检测不同条件处理下小鼠脾脏T细胞RNA中m6A的水平。采用t检验比较两组数据之间的差异。结果所建立方法中，m6A和A分别在1~500 nmol/L和10~5 000 nmol/L的范围线性关系良好（R2>0.99），m6A和A的最低检测限（LOD）分别为1 nmol/L和10 nmol/L，回收率在98.9%和116.5%之间，日内（n=5）相对标准偏差（RSD）和日间（n=15，5 d）RSD分别为2.4%~9.5%和4.4%~9.6%。并且应用该方法检测不同条件下培养的小鼠脾脏T细胞RNA中m6A的含量，结果显示，原代CD8+T细胞RNA中m6A修饰水平为0.271 5±0.017 9，在培养基中加入IL-27的原代CD8+T细胞RNA中m6A修饰水平为0.251 7±0.015 0，表明原代CD8+T细胞具有更高的RNA甲基化水平。结论本研究建立了一种快速、简便及灵敏的HPLC-MS/MS测定RNA中m6A甲基化水平的检测方法，可用于分析甲基化与疾病之间的关系。

简介：摘要药物检验是临床用药的重要环节，也是影响用药安全的一个因素。目前，高效液相色谱（HPLC）与超高效液相色谱（UPLC）是药物检验分析的常用方法。笔者本文通过综述形式，分析观察HPLC与UPLC在药物检验中的应用分析。

简介：摘要目的通过超高效液相色谱-质谱联用技术（ultra-high performance liquid chromatography-mass spectrometry，UHPLC-MS）分析尿毒症患者血清代谢物变化，为尿毒症患者的预防和治疗提供一定的理论依据。方法筛选西南医科大学附属医院肾病内科的尿毒症患者和健康体检中心的志愿者，通过纳入、排除标准，筛选出尿毒症患者（试验组）和志愿者（对照组）各20例。运用UHPLC-MS检测两组受试者血清中的代谢物，并进行差异分析，筛选尿毒症患者的差异代谢物并进行相关性分析和通路富集研究。结果UHPLC-MS一共鉴定出412种代谢物，主成分分析（principal components analysis，PCA）结果证明，这些代谢物能够良好地区分对照组和试验组。按照变量权重值（variable importance for the projection，VIP）>1、变异倍数（fold changes，FC）>1.25或FC<0.8和P<0.05作为显著差异代谢物筛选标准，最终筛选出28种显著差异代谢物，其中18种代谢物显著上升，10种差异代谢物显著下降。相关分析结果证明，28种差异代谢物与试验组和对照组样本之间、28种差异代谢物自身之间都具有一定的相关性。富集分析发现，28种差异代谢物可能富集儿茶酚胺生物合成通路；通路分析发现，28种差异代谢物可能影响丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢途径。结论基于代谢组学分析，尿毒症患者血清中的一些代谢物发生了变化，而这些改变的代谢物影响到一些代谢通路，影响尿毒症患者的病理生理过程。

简介：摘要目的对结核性脑膜炎患者的脑脊液进行非靶向代谢组学的研究，分析其脑脊液代谢特征的改变。方法病例对照研究。收集2018年7月至2019年7月解放军总医院第一医学中心神经内科和第八医学中心结核病区临床确诊的结核性脑膜炎住院患者的脑脊液标本，同时收集已确诊的其他病原感染的非结核性脑膜炎的脑脊液标本作为对照组。其中，结核性脑膜炎组有20例，男性12例，女性8例，年龄（37.9±16.1）岁；对照组有20例，男性13例，女性7例，年龄（34.7±14.8）岁。采用超高效液相色谱-质谱联用技术（UPLC-MS）对两组患者的脑脊液进行反相色谱正离子、反相色谱负离子和亲水色谱正离子检测，生成代谢指纹图谱，并使用SIMCA软件对其分析，选择正交偏最小二乘辨别分析（OPLS-DA）的多元统计分析方法，采用OPLS-DA模型的变量重要性投影值（阈值>1）并结合t-test的P值（P<0.05）来寻找两组患者脑脊液中的差异性代谢物质。结果在两组患者脑脊液中共发现10种差异性代谢物质，它们分别是L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-犬尿氨酸、L-蛋氨酸、L-酪氨酸、二甲基甘氨酸、L-丙氨酸、L-苏氨酸、L-组氨酸和L-赖氨酸，且与对照组比较，在结核性脑膜炎组均表达上调。结论结核性脑膜炎患者脑脊液中氨基酸代谢发生改变，可为结核性脑膜炎的辅助鉴别诊断和分子基础研究提供一定的实验依据。

