简介：摘要目的构建一种新型阿霉素-壳聚糖乳酸盐纳米缓释载体用于骨肉瘤治疗研究。方法2%乳酸水溶液制备水溶性的壳聚糖乳酸盐，pH 5.0的反应体系中，壳聚糖乳酸盐与TPP以10:1的投料比制备载阿霉素的壳聚糖乳酸盐纳米微粒（ChLa-Dox NPs），动态光散射（DLS）分析其粒径、多分散系数、Zeta电位，扫描电镜进行微观形貌学表征，ChLa-Dox NPs的生物学效应检测则通过缓释载体体外缓释动力学、MG63骨肉瘤细胞系细胞毒性实验、细胞迁徙能力及流式细胞术检测。结果在pH 5.0及壳聚糖乳酸盐：TPP的投料比为10:1的反应条件下制备的ChLa-DoxNPs平均粒径为142.4±1.21 μm，多分散系数（PDI）为0.14±0.01，Zeta电位为+29.2 mV。ChLa-DoxNPs在体外10h时阿霉素达到缓释平台期，缓释12 h内阿霉素累积释放率为（69.4±2.6）%；MG63细胞系骨肉瘤细胞模型实验中，空载纳米微粒组细胞存活率为92.36±3.17%，而不同载药量的ChLa-Dox NPs组具备显著的骨肉瘤细胞杀伤作用。相比空载体组，ChLa-Dox NPs对骨肉瘤细胞迁徙能力有显著的抑制作用，明显促进骨肉瘤凋亡的发生[（凋亡率为（54.08±2.53%）]。结论经改良制备的载阿霉素壳聚糖乳酸盐纳米微粒符合抗肿瘤纳米载体的理化特性要求，生物相容性好，体外缓释动力学及抗骨肉瘤相关分子-细胞生物学检测表明其具备较好的阿霉素缓释特性，体外能有效的抑制骨肉瘤细胞增殖、迁徙并促进其凋亡，具有较明确的临床转化前景。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA) HIF2PUT对骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭过程的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测2015年7月至2019年7月在郑州大学第一附属医院病理科确诊的47例(其中男28例，女19例，年龄最大者45岁，最小者8岁，平均年龄20.24岁)骨肉瘤组织及2种骨肉瘤细胞株(MG63和HOS)中lncRNA HIF2PUT的表达。通过慢病毒筛选稳转株后，根据细胞转染分别设置实验组(过表达lncRNA HIF2PUT组)、空白转染组、空白对照组。噻唑蓝(MTT)实验、细胞迁移实验(Transwell)检测lncRNA HIF2PUT对骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭过程的影响，应用SPSS 21.0统计软件分析。结果lncRNA HIF2PUT在47例骨肉瘤组织中的表达量(39.56±0.48)显著低于其在正常组织中的表达量(79.56±1.16，t＝3.516，P<0.05)，差异有统计学意义，且lncRNA HIF2PUT在骨肉瘤细胞株MG63中表达水平高于在HOS细胞株中的表达。细胞功能实验表明，lncRNA HIF2PUT对骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭过程产生显著影响。MG63和HOS细胞的增殖明显受到抑制，其增殖指数均低于空白转染组、空白对照组(t＝4.785，P<0.05)，差异有统计学意义。MG63组迁移实验中细胞穿透数目分别为(154.36±13.85)、(196.32±13.52)、(258.63±12.35)个(t＝3.968，P<0.01)，差异有统计学意义；HOS组迁移实验中细胞穿透数目分别为(131.24±10.58)、(247.36±17.52)、(224.52±14.52)个(t＝3.052，P<0.01)，差异有统计学意义。MG63组侵袭实验中细胞穿透数目分别为(73.50±13.89)、(98.63±12.57)、(112.30±15.29)个(t＝23.178，P<0.01)，差异有统计学意义；HOS组侵袭实验中细胞穿透数目分别为(70.74±13.49)、(98.40±16.46)、(89.74±12.47)个(t＝14.275，P<0.01)，差异有统计学意义。MG63和HOS细胞实验中迁移和侵袭能力均低于空白转染组、空白对照组。结论lncRNA HIF2PUT在骨肉瘤组织及细胞株中明显低表达，lncRNA HIF2PUT的表达明显抑制了骨肉细胞的增殖、迁移和侵袭过程。

