简介：[摘要]背景：以往研究已经证实，脱钙骨基质（Demineralized bone matrices, DBM）是骨修复重建一种很好的选择。然而，DBMs有限的骨诱导能力不足以更好地修复骨缺损。成骨细胞（Osteoblasts, OBs）是骨组织的主要细胞成分，在新骨的形成中起着重要作用。 OB的细胞外基质（extracellular matrix, ECM）是骨形成的主要成分之一。目的：本研究的目的是将DBM与OB的ECM相结合，以构建可用于骨重建的新型支架材料。方法：本研究将OBs在DBMs的表面上培养10天后制备OBs-ECM-DBMs（OEDBMs）。评估了一系列材料特征，例如OB和ECM的残留，OEDBMs的细胞毒性和骨诱导能力。结果：在OEDBMs中观察到较低的细胞残留和较低的DNA含量。与DBM相比，OEDBM具有更多的骨组织有机基质蛋白，如骨钙蛋白，骨桥蛋白和胶原蛋白I。当在两种材料上培养时，大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSC）都具有良好的生存能力。与DBMs组相比，OEDBMs组中rBMSCs的成骨基因明显上调。结论：上述结果表明OEDBMs用于骨组织工程中，具有很好的使用前景。

简介：

简介：摘要目的探讨血红素加氧酶1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对缺氧/复氧(H/R)诱导的脂肪变肝细胞损伤的作用及其机制。方法将脂肪变大鼠肝细胞(IAR20)按照实验要求分为对照组(Ctrl)、H/R组、H/R+铁死亡抑制剂组(Fer-1)、铁死亡诱导剂组(Erastin)、H/R+BMMSCs(B)组、H/R+HO-1/BMMSCs(HB)组、H/R+HB+小干扰RNA阴性对照组(si-NC)、H/R+HB+敲降GPX4组(si-GPX4)。通过检测不同组别细胞的脂质活性氧(Lipid ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的表达评价铁死亡的严重程度。两组和多组间的数据比较分别采用独立样本t检验和单因素方差分析。结果Fer-1及H/R+B处理组Lipid ROS与MDA的表达量均低于H/R组[(1.65±0.02)、(1.85±0.04)比 (3.50±0.03)，t＝87.600、60.030，P<0.05；(154.50±0.84)%、(228.90±21.49)%比 (676.50±22.36)%，t＝36.380、25.000，P<0.05]；Fer-1及H/R+B处理组GSH水平均高于H/R组[(0.75±0.03)、(0.72±0.04)比 (0.45±0.01)，t＝19.400、17.060，P<0.05]；H/R+HB组的Lipid ROS及MDA水平低于H/R+B组[(1.31±0.03)比 (1.85±0.04)，t＝19.400，P<0.05；(150.10±32.82)%比 (228.90±21.49)%，t＝3.478，P<0.05]，其GSH水平高于H/R+B组[(0.81±0.03)比 (0.72±0.04)，t＝4.981，P<0.05]。si-GPX4组的Lipid ROS与MDA表达量均高于si-NC组[(2.87±0.13)比 (1.36±0.06)，t＝18.100，P<0.05；(323.30±12.58)%比 (184.30±7.09)%，t＝16.670，P<0.05]；si-GPX4组的GPX4与GSH表达量均低于si-NC组[(0.45±0.03)比 (0.92±0.04)，t＝7.692，P<0.05；(0.54±0.07)比 (0.75±0.15)，t＝5.076，P<0.05]。结论HO-1/BMMSCs通过促进GPX4的表达抑制铁死亡以修复受损的脂肪变肝细胞。

简介：摘要：人骨髓间充质干细胞主要是在人体内发挥分化和免疫调节作用。因为血脑血脑屏障的存在，阻碍了药物对颅内肿瘤的治疗，而人骨髓间充质干细胞作用于肿瘤细胞中产生相互作用，结合这一作用机理采用人骨髓间充质干细胞对肿瘤患者进行治疗，使其在肿瘤治疗中发挥有效作用，能够为肿瘤疾病的治疗探索新的路径。本文综述了人骨髓间充质干细胞在肿瘤治疗中的应用方法，希望通过本文总结能够为人骨髓间充质干细胞治疗肿瘤疾病提供更丰富的理论指导和经验借鉴。

