简介：摘要目的观察慢病毒（LV）介导miR-191对体外培养的人视网膜血管内皮细胞（hREC）增生和血管生成的抑制作用。方法体外培养hREC细胞系，分为对照组、缺氧组、LV-空载体（LV-vector）组、LV-miR-191 （LV-191）组。LV-vector组、LV-191组分别转入相应的慢病毒载体。采用流式细胞仪检测细胞转染率；细胞计数试剂盒-8 （CCK-8）实验检测细胞增生能力；划痕实验和侵袭小室（Transwell）实验检测细胞迁移能力；Matrigel实验检测细胞管腔形成能力；实时定量聚合酶链反应（qPCR）检测miR-191相对表达量及其下游靶基因p21、血管内皮生长因子（VEGF）、细胞分裂蛋白激酶（CDK）6、细胞周期蛋白-D1 (Cyclin D1）mRNA相对表达量。两两比较采用独立样本t检验。结果流式细胞仪检测结果显示，对照组、LV-191组细胞转染率分别为0.615%、99.400%。CCK-8、细胞划痕、Transwell细胞迁移、Matrigel实验结果显示，与对照组比较，缺氧组、LV-vector组细胞增生数量明显增多（t=6.130、4.606 ）、细胞迁移率明显增高（t=4.910、6.702 ）、微孔膜上染色的细胞数量明显增多（t=7.244、6.724 ）、细胞管腔形成能力增强（t=8.345、9.859），LV-191组细胞增生数量明显减少（t=14.710）、细胞迁移率明显降低（t=6.245 ），微孔膜上染色的细胞数量明显减少（t=5.333）、细胞管腔形成能力明显减弱（t=5.892 ），差异均有统计学意义（P≤0.01）。qPCR检测结果显示，与对照组、LV-vector组比较，LV-191组细胞中miR-191 mRNA相对表达量明显上调（t=44.110、42.680），Cyclin D1 （t=29.940、14.010）、CDK6 （t=15.200、7.645）mRNA相对表达量明显下降，差异均有统计学意义（P<0.01）；p21 mRNA相对表达量增高，但差异无统计学意义（t=2.013、2.755，P>0.05）。4组细胞中VEGF mRNA相对表达量比较，差异无统计学意义（F=0.966，P>0.05 ）。结论miR-191可通过上调p21 mRNA表达，下调CDK6、Cyclin D1 mRNA表达，抑制hREC增生、迁移及管腔形成。

简介：摘要近年来研究发现愈合伤口中微血管生成数量增多与瘢痕的形成关系密切。在伤口愈合时，初始强烈的血管反应导致组织中血管密度远远超过未受伤的组织过量的血管生成与瘢痕形成之间确实存在着一定的联系，但过量血管生成对于瘢痕形成的影响并没有一个定量的标准，同时也可以肯定的是抗血管生成的方法能够减少瘢痕的形成。现总结了伤口愈合阶段中，血管生成与瘢痕形成相关的各个因素，从血管生成和消退，血管数量对瘢痕形成的影响，以及血管生成对愈合的影响，探讨了血管生成与瘢痕形成之间的关系。

简介：无

简介：摘要目的探讨放射性125I粒子对肝癌裸鼠皮下移植瘤微血管形成的影响及其机制。方法构建人肝癌Huh7细胞裸鼠皮下移植瘤模型，将12只裸鼠用随机数表法分为观察组和对照组，每组6只。观察组移植瘤植入一枚活度为2.96×107Bq粒子，对照组植入一枚活度为0的空粒子。每4天测量1次移植瘤体积，记录肿瘤生长曲线。28 d后取下移植瘤，用免疫组织化学染色法检测CD31评估移植瘤微血管密度(MVD)。用免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达，并做半定量分析。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGF-A、HIF-1α mRNA的表达。结果观察组移植瘤的生长速度较对照组缓慢，粒子植入后12 d两组肿瘤体积差异有统计学意义(t＝3.167，P<0.05)，随着观察时间延长，两组肿瘤体积差距加大，在28 d时两组肿瘤体积分别为(963.61±89.56)mm3和(602.10±75.98)mm3(t＝7.122，P<0.05)。两组移植瘤组织中CD31均有表达，观察组的MVD较对照组少，差异有统计学意义(t＝6.360，P<0.05)。观察组VEGF-A、HIF-1α mRNA及蛋白的表达水平均低于对照组，差异均有统计学意义(t＝10.480、6.414、10.890、12.250，P<0.05)。结论放射性125I粒子通过降低肿瘤微血管密度抑制肝癌移植瘤的生长，其机制可能与VEGF-A、HIF-1α的mRNA及蛋白表达减少有关。