简介：骨肉瘤保肢治疗已成为骨肿瘤外科主要发展方向，骨肉瘤生物重建逐渐成为保肢治疗的首选方法。深低温冷冻灭活回植技术以其手术操作简单、成本低廉、保留了骨诱导生成能力等诸多优点而成为一种有广泛应用前景的生物型保肢技术。本文就深低温冷冻灭活技术在骨肉瘤保肢治疗中的应用及研究进展作一综述。

简介：目的体外实验研究左旋含羞草碱诱导骨肉瘤细胞的凋亡作用,并初步探讨其中的分子机制。方法体外培养骨肉瘤细胞系MG-63及U2-OS,给予0M,100M,200M和400M的左旋含羞草碱处理,同时在400M的左旋含羞草碱中加入100mg/mL柠檬酸铁胺（FAC）处理。CCK-8法检测骨肉瘤细胞系增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Hoechst染色法检测细胞核固缩比例,蛋白印迹检测左旋含羞草碱及FAC处理后骨肉瘤细胞DNA损伤修复相关蛋白表达。结果CCK-8法检测细胞增殖,当左旋含羞草碱浓度为400M时,MG-63及U2-OS的细胞抑制率可分别达到81.1%±1.6%和76.7%±2.1%;流式细胞术检测发现左旋含羞草碱处理48h后,MG-63及U2-OS的细胞凋亡率分别为54.1%±12.6%和46.2%±14.7%;Hoechst染色法显示,MG-63及U2-OS的细胞核固缩比例分别为53.8%±10.6%和49.2%±8.3%,而加入FAC后,则可以减弱左旋含羞草碱对骨肉瘤细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用;同时,蛋白印迹检测表明DNA损伤修复的关键蛋白表达水平在左旋含羞草碱及FAC处理后均发生显著改变。结论左旋含羞草碱可以有效抑制骨肉瘤细胞增殖并诱导骨肉瘤细胞凋亡,其分子机制与左旋含羞草碱的铁螯合作用有关。

简介：摘要目的研究分析骨肉瘤患者接受免疫组化检测CD146表达的意义。方法选取50例骨肉瘤患者，对患者使用免疫组化法检测CD146表达情况，并使用CD34标记肿瘤微血管密度，对患者的肿瘤组织CD146表达情况进行分析研究。结果骨肉瘤患者的组织内CD146以阳性表达为主，全部患者的切片中，有36例阳性，14例阴性，阳性率是72%。在光学显微镜下可见CD146表达阴性阳性判断是根据胞膜或胞浆中的颗粒颜色和胞质内的棕黄色颗粒出现情况来判断，在前者中出现为阳性，在后者中出现为阴性。此次呀就中患者的CD146表达和骨肉瘤分期和肺转移情况有直接联系（P<0.01）。结论骨肉瘤组织的CD146表达显示了患者的病情发生和发展情况，其分子水平高低是衡量骨肉瘤疾病活动情况的指标，临床中可以提供有价值的参考信息。

简介：目的：探讨人参皂苷对骨肉瘤患者血清血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤特异性生长因子（TSGF）的影响及临床疗效。方法：收集我院收治的骨肉瘤患者60例,根据用药不同分为对照组和实验组,每组30例。对照组采用FOLFOX4方案化疗,实验组在对照组基础上加用人参皂苷治疗。观察并比较两组患者治疗前后的肿瘤体积、血清VEGF及TSGF水平变化以及临床疗效。结果：与治疗前比较,两组患者治疗后的肿瘤体积均显著减小,血清VEGF及TSGF水平均显著下降,差异具有统计学意义（P〈0.05）;与对照组相比,实验组患者治疗后肿瘤体积减小更明显,血清VEGF及TSGF水平下降更显著,差异具有统计学意义（P〈0.05）;实验组患者治疗总有效率（80.0%）显著高于对照组（46.67%）,差异具有统计学意义（P=0.009）。结论：人参皂苷能够显著降低骨肉瘤患者血清VEGF及TSGF水平,减小肿瘤体积,临床疗效显著。