简介：摘要目的探讨沉默非肌肉肌球蛋白Ⅱ（NMⅡ）基因的骨髓间充质干细胞（BMMSC）对内毒素/脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠肺细胞外基质（ECM）和肺纤维化的影响。方法采用实验研究方法。取4只1周龄雄性SD大鼠股骨和胫骨骨髓腔细胞并经流式细胞术鉴定为BMMSC。取第3代BMMSC用于后续实验。取细胞，分为用含NMⅡ基因的小干扰RNA序列的pHBLV-U6-ZsGreen-Puro质粒转染的沉默NMⅡ组，转染空载质粒的空载组及未进行任何处理的空白对照组，采用蛋白质印迹法检测干预后72 h的NMⅡ的蛋白表达（样本数为3）。取细胞，于倒置相差显微镜下观察形态；另取细胞，用氯甲基苯甲酰胺（CM-DiⅠ）标记，于倒置荧光显微镜下观察体外细胞标记情况。取20只4周龄雄性SD大鼠，按随机数字表法分为空白对照组、单纯ALI组、ALI+BMMSC组及ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组，每组5只大鼠。对空白对照组不进行任何处理，其余3组大鼠均给予LPS诱导ALI。造模后即刻，单纯ALI组大鼠经尾静脉注射1 mL生理盐水，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠分别经尾静脉注入1 mL 1×107个/mL CM-DiⅠ标记的BMMSC、NMⅡ基因沉默的BMMSC，空白对照组大鼠于相同时间点通过尾静脉注射1 mL生理盐水。干预后24 h，取肺组织于倒置荧光显微镜下观察BMMSC肺内归巢情况。干预后24 h、1周、2周，取肺组织行苏木精-伊红染色观察肺部炎症情况，行Masson染色观察肺纤维化程度并采用改良Ashcroft评分法对干预后2周肺纤维化程度进行评分（样本数为5）。采用免疫组织化学法检测干预后2周α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9的含量（样本数均为3），采用酶联免疫吸附测定法检测干预后24 h超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛、髓过氧化物酶（MPO）活性（样本数均为3），采用免疫荧光染色法检测干预后1周CD11b和含表皮生长因子样模块黏蛋白样激素受体1（EMR1）蛋白表达（样本数均为3）。对数据行单因素方差分析、Bonferroni法及Kruskal-Wallis H检验。结果干预后72 h，沉默NMⅡ组细胞NMⅡ蛋白表达水平显著低于空白对照组和空载组（P值均<0.01）。BMMSC呈长梭形，簇状生长形如旋涡；CM-DiⅠ体外成功标记BMMSC。干预后24 h，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺内细胞归巢现象较ALI+BMMSC组更明显，而空白对照组和单纯ALI组大鼠肺内未见CM-DiⅠ标记的细胞。空白对照组大鼠干预后各时间点肺组织中均未见明显炎症细胞浸润，ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠干预后24 h肺组织炎症细胞浸润较单纯ALI组明显减少，且2组大鼠干预后1、2周肺泡壁变薄，局部肺组织有少量淤血。干预后1、2周，单纯ALI组、ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织胶原纤维沉积均较空白对照组明显加重，但ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织胶原纤维沉积均较单纯ALI组显著改善。干预后2周，单纯ALI组、ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺纤维化改良Ashcroft评分分别为（2.36±0.22）、（1.62±0.16）、（1.06±0.26）分，均明显高于空白对照组的（0.30±0.21）分（P<0.01），ALI+BMMSC组和ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺纤维化改良Ashcroft评分均明显低于单纯ALI组（P<0.01），ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺纤维化改良Ashcroft评分明显低于ALI+BMMSC组（P<0.01）。干预后2周，与单纯ALI组比较，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织α-SMA含量均显著下降（P<0.05或P<0.01）。4组大鼠肺组织MMP-2含量均相近（P>0.05）。与空白对照组比较，单纯ALI组大鼠肺组织MMP-9含量显著升高（P<0.01）；与单纯ALI组比较，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织MMP-9含量均显著降低（P<0.01）。干预后24 h，与空白对照组比较，单纯ALI组、ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织丙二醛、SOD、MPO活性均显著升高（P<0.01）；与单纯ALI组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织丙二醛活性显著升高（P<0.05），ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织SOD活性均显著升高（P<0.01）；与ALI+BMMSC组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织SOD活性显著降低（P<0.01）。与单纯ALI组比较，ALI+BMMSC组、ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织MPO活性均显著降低（P<0.01）；与ALI+BMMSC组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织MPO活性显著降低（P<0.01）。干预后1周，与其他3组比较，ALI+沉默NMⅡ的BMMSC组大鼠肺组织CD11b蛋白表达显著增加（P<0.05或P<0.01）；4组大鼠肺组织EMR1蛋白表达均相近（P>0.05）。结论移植沉默NMⅡ基因的BMMSC能更明显改善LPS所致ALI大鼠肺组织ECM成分的活性，重塑其完整性，增强其抗氧化能力，减轻肺损伤和肺纤维化。