简介：摘要目的探究牵张力对3D打印组织血管形成的调控作用及其涉及的分子机制。方法以脐静脉内皮细胞、成纤维细胞为种子细胞，明胶、透明质酸、纤维蛋白为支架材料，进行3D打印。以聚己内酯(polycaprolactone，PCL)支架固定打印组织建立牵张力调控血管形成模型。用活/死细胞染色试剂盒检测打印组织内细胞的活性。通过免疫荧光染色CD31观察血管形成，实时定量PCR检测CDC42表达。结果3D打印组织培养14 d，细胞活性为(96.7±0.7)%。与对照组打印组织相比，牵张力组打印组织血管生长方向与牵张力方向基本一致，血管分支数量显著减少。进一步研究发现，牵张力组打印组织CDC42表达显著降低，用含CDC42激动剂的培养基培养牵张力组打印组织能显著增加血管分支数量。结论牵张力对3D打印组织血管分支形成具有抑制作用，可能通过下调CDC42表达减少血管分支形成。该研究可能为组织工程皮肤血管化的调控提供有效方法。

简介：摘要目的分析核蛋白14 （NOP14）对黑素瘤血管形成的影响。方法收集2016年1月至2018年12月在广州市第一人民医院经病理确诊的40例黑素瘤患者的黑素瘤组织，免疫组化检测NOP14和CD31[以微血管密度（MVD）表示]的表达。将黑素瘤细胞A375和SK-MEL-1细胞分别分为4组，分别转染空载体（空载体组）、NOP14过表达载体（NOP14组）、靶向NOP14的siRNA（siNOP14组）和阴性对照siRNA（siNC组）。荧光定量PCR和Western印迹检测各组NOP14 mRNA和蛋白的表达，Western印迹和ELISA检测细胞及其培养基中血管内皮生长因子（VEGF）和血管内皮生长因子受体（VEGFR）的表达。利用Transwell小室构建以上各组A375、SK-MEL-1细胞与人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共培养模型，利用CCK8、Transwell小室和Matrigel血管拟态实验检测共培养后各组HUVEC的增殖、迁移、侵袭和管腔形成能力。采用线性回归模型分析黑素瘤组织中NOP14表达水平与MVD的关系，多因素方差分析检验细胞增殖活性的差异，其余实验指标的两组之间比较采用独立样本t检验。结果NOP14高表达组（20例）黑素瘤组织MVD为44 ± 13，中表达组（17例）为58 ± 16，低表达组（3例）为62 ± 11，且NOP14表达和MVD呈负相关（r = -0.525，P = 0.017）。与空载体组相比，NOP14组A375和SK-MEL-1细胞及培养基中VEGF和VEGFR的表达水平均显著降低（P < 0.05）。与siNC组相比，siNOP14组A375和SK-MEL-1细胞及培养基中VEGF和VEGFR的表达水平均显著升高（P < 0.05）。在A375与HUVEC共培养模型中，与空载体共组相比，NOP14组HUVEC的增殖活性（F = 131.85，P < 0.05）和迁移细胞数[22 ± 5比63 ± 8，t = 7.07，P = 0.002）、侵袭细胞数（14 ± 5比45 ± 10，t = 4.94，P = 0.008）及分支节点数（8 ± 2比14 ± 3，t = 5.06，P < 0.001）均显著下降；与siNC组相比，siNOP14组HUVEC的增殖活性（F = 79.92，P < 0.01）和迁移细胞数（152 ± 30比59 ± 4，t = 5.36，P = 0.006）、侵袭细胞数（134 ± 21比50 ± 8，t = 6.40，P < 0.001）及分支节点数（27 ± 3比15 ± 4，t = 6.10，P < 0.001）显著升高。在SK-MEL-1细胞与HUVEC共培养模型中，各组HUVEC的增殖、迁移和侵袭活性以及管腔形成能力和与各组A375细胞共培养的HUVEC变化趋势一致。结论黑素瘤组织中NOP14表达和MVD呈负相关，NOP14具有抑制黑素瘤血管新生的作用。