简介：摘要：目的 探索青少年骨肉瘤患者治疗早期实施以家庭为中心的护理模式对患者的影响。方法 将2018年10月～2O20年10月收治的86例青少年骨肉瘤患者及其家庭按目的抽样方法抽取为对照组和干预组，对照组给予常规护理，干预组实施以家庭为中心的护理模式；采用状态焦虑问卷(state anxiety inventory，SAI)，评估及对比两组患者及家属在疾病确诊后一周、术前第一次化疗和术前三个阶段的焦虑状况。结果 干预组患者及家属在不同阶段测量的SAI值均明显低于对照组，经检验差异有统计学意义(P < 0.05 )。结论 患者与家属不同阶段的焦虑程度有差异，实施以家庭为中心的护理模式不仅能帮助患者顺利克服心理障碍，同时能提供更有效的社会支持体系。

简介：摘要：目的：研究围手术期心理护理干预对骨肉瘤手术患者应激状态的影响。

简介：【摘要】 背景 我国每年癌症发病人数约200万，平均每90个家庭中就有1个癌症患者。癌症已成为我国劳动年龄人口伤残和死亡的第一原因。对晚期癌症患者实施安宁疗护，提高生命末期生存质量，满足患者和家属的需要，已成为护理工作中非常重要的内容。该文总结了运用安宁疗护的理念、知识和技能对1例右股骨肉瘤伴广泛转移患者和家属进行安宁疗护的实践经验。目的 通过实施安宁疗护症状管理，为疾病终末期患者在临终前提供身体、心理、精神等方面的照料和人文关怀等服务，控制痛苦和不适症状，提高生命质量，帮助患者舒适，安详，有尊严地离世，为今后继续开展安宁疗护服务提供专业指导。方法 运用疼痛护理、腹胀、便秘症状护理及皮肤护理等护理技术；运用芳香和音乐疗法缓解患者焦虑、抑郁症状；运用SPIKES告知模式告知坏消息；把握好时机与方法告知患者真实病情，给予主要照顾者情感支持及丧亲者哀伤辅导等干预措施缓解家属的复杂性哀伤。结果 患者接受了安宁疗护服务，于最后一次入院11d出院后第3天在家里舒适、平静病逝。结论 通过安宁疗护的实施，提高了患者生存质量，患者家属哀伤情绪较前减轻，取得了较满意的效果。

简介：目的观察HIF-1α和VEGF在骨肉瘤组织中的表达，并分析两者相关性，同时探讨其在骨肉瘤血管形成中所起的作用。方法应用免疫组织化学SP法，检测35例骨肉瘤、14例骨软骨瘤中HIF-1α和VEGF的表达情况，同时用CD34标记血管内皮细胞，计算微血管密度（MVD）。结果35例骨肉瘤组织中，HIF-1α蛋白的阳性表达率为34．3％（12／35），与对照组相比差别有非常统计学意义（P〈O．01）；VEGF的阳性表达率为82．9％（29／35），亦显著高于对照组（P〈0．01）；HIF-1α和VEGF的表达同时呈阳性，13例（37．1％）同时呈阴性，两者表达显著相关（r=0．589，P=0．000），且与癌组织分期显著相关（P〈0．05）；HIF-1α和VEGF均阳性的骨肉瘤组织中MVD值高于两者均为阴性者，两者相比较差异有非常统计学意义（P〈0．01）。结论HIF-1α和VEGF在骨肉瘤组织中均为高表达，提示它们可能对骨肉瘤新生血管生成中具有协同作用，在骨肉瘤的发生、发展起到重要作用。