简介：摘要目的人脂肪干细胞(hASCs)与软骨脱细胞基质(CAM)3D打印构建适合细胞生长的三维细胞生物支架。方法从郑州大学第二附属医院10例抽脂患者的脂肪组织中提取脂肪干细胞进行体外培养，取第3代hASCs进行软骨诱导，用阿利新蓝染色检测hASCs的软骨分化。通过脱细胞方法对猪耳软骨进行脱细胞，后对脱细胞效果进行检测。利用制备的CAM和海藻酸钠(SA)按(CAM∶SA 7∶3、6∶4、5∶5、4∶6)进行混合，用3D打印机打印成个性化三维生物支架，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)进行支架细胞毒性检测，对不同比例支架的生物学特性如孔隙率、力学性能、降解率进行比较，找出最优的支架混合比例。用上述最优比例接种hASCs(1×106个)行3D打印，三维细胞生物支架体外培养1周后在倒置显微镜下观察细胞存活情况。组间采用t检验。结果hASCs传代后在显微镜下观察呈梭形、多角形，胞质丰富，胞核清楚。hASCs经软骨诱导剂诱导后，hASCs可向软骨分化。猪耳软骨经脱细胞后效果良好，内部无细胞残留，DNA残留量和未脱细胞软骨比较，差异有统计学意义(t＝65.420，P<0.05)。支架浸提液和完全培养液分别培养hASCs比较，培养后第2、4、6天时间点，细胞增殖数量比较，差异无统计学意义(t＝1.750、2.365、2.106、P>0.05)。3D打印不同比例的支架，CAM含量越多，降解速率越快，力学强度和孔隙率越小。其中5∶5和4∶6混合比例形成的支架生物学性能更优。hASCs(1×106个)混合这两种比例支架经3D打印形成个性化三维支架，活死细胞染色显示，第3天和第7天时间点，5∶5支架混合的hASCs活细胞更多。细胞增殖比较，第3天和第7天时间点，5∶5支架混合的hASCs增殖数量多余4∶6比例组，差异有统计学意义(t＝4.350、4.922，P<0.05)。结论比例为5∶5的CAM-SA经3D构建的三维生物支架最适合细胞生长。