简介：摘要目的探讨P311对人微血管内皮细胞1（HMEC-1）血管形成能力的影响及其可能的分子机制。方法采用实验研究方法。取HMEC-1，按随机数字表法（分组方法下同）分为P311腺病毒组和空载腺病毒组，分别进行48 h相应转染后，采用细胞计数试剂盒8法检测培养1、3、5 d细胞增殖活性；划痕试验检测细胞划痕后6、11 h剩余划痕面积，并计算剩余划痕面积百分比；体外血管形成实验观察细胞培养8 h血管形成情况，并测量管状结构节点数和总长度；蛋白质印迹法检测细胞中血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）、磷酸化VEGFR2、胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）及磷酸化ERK1/2蛋白表达量。取HMEC-1，分为P311腺病毒+阴性对照小干扰RNA（siRNA）组、空载腺病毒+阴性对照siRNA组、P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组和空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组，分别进行相应的处理，蛋白质印迹法检测转染24 h细胞中VEGFR2、磷酸化VEGFR2、ERK1/2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量；体外血管形成实验观察转染24 h细胞血管形成情况，并测量管状结构节点数和总长度。取HMEC-1，分为P311腺病毒+二甲基亚砜（DMSO）组、空载腺病毒+DMSO组、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组和空载腺病毒+ERK1/2抑制剂组，分别进行相应的处理。蛋白质印迹法检测处理2 h细胞中ERK1/2及磷酸化ERK1/2蛋白表达量；体外血管形成实验观察处理2 h细胞血管形成情况，并测量管状结构节点数和总长度。各组各时间点样本数均为6。对数据行独立样本t检验、重复测量方差分析、单因素方差分析、LSD检验。结果与空载腺病毒组比较，P311腺病毒组细胞培养1、3、5 d增殖活性均没有明显改变（t值分别为-0.23、-1.30、-1.52，P>0.05）。P311腺病毒组细胞划痕后6、11 h剩余划痕面积百分比均较空载腺病毒组明显降低（t值分别为-2.47、-2.62，P<0.05）。培养8 h，与空载腺病毒组比较，P311腺病毒组细胞管状结构节点数和总长度均明显增加（t值分别为4.49、4.78，P<0.01）。转染48 h，与空载腺病毒组比较，P311腺病毒组细胞VEGFR2、ERK1/2蛋白表达量均无明显变化（P>0.05），磷酸化VEGFR2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显升高（t值分别为17.27、16.08，P<0.01）。转染24 h，P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞磷酸化VEGFR2和磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于空载腺病毒+阴性对照siRNA组（P<0.01），P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞VEGFR2、磷酸化VEGFR2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组（P<0.01），空载腺病毒+阴性对照siRNA组细胞VEGFR2、磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组（P<0.05或P<0.01）。转染24 h，P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞管状结构节点数为（720±62）个，明显多于空载腺病毒+阴性对照siRNA组的（428±38）个、P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组的（364±57）个（P值均<0.01）；P311腺病毒+阴性对照siRNA组细胞管状结构总长度为（21 241±1 139）μm，明显长于空载腺病毒+阴性对照siRNA组的（17 005±1 156）μm、P311腺病毒+siRNA-VEGFR2组的（13 494±2 465）μm（P值均<0.01）。空载腺病毒+阴性对照siRNA组细胞管状结构节点数明显多于空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组的（310±75）个（P<0.01），管状结构总长度明显长于空载腺病毒+siRNA-VEGFR2组的（11 600±2 776）μm（P<0.01）。处理2 h，P311腺病毒+DMSO组细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达量明显高于空载腺病毒+DMSO组、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组（P值均<0.01），空载腺病毒+DMSO组细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达量明显高于空载腺病毒+ERK1/2抑制剂组（P<0.05）。处理2 h，P311腺病毒+DMSO组细胞管状结构节点数为（726±72）个，明显多于空载腺病毒+DMSO组的（421±39）个、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组的（365±41）个（P值均<0.01）；P311腺病毒+DMSO组细胞管状结构总长度为（20 318±1 433）μm，明显长于空载腺病毒+DMSO组的（16 846±1 464）μm、P311腺病毒+ERK1/2抑制剂组的（15 114±1 950）μm（P值均<0.01）。空载腺病毒+DMSO组管状结构节点数明显多于空载腺病毒+ERK1/2抑制剂组的（317±67）个（P<0.01），管状结构总长度明显长于空载腺病毒+ERK1/2抑制剂组的（13 188±2 306）μm（P<0.01）。结论P311能够通过激活VEGFR2/ERK1/2信号通路发挥促进HMEC-1血管形成的作用。