简介：摘要目的建立本实验室血清孕酮同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC-MS/MS）候选参考方法，并将其用于5种临床常规检测系统的性能评价，探讨不同检测系统检测血清孕酮的可比性。方法采用液液萃取的方法进行样本前处理，在正离子质谱模式下的反相液相分离检测人血清中孕酮，通过梯度洗脱，使单个样本检测时间控制在5 min内。为提高方法准确度，使用包括法建立标准曲线，根据美国临床和实验室标准化协会C62-A、EP15-A2、EP6-A2和EP9-A3等文件分别评价包括法和经典校准曲线法检测的灵敏度、正确度、精密度和特异度等性能，并评价5个血清孕酮临床常规检测系统的检测性能，与ID-LC-MS/MS法比较，评估其在医学决定水平2和25 ng/ml处的偏倚是否均<1/2允许总误差（TEa，12.5%）。结果本实验室血清孕酮ID-LC-MS/MS候选参考方法检测限为0.005 ng/ml，包括法和经典校准曲线法回收实验的回收率分别为97.95%~101.58%和96.88%~110.70%，包括法对认证标准物质的测量结果在其声明的不确定度范围内；包括法批内、批间变异系数（CV）均<3.0%，优于经典校准曲线法（2.48%~9.33%）。5种临床常规检测系统的精密度和线性范围均能达到要求；检测系统1、3和5在2和25 ng/ml处2个医学决定水平的测量结果偏倚不满足均<1/2TEa，检测系统2和4在2个医学决定水平的测量结果偏倚均<1/2TEa。结论本室建立的血清孕酮ID-LC-MS/MS候选参考方法分析性能符合要求，包括法较经典校准曲线法具有更好的检测性能；5种临床常规检测系统的精密度、线性评估良好，仅2个检测系统在2个医学决定水平的正确度评价能满足临床需求。

简介：摘要目的评估自动化磁珠法提取儿茶酚胺代谢物联合液相色谱串联质谱进行检测的性能。方法方法学评价类研究。参考CLSI C62-A、《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》等指南，本研究评估使用磁珠法提取血浆中儿茶酚胺代谢物3-甲氧基肾上腺素（MN）、3-甲氧基去甲肾上腺素（NMN）和3-甲氧基酪胺（3-MT）联合液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）测定的线性、定量限、回收率、精密度以及基质效应等，并收集132份临床剩余血浆样本，同时使用磁珠法和传统固相萃取法2种前处理方法进行提取，经LC-MS/MS测定后比较2种提取方法结果的一致性。结果自动化磁珠法提取MN、NMN和3-MT的线性均>0.99；定量限分别为0.033 5、0.054 7和0.011 0 nmol/L；MN、NMN和3-MT重复性分别为：1.3%~5.1%、2.2%~5.6%和1.7%~7.1%；实验室内总不精密度分别为：1.5%~8.2%、2.2%~7.7%和2.1%~11.2%；虽然绝对回收率较低，但是MN、NMN和3-MT平均相对回收率分别为91.5%~108.5%、92.0%~108.6%和89.3%~104.1%，与预期浓度百分偏差均在15%以内。经过同位素内标校正后，相对基质效应均在100%左右，可抵消潜在的基质效应。固相萃取和磁珠2种方法提取MN、NMN和3-MT结果相关性均良好（相关系数r>0.99），2种方法比较MN、NMN和3-MT平均相对百分偏差分别为0.2%、-1.4%和1.0%。结论本研究中自动化磁珠法前处理提取儿茶酚胺代谢物性能良好，有望提高临床检测自动化及通量。