简介：摘要目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）移植对肾损伤大鼠体内细胞焦亡的影响及其机制。方法体外分离培养4~5周龄清洁级雌性SD大鼠的BMSC，取第3代细胞用于后续实验。采用成组设计，随机将15只6周龄清洁级雌性SD大鼠分为对照组、肾损伤模型组和BMSC组，每组5只。采用经尾静脉注射脂多糖（LPS）1 mg/kg构建肾损伤模型；对照组以相同途径给予等量生理盐水。BMSC组于制模后2 h经尾静脉注射BMSC 0.5 mL（含BMSC 2×106个）；肾损伤模型组和对照组给予等量生理盐水。于术后3 d取各组大鼠腹主动脉血，采用苦味酸法检测血肌酐（SCr）水平，采用二乙酰一肟法检测血尿素氮（BUN）水平，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血胱抑素C（Cys C）和白细胞介素（IL-1β、IL-18）水平。处死大鼠取肾组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测大鼠肾组织NOD样受体蛋白3（NLRP3）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测大鼠肾组织NLRP3、caspase-1的蛋白表达。结果体外培养显示，骨髓细胞悬液培养24 h后出现大量圆形贴壁细胞和悬浮细胞，培养4~5 d后有大量长梭形细胞聚集性贴壁生长，仍可见明显的杂质细胞，经胰酶消化并传代至第3代以长梭形贴壁细胞为主，基本纯化为BMSC。体内实验显示，与对照组比较，肾损伤模型组大鼠SCr、BUN、Cys C、IL-1β、IL-18水平均明显升高〔SCr（μmol/L）：85.22±2.29比21.80±0.59，BUN（mmol/L）：11.50±0.64比5.86±0.83，Cys C（mg/L）：0.13±0.01比0.11±0.02，IL-1β（ng/L）：31.49±1.42比4.74±0.49，IL-18（ng/L）：29.01±1.95比1.52±0.03，均P<0.05〕，NLRP3及caspase-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高〔NLRP3 mRNA（2-ΔΔCt）：3.635±0.296比1.000±0.002，caspase-1 mRNA（2-ΔΔCt）：4.020±0.228比1.001±0.003；NLRP3蛋白（NLRP3/β-actin）：1.560±0.868比0.902±0.036，caspase-1蛋白（caspase-1/β-actin）：1.392±0.097比0.895±0.046，均P<0.05〕。与肾损伤模型组比较，BMSC组大鼠SCr、BUN、IL-1β、IL-18水平均明显下降〔SCr（μmol/L）：51.64±3.84比85.22±2.29，BUN（mmol/L）：9.90±0.46比11.50±0.64，IL-1β（ng/L）：24.20±1.45比31.49±1.42，IL-18（ng/L）：12.97±1.25比29.01±1.95，均P<0.05〕，NLRP3及caspase-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显下降〔NLRP3 mRNA（2-ΔΔCt）：1.488±0.136比3.635±0.296，caspase-1 mRNA（2-ΔΔCt）：1.643±0.143比4.020±0.228；NLRP3蛋白（NLRP3/β-actin）：1.227±0.053比1.560±0.868，caspase-1蛋白（caspase-1/β-actin）：1.159±0.107比1.392±0.097，均P<0.05〕。结论在体内，BMSC可以减轻LPS所致肾损伤大鼠的细胞焦亡。

简介：摘要目的观察WNT2B对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向脂肪细胞分化的影响。方法采用慢病毒载体在hMSCs中过表达WNT2B基因(实验组)，以空慢病毒载体作为对照(对照组)，并将hMSCs进行脂肪细胞诱导分化7 d，以实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测脂肪细胞标志基因过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、脂蛋白脂酶(LPL)和降脂素(Adipsin)的表达，在光镜下计数油红O染色阳性细胞的数目，并对油红O染色强度进行定量检测。计量数据组间比较采用t检验或者Mann-Whitney检验。结果在hMSCs成脂肪细胞诱导分化过程中，WNT2B的蛋白表达水平在分化早期即发生改变，实验组hMSCs的PPARγ2(3.85±0.01比0.70±0.10，t＝54.289，P<0.01)、LPL(17.78±1.78比1.29±1.30，t＝12.958，P<0.01)、Adipsin基因表达强度(0.88±0.11比0.38±0.05，t＝7.167，P<0.01)显著低于对照组，实验组hMSCs单位面积形成脂肪细胞的数量显著低于对照组[(30.50±2.07)个比(10.33±1.63)个，t＝50.230，P<0.01]，油红染色定量分析显示实验组吸光度值显著低于对照组(0.77±0.02比0.49±0.02，t＝10.397，P<0.01)，差异均有统计学意义。结论过表达WNT2B可以抑制体外hMSCs向脂肪细胞的分化。

简介：摘要干细胞移植在缺血性卒中的治疗领域颇具潜力，尤以骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）研究最为广泛。研究表明，BMSCs主要以旁分泌方式发挥其功能，其释放的外泌体表现出类似BMSCs的生物活性。BMSCs外泌体作为无细胞疗法，在缺血性卒中的研究领域已取得诸多进展。文章就BMSCs外泌体治疗缺血性卒中的研究进展进行了综述。

简介：【摘要】：目的：提出骨髓造血干细胞移植患者的心理护理对策，开展护理效果研究。方法：收集骨髓造血干细胞移植患者研究，病例88例，时间2020年11月~2021年11月。44例进入普通组做好常规护理。44例进入心理护理组做好心理护理。观察护理满意率、负面情绪评分、。结果：心理护理组的护理满意率97.73%，同普通组的81.82%比较更高（p＜0.05）。护理4周后，心理护理组SAS评分（7.16±0.33）分，同普通组（11.26±1.25）分比较更低（p＜0.05）；护理4周后，心理护理组SDS评分（8.33±1.36）分，同普通组（12.56±2.14）分比较更低（p＜0.05）。结论：对骨髓造血干细胞移植患者做好心理护理后，可起到让患者护理满意率更高、焦虑情绪显著改善的影响效果。