简介：摘要目的探讨去铁胺通过影响骨内H型血管对骨密度的改善情况。方法选取雌性8周龄野生型C57BL/6J小鼠30只(实验动物来自南京大学动物模式所)，分为3组：假手术组(Sham组)、切除卵巢组(OVX组)及切除卵巢注射去铁胺组(OVX＋DFO组)，10只/组。Sham组手术中仅暴露双侧卵巢，并切除其周围少许脂肪组织；OVX组手术中结扎双侧输卵管并完整切除双侧卵巢；OVX＋DFO组切除双侧卵巢后腹腔注射DFO，隔日1次。4周后取材股骨标本以观察骨密度及骨小梁显微结构的变化。取材胫骨标本观察组间小鼠骨标本中H型血管的变化，检测H型血管的量，并采用方差分析进行相关数据的处理。结果3组小鼠骨密度分别为Sham组(0.18±0.01) g/cm3，OVX组(0.12±0.00) g/cm3，OVX＋DFO组(0.16±0.01) g/cm3，OVX＋DFO组较OVX组骨密度明显改善，组间差异有统计学意义(F＝20.790，P<0.01)。骨小梁显微结构的变化：骨小梁体积分数OVX组为(11.47±0.79)%，Sham组为(26.05±2.05)%，OVX＋DFO组为(18.44±3.26)%，骨小梁体积分数OVX组较Sham组明显减少，而OVX＋DFO组得到改善，组间差异有统计学意义(F＝31.000，P<0.01)。骨小梁的数目Sham组为(2.81±0.13)个/mm，OVX组为(1.63±0.15)个/mm，OVX＋DFO组为(2.36±0.43)个/mm，骨小梁数目OVX组较Sham组减少，而DFO干预后每毫米长度骨小梁数目增加，组间差异有统计学意义(F＝14.290，P<0.01)。骨小梁厚度OVX组为(0.05±0.01) mm，Sham组为(0.07±0.00) mm，OVX＋DFO组为(0.06±0.00) mm，组间差异有统计学意义(F＝20.060，P<0.01)。骨小梁间隙OVX组为(0.29±0.03) mm，Sham组为(0.19±0.01) mm，OVX＋DFO组为(0.24±0.04) mm，组间差异有统计学意义(F＝9.450，P<0.05)。骨小梁连接密度Sham组为(202.67±37.75)/mm3，OVX组为(97.85±8.62)/mm3，OVX＋DFO组为(115.79±15.90)/mm3，组间差异有统计学意义(F＝16.140，P<0.01)。3组小鼠的胫骨标本经免疫荧光染色的标准流程处理后，分别计算各组骨标本干骺端H型血管的面积占比，Sham组H型血管面积占比为(26.28±1.23)%，OVX组H型血管的面积占比为(8.72±0.85)%，OVX＋DFO组H型血管的面积占比为(17.25±2.14)%，可见骨质疏松症小鼠骨内H型血管明显减少，而DFO干预组骨内H型血管较OVX组增加，组间差异有统计学意义(F＝160.000，P<0.01)。结论在骨质疏松症的小鼠模型中，H型血管参与了骨质疏松症的发生，去铁胺可能通过增强骨内H型血管从而改善骨密度。