简介：摘要目的探讨肺癌食管癌缺失基因1（deleted in lung and esophageal cancer 1，DLEC1）对骨肉瘤细胞增殖和转移的影响及其机制。方法16对骨肉瘤患者的癌组织和配对癌旁组织，比较其DLEC1免疫组织化学染色得分。以人骨肉瘤143B细胞系为研究对象，随机分为重组腺病毒DLEC1过表达载体（pDC316-DLEC1）转染组和对照载体（pDC316-Null）转染组。体外实验筛选稳定转染的细胞克隆，比较两组EdU阳性染色比例、细胞周期分布比例、凋亡细胞比例、Transwell迁移和侵袭细胞数量、钙黏蛋白E和波形蛋白表达量及NF-κB、AKT和ERK信号通路蛋白相对表达量的差异。体内实验构建骨肉瘤裸鼠皮下成瘤模型和尾静脉注射肺转移模型，比较两组皮下种植瘤肿瘤体积、肿瘤重量及肺转移结节数量的差异。结果骨肉瘤癌组织和癌旁组织中DLEC1的免疫组织化学染色得分分别为（2.88±1.15）分和（4.25±1.06）分。pDC316-DLEC1组较pDC316-Null组，EdU阳性染色比例（36.47%±1.90%和51.47%±2.89%）和S期细胞比例（33.31%±0.61%和43.77%±1.47%）减少，而G0/G1期细胞比例（46.87%±0.73%和35.47%±1.14%）和凋亡细胞比例（13.83%±1.01%和3.30%±0.26%）增加。pDC316-DLEC1组的Transwell迁移细胞、侵袭细胞及波形蛋白的mRNA和蛋白相对表达量分别为（199.00±12.53）个、（104.67±9.07）个、0.59±0.02和0.54±0.08，均少于pDC316-Null组的（369.67±10.02）个、（299.67±12.06）个、1.00±0.02和1.00±0.00，而钙黏蛋白E的mRNA和蛋白相对表达量（2.40±0.05和1.98±0.10）均多于pDC316-Null组（1.00±0.02和1.00±0.00）。pDC316-DLEC1组中NF-κB（p65）、p-AKT（Ser473）和p-ERK（Thr202/Tyr204）的蛋白相对表达量分别较pDC316-Null组减少51.67%±4.04%、64.67%±5.51%和48.67%±4.73%。pDC316-DLEC1组较pDC316-Null组，皮下种植瘤肿瘤体积[（320.00±145.22）mm3和（798.00±221.94）mm3]、肿瘤重量[（0.49±0.17）g和（0.88±0.14）g]和肺转移结节数量[（7.71±1.80）个和（20.86±3.53）个]均减少。结论DLEC1可抑制人骨肉瘤143B细胞系的NF-κB、AKT和ERK信号通路，并进一步通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡抑制其增殖能力，同时通过逆转上皮间充质转化进程抑制其转移能力。

简介：摘要目的检测分析骨外骨肉瘤(ESOS)标本中PD-1、PD-L1的表达，并结合临床特征与骨肉瘤(OS)对比，探讨其与预后的关系。方法选取2006—2017年间本院骨科就诊的8例ESOS患者及同时期的20例经典OS患者，随访时间为48～108个月，中位时长78个月。利用免疫组化SP法测定所有肿瘤样本中PD-1、PD-L1的表达量，并分析其与患者预后的相关性。结果8例ESOS患者男5例，女3例，平均年龄57.6岁。至随访结束共4例患者出现远处转移，5年生存率为38%。20例OS患者男11例，女9例，平均年龄19.1岁。14例患者术后接受MAP方案化疗，截至随访结束共6例患者出现远处转移，5年生存率为75%。两组5年生存率不同(P<0.05)。ESOS患者的PD-L1阳性表达率略高于经典OS患者(63%∶40%, P>0.05)。PD-L1阳性表达可能与ESOS的疾病进展(转移)相关(P<0.05)，但与性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。而在OS患者PD-L1阳性表达与肿瘤分期相关，Ⅲ期OS患者PD-L1阳性率更高(P<0.05)。PD-L1阳性患者预后较PD-L1阴性患者差(P<0.05)。结论与经典OS相比ESOS患者5年生存率较OS差。PD-L1在ESOS中表达上调，且在转移、切缘阳性患者中阳性率进一步增加。PD-L1表达可能与ESOS的预后呈负相关。