简介：摘要目的探索成肌细胞外泌体诱导骨髓间充质干细胞成肌分化的可行性。方法大鼠骨骼肌卫星细胞经体外培养成肌分化，提取成肌细胞外泌体与骨髓间充质干细胞共孵育，诱导其向骨骼肌分化，检测成肌分化以及各生长因子分泌变化。结果通过酶消化分离、差速贴壁提取的肌卫星细胞，Pax7表达阳性，增殖、分化后Myogenin、Desmin及Myosin表达阳性，Desmin流式细胞鉴定阳性率为94. 5%。超速离心法提取到圆形或椭圆形的成肌细胞外泌体，外形呈杯状，磷钨酸负染；WB检测CD9、CD63、CD81及TSG101表达阳性。GFP标记的外泌体可被骨髓间充质干细胞摄取。外泌体与骨髓间充质干细胞共同孵育，3 d后Myogenin表达阳性，6 d后Desmin与Myosin表达阳性。ELASA检测细胞上清胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin like growth factor，IGFⅠ）、肝细胞生长因子（heptocyte growth factor，HGF）及成纤维生长因子（fibroblast growth factor2，FGF2）水平明显升高。结论成肌细胞外泌体在体外能诱导骨髓间充质干细胞向成肌分化，刺激各种生长因子分泌可能是外泌体促进细胞增殖、分化的机制之一。

简介：

简介：摘要目的探讨SD鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体(Exos)修复骺板缺损的相关机制。方法通过超离心提取鼠BMSCs来源的Exos，制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)负载的Exos(PLGA-Exos)支架，扫描电镜对支架进行表征。提取鼠软骨细胞，探究PLGA-Exos/RAW264.7细胞/软骨细胞共培养体系中巨噬细胞及软骨细胞相关基因的表达。将24只SD大鼠随机均分为A、B、C 3组，构建胫骨近端骺板缺损模型，将PLGA负载的BMSCs-Exos缓释棒(A组)及无Exos负载的PLGA棒(B组)分别填塞于骺板缺损区，C组为对照组(无填塞)。术后6周获取鼠胫骨标本，通过影像学X线分析、苏木精-伊红(HE)染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及巨噬细胞表型蛋白[M1型：诱导型一氧化氮合酶(iNOS)；M2型：Arg-1]染色，评估骺板缺损的修复效果。两组间比较采用独立样本t检验。结果PLGAs支架为三维多孔结构，孔隙分布均匀，具有较高的连通性。Exos被成功加载至PLGA中。PCR结果发现，在炎症微环境中，与对照组比较，BMSCs-Exos调控巨噬细胞高表达M2表型蛋白Arg-1(7.12±1.01比1.00±0.03，t＝10.47，P<0.01)，且促进软骨细胞COL-2及Sox9基因mRNA表达(8.25±0.74比1.00±0.12，t＝16.84，P<0.01；4.64±0.16比1.00±0.01，t＝38.64，P<0.01)。术后6周胫骨标本影像学及组织学分析显示，A组骺板缺损区可见结构致密、与正常骺板结构及功能相似新生透明软骨组织，B组骺板缺损区新生组织由大量的纤维组织及少量的透明软骨组成，C组骺板缺损区骨桥形成。骺板损伤区巨噬细胞相关的表型蛋白免疫组织化学染色显示，A组M2型巨噬细胞表型蛋白Arg-1染色呈阳性显色反应，M1型巨噬细胞表型蛋白iNOS染色为阴性；B组少量细胞质基质被Arg-1抗体染为弱阳性，iNOS染色为阴性；C组Arg-1抗体染色为阴性，而iNOS染色呈阳性反应。结论在炎症微环境中，BMSCs-Exos调控巨噬细胞向M2型编程，促进骺板缺损修复。