简介：摘要目的建立未成年兔骺板损伤模型，探究隐血管骨膜瓣预防骺板损伤后骨桥形成的效果。方法2017年7月至2018年1月，将30只新西兰幼兔随机分为A、B、C组（每组10只），解剖其膝关节血管，设计隐血管骨膜瓣。用直径为3.0 mm克氏针损伤幼兔单侧股骨远端骨骺，建立骺板损伤的模型，为实验侧，另一侧作为对照侧。对损伤的骨骺分别进行以下处理：A组实验侧切取与C组实验侧相同大小的骨膜并舍弃；B组实验侧在损伤区填充不带血管蒂的骨膜瓣；C组实验侧在损伤区填充隐血管蒂的骨膜瓣。术后24周测量股骨标本的长度及内外翻角，评估骺板损伤对骨骼生长的影响，并通过脱钙标本的剖面观、苏木素-伊红（HE）染色和甲苯胺蓝染色，评估隐血管骨膜瓣预防骨桥形成的效果。计量资料以均值±标准差（Mean±SD）表示，组内及组间数据比较采用单因素方差分析（ANOVA），P<0.05为差异有统计学意义。结果A、B两组实验侧股骨均较对照侧表现出明显短缩与外翻畸形，组内两侧股骨长度与外翻角差异有统计学意义（P<0.05）,C组实验侧股骨长度及外翻角与对照侧相比差异无统计学意义（P>0.05）。剖面观显示A组骨骺损伤区出现骨桥，与周围骺板界限清楚；B组损伤区骨膜瓣被吸收，以纤维组织填充为主，伴有少许浅白色骨组织形成，与周围骺板界限清楚；C组损伤区由与骺板色泽相同的乳白色透明软骨组织填充，与骺板界限不清。HE及甲苯胺蓝染色发现,A组损伤区填充大量的骨组织，未见软骨组织；B组损伤区主要为纤维组织，可发现少量的骨组织；C组沿着损伤区隧道有大量透明软骨组织形成，且与正常骺板连接紧密。结论骺板损伤后隐血管骨膜瓣填充可预防骨桥形成，避免患肢出现短缩及成角畸形。

简介：摘要目的观察氧化应激条件下骨形成蛋白4（BMP4）对人视网膜微血管内皮细胞（hRMEC）的增生和迁移影响。方法将体外培养的hRMEC分为对照组、4-羟基壬烯醛（HNE）处理组（4-HNE组）、4-HNE+BMP4处理组（BMP4组）。4-HNE组细胞培养基加入10 μmmol/L 4-HNE；BMP4组细胞培养基加入10 μmmol/L 4-HNE刺激6 h后，再加入100 ng/ml重组人BMP4。噻唑蓝比色法检测4-HNE、BMP4对hRMEC生存力的影响。细胞划痕实验测定4-HNE、BMP4对细胞迁移能力的影响。实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测对照组、4-HNE组细胞中BMP4 mRNA相对表达量以及对照组、BMP4组细胞中纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白（Laminin）、α-平滑肌收缩蛋白（α-SMA）、胶原蛋白Ⅰ型（Collagen Ⅰ）、血管内皮生长因子（VEGF）、结缔组织生长因子（CTGF）mRNA相对表达量。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测对照组、4-HNE组细胞中BMP4蛋白相对表达量。两组间比较采用t检验。结果与对照组比较，4-HNE组、BMP4组细胞生存力（t=12.73、16.26，P=0.000 2、<0.000 1）、细胞迁移率（t=28.17、37.48，P<0.000 1、<0.000 1）均明显提高，差异有统计学意义；4-HNE组细胞中BMP4 mRNA、蛋白相对表达量明显升高，差异有统计学意义（t=16.36、69.35，P=0.000 1、<0.000 1）。qRT-PCR检测结果显示，与对照组比较，BMP4组细胞中VEGF、FN、Laminin、α-SMA、Collagen Ⅰ、CTGF mRNA相对表达量明显升高，差异有统计学意义（t=10.61、17.00、14.85、7.78、12.02、10.61，P=0.0004、<0.000 1、0.000 1、0.001 5、0.000 1、0.000 4）。结论BMP4可诱导hRMEC的增生和迁移，并可调控hRMEC中血管生成因子和纤维化相关因子表达。