简介：摘要目的探讨基质硬度对骨肉瘤细胞侵袭的影响及分子机制。方法按照不同配比合成硬度差异聚丙烯酰胺水凝胶，并通过万能力学测试仪检测确认其基质硬度。通过光镜观察不同基质硬度培养条件下细胞形态差异。通过免疫荧光检测不同硬度条件下细胞骨架排列和心肌蛋白相关转录因子-A(MRTF-A)表达及亚细胞分布。通过Transwell侵袭实验观察基质硬度及MRTF-A抑制剂CCG203971对MG-63细胞侵袭的影响。应用实时荧光定量聚合酶联反应(RT-qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)的方法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达。计量资料的两两比较采用t检验。结果成功构建不同硬度聚丙烯酰胺水凝胶。高硬度组细胞更倾向于铺展和梭形，肌动蛋白的聚合更明显。高硬度组MG-63细胞侵袭能力明显高于低硬度组[(247.6±25.40)个比(130.3±23.3)个，t＝-11.820，P<0.01]，并促进MRTF-A核转位。而MRTF-A抑制剂CCG-203971干预后硬基质组穿膜细胞数低于无干预硬基质组[(140.5±21.7)比(247.6±25.4)个，t＝11.100，P<0.01]。硬基质组MG-63细胞较软基质组MMP-2和MMP-9 RNA及蛋白水平表达均显著增加(MMP-2 RNA水平：0.89±0.02、0.33±0.01，t＝22.450，P<0.01；MMP-9 RNA水平：0.92±0.03、0.41±0.02，t＝19.171，P<0.01；MMP-2蛋白水平：0.63±0.04、0.31±0.03，t＝7.942，P<0.05；MMP-9蛋白水平：0.69±0.06、0.41±0.02，t＝6.822，P<0.05)，而MRTF-A抑制剂CCG-203971可以显著阻断基质硬度诱导的MMP-2和MMP-9 RNA及蛋白水平表达增加(MMP-2 RNA水平：0.73±0.03、0.29±0.02，t＝6.954，P<0.01；MMP-9 RNA水平：0.91±0.04、0.38±0.03，t＝29.362，P<0.01；MMP-2蛋白水平：0.66±0.03、0.29±0.02，t＝8.342，P<0.05；MMP-9蛋白水平：0.72±0.02、0.38±0.01，t＝7.362，P<0.05)。结论细胞外基质硬度增加通过影响MRTF-A转录调控影响骨肉瘤MG-63细胞侵袭能力。

简介：摘要目的探讨中枢神经系统骨外间叶性软骨肉瘤的临床病理学特征、免疫表型、分子遗传学特征。方法对2014—2019年首都医科大学宣武医院收集的4例中枢神经系统骨外间叶性软骨肉瘤，分别进行临床资料分析、HE染色观察、免疫组织化学染色及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测。结果患者年龄在20~35岁之间，3例病灶位于颅内，1例位于椎管内。镜下改变呈双相结构，即未分化的小细胞与透明软骨岛混合存在，另可见血管外皮瘤样结构及钙化、骨化。免疫组织化学结果显示，肿瘤细胞均表达波形蛋白、SOX9，小细胞区域表达CD99、神经元特异性烯醇化酶、NKX3.1，软骨区域表达S-100蛋白；广谱细胞角蛋白、上皮细胞膜抗原和结蛋白等均阴性，Ki-67阳性指数10%~20%。在分子特征方面，有3例扩增出HEY1-NCOA2融合基因产物，均为HEY1基因的第4号外显子和NCOA2基因的第13号外显子融合。2例术后获得随访信息，分别随访8个月及20个月，均未见肿瘤复发或转移证据。结论骨外间叶性软骨肉瘤是中枢神经系统少见的间叶源性肿瘤，具有特殊的形态学和分子遗传学改变。除了SOX9免疫组织化学阳性表达，新近发现NKX3.1也可作为相对特异的标志物，同时RT-PCR能更准确检测出分子学改变。综合考虑病理形态、免疫组织化学及分子遗传学特征对于诊断该类罕见肿瘤具有重要意义。

简介：摘要骨肉瘤是最常见的儿童和青少年原发恶性骨肿瘤，具有恶性程度高、进展迅速、转移潜能高的特点。近几十年来，骨肉瘤的治疗并没有取得明显的进展，其主要原因是对骨肉瘤的发病机制缺乏系统和深入的认识。越来越多的证据表明，不同种类RNA在骨肉瘤的发生发展中起着关键的调控作用。竞争内源性RNA（competing endogenous RNA，ceRNA）是近年来兴起的学说，是指信使RNA（messenger RNA，mRNA）、长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）、假基因等不同转录物之间通过竞争结合微小RNA（microRNA，miRNA）发挥相互调控作用。这些转录物之间的相互调控在骨肉瘤发生发展中起着重要作用，包括介导骨肿瘤细胞增殖、凋亡、转移、化疗耐药等生物学过程。此外，这些不同种类的转录物还可能为骨肉瘤提供新的生物标志物和潜在的有效治疗靶点。通过回顾ceRNA假说的发展历程，并对ceRNA的现有知识体系进行归纳，阐述了不同类型ceRNA在骨肉瘤发生发展机制中的相互作用及其涉及的生物学功能，以期为骨肉瘤的基础及临床研究奠定基础，促进骨肉瘤的早期诊断和治疗预后。

