高效液相色谱和超高效液相色谱在药物检验中的分析应用

高效液相色谱和超高效液相色谱在药物检验中的分析应用

麻荣丽

天津药物研究院药业有限责任公司天津300301

[摘要]：药物检验是临床用药的重要环节，也是影响用药安全的一个因素。目前，高效液相色谱（HPLC）与超高效液相色谱（UPLC）是药物检验分析的常用方法。笔者本文通过综述形式，分析观察HPLC与UPLC在药物检验中的应用分析。

[关键词]：高效液相色谱；超高效液相色谱；药物检验；应用分析

如今，医疗技术不断发展，新型药物不断研发，并且在临床得到广泛应用。临床用药中，药物检验是重要环节，直接关系用药安全。目前，我们常用的药物检验方法有高效液相色谱和超高效液相色谱。在此，笔者通过查阅相关文献资料，结合自己的临床经验，探究高效液相色谱和超高效液相色谱在药物检验中的应用。

1高效液相色谱（HPLC）

1.1HPLC的简介

高效液相色谱（HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC）简称为HPLC，是一种结合液相色谱与气相色谱基础理论及技术的分离分析法【1】。其主要是结合输液系统，将多种溶剂按不同比例进行混合，缓冲液以及流动相泵装入固定的色谱柱中。通过对应的分析处理后，再将其送入检测容器中进行试样试验，这种方式在我国现代化医学以及农业和商检、法检中较为常用。

色谱法中，HPLC是重要一个分支。其中，液体是流动相重要成分，通过压力作用，将其挤压至固定相中。HPLC，具有“四高一广”特征，其中，四高是指“高速度”、“高压强”、“高效率”、“高灵敏度”，一广是指“应用范围广”。HPLC处理药品时，操作简单，组分回收容易【2】。这种技术的应用原理是“柱外效应”，特点在于可以反复利用，不会破坏样品，不过这种处理方式存在一定缺陷，在进样以及检测器处理时候，会让整个流动的流动相有所变化，分离的物质扩散以及滞留都会影响色谱峰的加宽。

1.2HPLC在药物检验中的应用

药物鉴别中，HPLC根据供试品的含量，开展实验。实验中，药物保留时间容易受到样品组分的性质及结构影响，性质与结构存在差异，因此，不同药物出峰时间有所不同，属于定性参数。

孙艳妮等【3】在吴茱萸中生物胺实验中，采用高效液相色谱法，分离效果好，且线性关系满意，成功鉴别出生物胺类成分。

麦洁萍【4】测定水中酚类化合物时，采用高效液相色谱法，结果发现，氯酚类化合物最佳洗脱时间为5分钟，最佳萃取时间为1小时。

另外，我们在测定、鉴别多数头孢类药物（如头孢拉定）和氟喹诺酮类抗菌药（如氧氟沙星）等药物时，也可采取高效液相色谱法。

2超高效液相色谱（UPLC）

2.1UPLC的简介

超高效液相色谱（UltraPerformanceLiquidChromatography，UPLC）在分离学科中较为流行，UPLC属于新型液相色谱技术。UPLC，采用小型颗粒填料色谱柱以及超高压系统，具有分辨率高、灵敏度高的特点，分析速度极快【5】。UPLC实验原理与HPLC相似，不同点在于色谱柱粒径差异【6】。值得注意的是，这种技术的优点在于实现了小颗粒填料以及非常低系统的和快速检测的技术特点，加强了整个分析的通量以及敏感度。其中，UPLC的粒径更小一些，约为1.7um，柱子压力更大，分析过程通量增加，提高灵敏度【7】。在速度、灵敏度和分离度方面，相比HPLC，UPLC均有所改进。正是因为这些优点，超高液相色谱仪开始投向于多个液相实验研究中。

2.2UPLC在药物检验中的应用

2008年，STORBECK、KOLAR等【8】通过定量分离来自异源表达媒体的肾上腺类固醇代谢物，最先建立超高效液相色谱-大气压化学电离质谱法（UPLC-AP-CI-MS）。本试验中，采取液-液萃取法，提取类固醇，通过WaterUPLCBEHC18色谱柱分离处理，经APCI电离，基于APCI正单离子监测模式下，应用三重四级杆质谱仪，完成检波。联合应用超高效液相色谱，共监测出5-40ng/ml结构密度相关的类固醇7个，运行时间11分钟。与HPLC法对比，UPLC法短时间内鉴别药物，方法简单且快速，准确。

3药物检验中，UPLC与HPLC对比研究

2014年，吴世斌等【9】学者在检测重组人胰岛素、猪胰岛素以及重组赖脯胰岛素时，分别应用UPLC法与HPLC法。HPLC法，94分钟内完成检测，上述3种胰岛素类似物分离度分别为1.31、1.53、1.42。UPLC法，38分钟便完成检测，分离度分别是1.49、1.30、1.50。比较发现，UPLC法可缩短检测时间，而且结果更加精准，成本低。

中药方面，UPLC法与HPLC法的应用价值也较高。张敏娟【10】等学者采取上述2种方法测定复方黄连素片中吴茱萸碱及次碱含量。结果，HPLC法在1小时内完成检测，UPLC法10分钟左右就完成了检测。另外，HPLC法检测显示，吴茱萸次碱0.409-5.110ug范围内可获取较好的线性关系，吴茱萸碱在0.425-5.30ug范围内可获取较好的线性关系。UPLC法检测，吴茱萸次碱、吴茱萸碱分别于0.102-0.715ug、0.106-0.743ug范围内时可取得良好线性关系。另外，UPLC法与HPLC法的回收率都较高，均>98%。

综上所述，UPLC技术不断发展，在分离中药复杂体系中应用较广。实践应用中，我们可以根据药物类型及性质，选择UPLC法与HPLC法进行检测，保证检测的准确性与有效性。

参考文献：

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[2]郑勤琴,项勋,段纲,代飞燕,邓紫艳,常华.高效液相色谱和超高效液相色谱在药物分析中的应用研究[J].上海畜牧兽医通讯,2017(02):57-59.

[3]许韡,王丹侠.高效液相色谱与液相-质谱联用在水质检测中的应用[J].职业与健康,2017,33(14):2004-2008.

[4]张帅,丛海林,于冰.超高效液相色谱的发展及在分析领域的应用[J].分析仪器,2017(06):16-27.

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[7]盈竞男,韩新民.超高效液相色谱在中药及其复方研究中的应用进展[J].江苏中医药,2015,47(04):81-84.

[8]刘洋.超高效液相色谱及其于药物分析领域的应用[J].轻工科技,2015,31(03):108-109.

[9]王菲菲,张聿梅,马双成,戴忠,刘斌.高效薄层色谱、柱前衍生-超高效液相色谱和离子色谱分析疏血通注射液中游离氨基酸的比较[J].药学学报,2016,51(03):439-443.

[10]杨倩,王志英,唐素芳.二维超高效液相色谱-QTof质谱联用技术在盐酸博来霉素杂质谱研究中的应用[J].药物分析杂志,2016,36(07):1231-1242.