简介：摘要颈动脉粥样硬化性狭窄与卒中发病及复发风险增高相关。易损斑块的组织病理学特征包括存在脂质坏死核心、斑块内出血、斑块内新生血管形成、活动性炎症以及薄/破裂的纤维帽。斑块内新生血管形成会促进斑块内出血，且与斑块破裂、局部栓子形成及远端栓塞相关。对比增强超声能通过评价斑块内新生血管形成来识别颈动脉易损斑块。

简介：摘要目的探讨血管内联合治疗出血性颅内静脉窦血栓形成的安全性及有效性。方法回顾性分析2019年3—11月苏州大学附属第一医院神经外科收治的8例急性或亚急性颅内静脉窦血栓形成患者，所有患者均表现为脑实质出血或伴有脑梗死。8例患者术中均联合应用机械碎栓、支架取栓、导管抽吸、球囊扩张、接触性溶栓等方案。1例患者因病情进展迅速，血管内治疗后行去骨瓣减压术。术后及随访时观察静脉窦的再通情况，并采用改良Rankin量表评分(mRS)评估患者的预后。结果8例患者均经CT静脉成像或磁共振静脉成像提示静脉窦部分再通后拔除微导管。术后患者均于静脉窦内留置微导管系统，留置时间为4～10 d，其中7例行3～8 d的接触性溶栓治疗，并规律应用抗凝药物治疗≥6个月。所有患者术后1周内均未见出血进展，闭塞的静脉窦均大部分再通；1个月内颅内出血吸收、水肿消退。8例患者予以对症治疗后均治愈出院，随访时间为6～15个月，未见静脉窦血栓复发及新发神经系统症状。术后6个月随访mRS ，其中0分3例，1分3例，2分1例，3分1例。结论在规范抗凝治疗的基础上联合应用多种血管内治疗方案，可在短时间内减轻静脉窦内的血栓负荷，是治疗出血型颅内静脉窦血栓形成安全、有效的方法。

简介：摘要介绍一种新的皮肌炎皮疹类型——假性血管性水肿，其特点为患者面部、口唇、四肢为主出现局限性或弥漫性水肿，非凹陷性，可伴或不伴红斑，皮疹无明显瘙痒。大部分伴假性血管性水肿的皮肌炎患者抗转录中介因子1γ抗体阳性，会出现严重肌肉损伤，肌酶异常增高，以及难治性吞咽困难；少部分患者抗黑素瘤分化相关基因5抗体阳性，此类患者均有肺部累及。因此，皮肌炎患者出现假性血管性水肿时需要高度重视，抗体筛查有助于患者早期诊断和早期差异化治疗，改善患者的症状体征，提高患者的生存率。