简介：摘要目的设计并应用仿生型股骨远端假体，通过人造韧带及高稳定型衬垫重建人工关节的稳定性，替代铰链式关节，从而降低相应部位的应力，降低假体磨损、松动及折断的发生率。方法回顾性收集2019年1月至2019年12月初治并行假体置换的股骨远端骨肉瘤的患儿资料，共纳入仿生型假体12例（仿生组）及单纯铰链假体21例（单纯铰链组）。仿生组男6例，女6例，年龄（8.8±2.6）岁，1例合并病理性骨折，Enneking分期ⅡA期1例，ⅡB期10例，Ⅲ期1例；单纯铰链组男14例，女7例，年龄（8.6±2.2）岁，3例合并病理性骨折，Enneking分期ⅡB期15例，Ⅲ期6例。通过对比仿生组和单纯铰链组的基线资料、手术相关资料、肿瘤学及假体预后情况，探讨仿生型股骨远端膝关节假体的围术期安全性、肿瘤学预后、术后并发症率及术后功能状态。结果仿生组和单纯铰链组在性别比例、年龄、身高、体重、发病时长等基线资料无显著性差异。仿生组在总手术时间（126.7±27.9）min vs （143.3±38.9）min（P=0.203）、术中出血量（162.5±212.3）ml vs （247.6±175.6）ml（P=0.224）及术后引流管保留时间（6.3±2.4）d vs （6.4±3.4）d（P=0.908）方面与单纯铰链组相似。仿生组平均随访（16.0±4.7）个月，1例因肿瘤进展死亡。3例出现远处转移，1例出现肿瘤复发合并假体半脱位，最终行截肢治疗。假体半脱位的原因可能是由于肿瘤巨大、股四头肌切除过多所致。余患儿未见假体并发症；单纯铰链组平均随访时间（12.7±4.5）个月，所有患儿均存活，其中3例出现远处转移，2例局部复发，均行局部切除；未见假体并发症。末次随访仿生组的膝关节活动度明显大于单纯铰链组（120.6°±13.6° vs 92.0°±7.7°, P<0.05），但MSTS 93评分的差异无统计学意义（29.1±0.9）分vs（29.5±0.6）分。结论短期随访结果提示，仿生型股骨远端膝关节假体与单纯铰链假体相比具有良好的围术期安全性，不增加假体并发症发生率，并可获得更好的膝关节活动度及优良的功能状态。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-628-3p调控的DNA解螺旋酶对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法首先收集2013年1月至2017年12月郑州大学第二附属医院骨科收治的股骨骨肉瘤患者60例，同期收集股骨创伤性骨折患者60例作为对照组，采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测和比较外周血循环miR-628-3p的表达水平差异，并根据随访结果进行生存分析。以人骨肉瘤细胞U2OS和HOS为研究对象，过表达miR-628-3p，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验检测其增殖活性，采用流式细胞术检测其凋亡率。根据Starbase预测miR-628-3p可与Bloom综合征解螺旋酶(BLM)结合，故进一步采用蛋白质印迹法(Western blot)、qPCR和荧光素酶报告基因实验进行检测。两组间计量资料比较采用独立样本t检验，计数资料比较采用χ2检验。结果骨肉瘤患者外周血和肿瘤组织中miR-628-3p的表达水平(相对表达量分别为0.203±0.047、0.217±0.054)均明显低于正常对照组(相对表达量分别为0.951±0.106、1.013±0.072，P<0.01)，差异有统计学意义，受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-628-3p在骨肉瘤患者中的表达，曲线下面积(AUC)＝0.707(P<0.01)，K-M生存分析显示miR-628-3p低表达患者生存时间明显短于高表达患者。CCK-8和集落形成实验检测显示miR-628-3p过表达后可抑制骨肉瘤细胞U2OS和NOS的增殖；流式细胞术检测显示miR-628-3p过表达后可促进骨肉瘤细胞的凋亡；qPCR和Western blot检测显示miR-628-3p过表达后，BLM的表达水平明显低于miR-628-3p nc组(P<0.01)，差异有统计学意义。荧光素酶报告基因实验显示miR-628-3p mimc与BLM-mt共转染骨肉瘤细胞U2OS和NOS后，其荧光值明显低于其他转染组(U2OS：0.208±0.017比1.082±0.046，t＝4.698，P<0.01；HOS：0.224±0.047比0.966±0.053，t＝5.548，P<0.01)，差异有统计学意义。裸鼠成瘤证实miR-628-3p过表达后肿瘤大小和重量明显低于miR-628-3p nc组[(1.419±0.274) g比(2.825±0.148) g，t＝3.717，P<0.01]，差异有统计学意义。结论miR-628-3p在骨肉瘤患者中存在低表达现象，与患者的不良预后和生存时间相关，miR-628-3p过表达可下调DNA解螺旋酶BLM，抑制骨肉瘤细胞的增殖。