简介：摘要目的比较临床常用的罗氏全自动免疫分析系统（评估方法）与液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS，参比方法）检测25-羟基维生素D［25（OH）D］的一致性。方法收集2019年5—6月解放军总医院第二医学中心及第五医学中心健康查体剩余血清标本909份，分别由评估方法及LC-MS/MS检测25（OH）D。用Passing-Bablok回归、组内相关系数（ICC）、Bland-Altman图分析2种检测方法的一致性和偏差；加权Kappa检验分析评估方法用于临床判断维生素D正常、不足、缺乏与LC-MS/MS的一致性。结果评估方法检测结果与LC-MS/MS比较，差异有统计学意义（P<0.001）。评估方法与LC-MS/MS的Passing-Bablok回归方程斜率为0.962（95%CI 0.919~1.007），截距为-0.185（95%CI -1.191~0.745），提示评估方法与LC-MS/MS一致性较高。ICC为0.765（95%CI 0.735~0.792）。Bland-Altman图显示评估方法与LC-MS/MS的平均偏差为-0.902 ng/ml（0.300%）。评估方法判断维生素D正常、不足、缺乏与LC-MS/MS的总符合率为83.39%（758/909），加权Kappa=0.790。结论评估方法检测25（OH）D与LC-MS/MS相关性可以接受，一致性较好。临床在评价维生素D营养状况时应考虑不同方法学间存在的差异，建议临床检验实验室自建方法学相对应的参考范围。

简介：摘要液相串联质谱技术具有高灵敏度、高特异性、高通量等特点，可以准确、高效的检测维生素、胆汁酸、类固醇激素、代谢小分子等人体内水平的变化。液相串联质谱技术作为预防医学中筛查、诊断疾病的一种有效手段，在妇幼健康方面广泛应用，有效降低妇幼疾病的发生率，提高我国妇幼人群的健康水平。目前质谱技术在我国面临着许多挑战，但同时也有诸多机遇。本文将阐述液相串联质谱技术在妇幼健康领域的代表性应用方向，并讨论临床实验室开展质谱检测遇到的主要一些问题。

简介：摘要HPLC技术是一项纷繁复杂的系统性现代化技术，这种技术绝大多数情况下都使用与视频安全当中，在某种程度上为广大民众视频安全带来重要保障。近些年，HPLC现代化技术与其他技术的充分结合能够发挥着重要作用，并且越来越受到广大民众的支持和青睐。尤其是现代化信息技术快速发展未来视频安全检测技术将会发展的越来越精细，与此同时所带来的效用也越来越大。基于此本文将从液相色谱在食品检测方面的应用这个角度作为出发点，对其展开深入探讨与论述。

简介：摘要目的建立血中二苯基甲烷二异氰酸酯（MDI）代谢产物N-[4-（4-氨基苄基）-苯基]乙酰胺（AcMDA）血红蛋白加合物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。方法准确称取20 mg血红蛋白样品置于15 ml离心管中，加入10 μl 20 μg/L AcMDA-D8内标溶液，再加入1 ml 0.1 mol/L氢氧化钠溶液在37 ℃下水解0.5 h，经二氯甲烷液液萃取后，真空浓缩至近干，乙腈复溶后超高效液相色谱-串联质谱测定，内标标准曲线法定量。结果该方法线性范围为0.01~25.00 μg/L，相关系数为r=0.999 6。方法的检出限和定量下限分别为0.07和0.2 ng/g Hb；方法的加标回收率为91.0%~95.4%；批内精密度为4.5%~6.3%，批间精密度为3.7%~4.4%。结论该方法的各项技术指标符合GBZ/T 210.5-2008《职业卫生标准制定指南第5部分：生物材料中化学物质测定方法》的要求。