简介：摘要目的研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）构象与唑来膦酸的关系，揭示唑来膦酸抑制血管形成的机制。方法对唑来膦酸和VEGF结构进行预处理，模拟分子对接，精确筛选两者最佳的结合构象。细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）法、体内、外血管生成、免疫荧光和蛋白质印迹法等方法检测不同浓度唑来膦酸（A组为0 μmol/L，B、C、D组分别为25、50和100 μmol/L）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell，HUVEC）的增殖、血管形成及成血管相关分子的影响。结果靶蛋白VEGF构象上存在唑来膦酸结合位点，亲和能为-5.2 kcal/mol，由氨基酸Cys26，51，57等构成的疏水区域和A链（ASP34，SER50）、B链（CYS61、68，LEU66，GLY59）等构成的氢键结合区域组成。CCK-8结果显示，3~6 d各个时间点B、C、D组的A值均显著低于A组（P<0.05）；体外血管实验显示，B、C、D组出芽数［分别为（208±28）、（151±21）和（62±9）个］均显著低于A组［（276±30）个］（P<0.05）；体内血管实验显示，A组Matrigel凝胶/血浆荧光比值（0.003 1±0.000 3）显著高于B组（0.002 1±0.000 2）、C组（0.001 6±0.000 2）和D组（0.000 6±0.000 1）（P<0.05）；蛋白质印迹法结果显示，B、C、D组VEGF的表达量［分别为（0.72±0.11）、（0.41±0.07）和（0.24±0.04）］均显著低于A组（1.01±0.02）（P<0.05）；B、C、D组缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）的表达量［分别为（0.68±0.09）、（0.55±0.06）和（0.43±0.08）］均显著低于A组（0.96±0.04）（P<0.05）。结论唑来膦酸可抑制HUVEC细胞增殖、体内、外血管形成及VEGF/HIF-1α的表达。VEGF构象上存在与唑来膦酸结合位点，位于氨基酸的疏水区域和氢键结合区域，设计针对此位点的拮抗剂有潜在缓解唑来膦酸抑制血管生成的作用。

简介：摘要低氧诱导因子-1(HIF-1)是机体内重要的转录因子，在低氧状态下介导一系列靶基因转录以适应低氧反应。氧诱导视网膜新生血管形成(RNV)是早产儿视网膜病(ROP)的重要病理过程。HIF-1可通过介导血管内皮生长因子、血管生成素、血小板衍生生长因子等的转录促进RNV，进而导致ROP，因此，HIF-1在ROP的病理过程中发挥重要作用。现总结近年来HIF-1在氧诱导RNV中的相关研究进展，以期对ROP的发病机制及治疗有更进一步认识与启发。

简介：摘要在获得Bone杂志的授权后，本文对该刊发表于2019年2月的文章[Wu J, Wang A, Wang X, et al. Rapamycin improves bone mass in high-turnover osteoporosis with iron accumulation through positive effects on osteogenesis and angiogenesis. Bone, 2019，121：16-28]进行中文编译。铁蓄积是骨质疏松症的独立危险因素，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在骨形成和血管生成中有着重要的作用。本研究旨在明确mTOR在铁蓄积相关骨质疏松症中的作用及其可能的分子机制，以及雷帕霉素是否能通过靶向mTOR达到有效的治疗效果。构建野生型铁蓄积骨质疏松模型小鼠和转基因(Hepc-/-)铁蓄积骨质疏松模型小鼠，检测体内mTOR水平，体外利用枸橼酸铁铵(FAC)干预成骨细胞，观察mTOR变化，在动物水平采用雷帕霉素干预及在体外细胞水平转染mTOR特异性的siRNA，观察雷帕霉素对铁蓄积骨质疏松模型小鼠骨参数、骨形成和血管生成的影响。结果显示，野生型铁蓄积骨质疏松模型小鼠和Hepc-/-铁蓄积骨质疏松模型小鼠体内的mTOR水平均显著上升，上调的mTOR能够通过激活Cxcl9的表达和分泌，抑制骨组织中"骨形成与血管生成偶联" 。在动物水平采用雷帕霉素干预及在体外细胞水平转染mTOR特异性的siRNA可改善铁蓄积影响的骨形成及骨内血管的生成能力。在成骨细胞中铁蓄积可激活mTOR/STAT1/Cxcl9信号通路，这些结果提示mTOR在铁蓄积骨质疏松症中起关键作用，雷帕霉素能够有效靶向针对mTOR改善骨形成与骨内血管生成，提高伴铁蓄积骨质疏松小鼠的骨量。