简介：摘要目的应用无血清培养基分离U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，并鉴定相关肿瘤标志物表达。方法体外培养人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，免疫荧光检测U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中CD105表达。采用免疫印迹法检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞Nanog和Oct4蛋白表达。采用半定量PCR检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4mRNA的表达。结果荧光显微镜下可见，U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中部分细胞CD105呈阳性表达。免疫印迹检测结果显示人骨肉瘤U2OS细胞株的Nanog和Oct4蛋白相对表达量为0.853±0.404和0.603±0.153，均明显低于U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞0.973±0.305和0.827±0.322（均p<0.05）。半定量PCR检测结果显示U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4mRNA的相对表达量为0.190±0.027、0.178±0.025、0.170±0.021，均明显高于人骨肉瘤U2OS细胞株0.032±0.009、0.086±0.016、0.019±0.006（均p<0.05）。结论人骨肉瘤U2OS细胞株中存在肿瘤干细胞，无血清培养可用于分离培养人骨肉瘤肿瘤干细胞。

简介：摘要目的观察SW1353细胞中唾液酸酶3(NEU3)表达及定位情况，探究过表达NEU3对人软骨肉瘤SW1353细胞增殖及迁移能力的影响。方法用Lipo3000转染试剂构建NEU3过表达细胞株，实验分组为4组：空白对照组un，不予任何处理；条件对照组blank，加入等剂量转染试剂；阴性对照组pcon，加入空载质粒；处理组pNEU3，加入NEU3基因过表达质粒。并用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)验证细胞株NEU3 mRNA表达水平，蛋白质印迹法(Western blot)验证细胞株NEU3蛋白表达水平。采用划痕实验检测NEU3过表达对人软骨肉瘤SW1353细胞迁移的影响。利用EdU增殖实验、细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验检测NEU3过表达对软骨肉瘤细胞SW1353增殖的影响。用独立样本t检验比较转染前后NEU3 mRNA水平及细胞增殖、迁移能力差异。结果转染NEU3基因过表达质粒后，Real-time PCR结果显示，NEU3基因mRNA显著上调(t＝5.622，P<0.05)，差异有统计学意义。EDU增殖实验结果显示，NEU3过表达后软骨肉瘤细胞SW1353增殖速度显著增加[对照组阳性率细胞分别为(6.56±2.29)%、(11.81±6.49)%、(8.64±3.90)%；处理组为(40.57±14.32)%，t＝11.355，P<0.05]，差异有统计学意义。划痕实验结果显示，NEU3过表达后软骨肉瘤细胞SW1353迁移速度明显提升[对照组剩余划痕面积分别为(18 343±367)、(20 803±124)、(26 472±483) dpi；处理组剩余划痕面积分别为(3 320±193) dpi，t＝7.265，P<0.05]，差异有统计学意义。结论过表达NEU3基因可提高人软骨肉瘤SW1353细胞增殖能力及迁移能力。

简介：【摘要】目的 研究骨肉瘤患者在截肢手术后接受针对性疼痛护理干预的临床价值。方法 选择在我院接受截肢手术的骨肉瘤患者80例，通过随机分组法将其分成对照组（40例）和观察组（40例）。对照组实施常规肿瘤手术术后护理；观察组在常规术后护理基础上，增加实施针对性疼痛护理干预。结果 观察组患者术后并发症仅有2例，少于对照组的9例；对术后护理服务的满意度达到92.5%，高于对照组的75.0%；护理前后疼痛程度评分的改善幅度大于对照组；术后疼痛消失时间和术后住院总时间短于对照组。组间有统计学意义（P＜0.05）。结论 骨肉瘤患者在截肢手术后接受针对性疼痛护理干预，可以减少术后并发症，迅速减轻疼痛，缩短术后疼痛持续时间和住院时间，使患者对护理服务满意度提高。