简介：摘要脉络膜新生血管（CNV）是导致渗出型老年性黄斑变性（wAMD）患者中心视力丧失的主要原因。吸烟不仅增加wAMD患者CNV发生率，还加重wAMD患者病情，使其临床治疗效果及预后更差。尼古丁作为烟草中的重要有害物质，是一种易成瘾且高毒性的生物碱。动物实验和临床研究均证实，尼古丁可通过烟碱型乙酰胆碱受体、骨髓原始细胞、炎症、补体系统等介导血管生成，加重wAMD。积极探讨尼古丁加重wAMD CNV形成的确切机制，有助于早期采取相应干预措施来预防或延缓其发展。

简介：无

简介：摘要目的观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)是否促进角质形成细胞(KCs)中血管内皮细胞因子CD34的表达。方法2020年10月至2021年7月，15只C57BL/6小鼠背部制作全皮层缺损创面，给予及时护理，分别取正常组织及第1、3、5、7天创面组织进行蛋白免疫印迹法(Western blot)检测VEGF表达。细胞实验分为KCs组和KCs+VEGF组，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CD34信使RNA(mRNA)水平，Western blot检测CD34、Delta样配体4(DLL4)、肝配蛋白B2 (Ephrin B2)蛋白水平的表达；加入VEGF组和VEGF+VEGF抑制剂L-685458组采用Western blot检测CD34蛋白表达。应用图像处理软件Image J和统计软件GraphPad Prism6分析，两组间比较采用t检验，多组间采用单因素方差分析。结果随着时间的推移，创面组织中VEGF蛋白表达水平呈动态升高(N＝0.344±0.037，d1＝0.158±0.019，d3＝0.298±0.006，d5＝0.509±0.066，d7＝1.056±0.172，F＝172.8，P<0.01)。加入VEGF后，角质形成细胞CD34 mRNA表达增加(KCs＝1.33±0.36，KCs+VEGF＝5.04±0.51，t＝10.25，P<0.01)，CD34、DLL4、Ephrin B2蛋白表达水平升高(KCs＝0.268±0.026，KCs+VEGF＝0.693±0.005，tCD34＝27.78，PCD34<0.01；KCs＝0.172±0.063，KCs+VEGF＝0.609±0.171，tDLL4＝4.785，PDLL4<0.05；KCs＝0.293±0.031，KCs+VEGF＝0.835±0.049，tEphrin B2＝16.26，PEphrin B2<0.05)，而加入VEGF抑制剂L-685458后，角质形成细胞中CD34表达低于VEGF组(VEGF＝0.777±0.053，VEGF+L-685458＝0.263±0.053，t＝11.83，P<0.01)。结论VEGF促进角质形成细胞中血管内皮细胞相关因子CD34、DLL4、Ephrin B2的表达。

简介：摘要在全球范围内，每年有200多万例骨移植手术用于骨科、神经外科和牙科手术中的骨缺损。目前的治疗方案包括使用人、动物或合成来源的移植物。在这种情况下，自体移植是目前的黄金标准。然而它的数量是有限的，需要创建第二个伤口(供体部位)，并且感染、疼痛和发病率的风险也随之提高。近年来，组织工程与3D生物打印的兴起，为治疗患者骨缺损提供一种新思路。3D生物打印是"增材制造"在生物组织工程中应用的分支，能对细胞进行精确控制，并按需实现个性化构建宏观及微观的结构，能在骨再生运用中得到运用。其中成骨细胞支架的建立是3D生物打印的基础，具有适宜骨和软骨生长的水凝胶是支架研究的基础，为此国内外学者进行多种水凝胶支架的开发与研究，发现由多种生物材料混合的水凝胶比单一材料水凝胶更具有优势，如以羟基磷灰石或藻酸盐或透明质酸为主体混合几种或多种生物打印材料，结合所需细胞后最终形成的3D打印骨支架，比传统支架更能够促进骨成长分化。随着打印结构变厚，营养物质和氧气的扩散越来越困难，这在骨组织的重建中尤其如此，需要制造互连且有效的血管网络，因此支架中血管的形成是必不可少的环节。本文主要综述了3D生物打印中骨打印支架材料与血管网络形成的逐步探究进展。