简介：摘要目的研究铁死亡是否参与大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)减轻肝硬化的过程。方法2021年6月至12月，选取10只SD大鼠(军事医学科学院动物实验中心提供)腹腔注射橄榄油12周作为对照组，另30只SD大鼠腹腔注射含40%四氯化碳(CCl4)的橄榄油混合液8周建立大鼠肝硬化模型，采用随机数表法分为模型组、BMMSCs组及小檗碱组(n＝10)，分别注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)、BMMSCs及小檗碱灌胃处理4周，干预结束后检测肝脏功能，苏木精-伊红(HE)及天狼星红染色检测肝脏病理，实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝脏组织Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4a1)、透明质酸酶1(Hyal1)mRNA，RT-qPCR、蛋白质免疫印迹法(Western blot)及免疫组织化学检测长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA及蛋白表达，检测丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及Fe2+含量变化，两组间比较采用t检验。结果采用符合标准的BMMSCs，并成功建立大鼠肝硬化模型。BMMSCs组Ishak评分及分期均低于模型组[评分：(4.00±1.00)比 (11.33±2.08)分、分期：(2.33±0.58)比 (5.67±0.58)，t＝－5.500、－7.071，P<0.05]，肝功能较模型组显著改善[ALT：(44.07±0.60) U/L比 (897.47±14.25) U/L、AST：(65.83±1.39) U/L比 (2 158.73±36.85) U/L、ALB：(39.13±1.29) g/L比 (29.47±1.62) g/L，t＝－103.610、－98.309、8.096，P<0.05]。铁死亡相关结果显示，BMMSCs组较模型组ACSL4、FTH1蛋白表达均升高[ACSL4：(1.17±0.14)比 (0.49±0.12)、FTH1：(0.94±0.07)比 (0.38±0.07)，t＝6.458、9.667，P<0.05]，但GPX4蛋白表达升高[(0.75±0.06)比 (0.41±0.09)，t＝5.253，P<0.05]，mRNA水平与蛋白表达呈现一致；BMMSCs组较模型组MDA及Fe2+的生成均增加[MDA：(0.41±0.03) μmol/mg比 (0.21±0.03) μmol/mg、Fe2+：(5.84±0.26) nmol/mg比 (2.64±0.14) nmol/mg，t＝8.464、18.700，P<0.05]，GSH的生成减少[(102.08±1.30) μg/ml比 (220.11±1.68) μg/ml，t＝－96.163，P<0.05]，差异均有统计学意义，铁死亡指标表达上小檗碱组与BMMSCs组相似。结论铁死亡参与了BMMSCs改善大鼠肝硬化过程，其机制可能与BMMSCs破坏过氧化与抗过氧化平衡相关。

简介：摘要目的探讨复合人表皮干细胞（ESC）的猪脱细胞真皮基质（ADM）对裸鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法采用实验研究方法。采用数码相机拍照观察猪ADM形态，采用苏木精-伊红（HE）染色观测猪ADM中细胞残留，采用扫描电子显微镜观察猪ADM表面结构，采用红外光谱仪分析猪ADM二级结构，采用动态光散射粒度分析仪分析猪ADM粒径，采用纳米粒度电位仪分析猪ADM电位。采用倒置荧光显微镜观察猪ADM在培养基中放置30 min、1 d、5 d的形态（样本数为2）；采用随机数字表法（分组方法下同）将猪ADM分为5 min组、10 min组、20 min组、30 min组、60 min组、120 min组，常温静置相应时间，称量法计算吸水量（样本数为3）；将Swiss小鼠胚胎成纤维细胞（Fb）分为仅有培养基的空白对照组和另加入相应终质量浓度的ADM浸提液的50.0 g/L ADM浸提液组、37.5 g/L ADM浸提液组、25.0 g/L ADM浸提液组、12.5 g/L ADM浸提液组、6.5 g/L ADM浸提液组，分别于培养24、48、72 h，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖率并进行细胞毒性分级（样本数为5）；将1只6周龄雄性SD大鼠红细胞分为生理盐水组、超纯水组及添加相应终质量浓度猪ADM浸提液的5 mg/mL ADM浸提液组、10 mg/mL ADM浸提液组、15 mg/mL ADM浸提液组，于反应3 h，采用酶标仪检测血红蛋白的吸光度值代表猪ADM血液相容性（样本数为3）。从陆军军医大学（第三军医大学）第一附属医院泌尿外科2020年7月收治的1名6岁健康男童包皮环切术后废弃包皮中分离培养ESC并采用流式细胞术鉴定。混合培养法构建复合ESC的猪ADM（以下简称ESC/ADM）颗粒，培养3 d后采用HE染色和激光扫描共聚焦显微镜观察ESC/ADM复合效果。将36只7~8周龄雄性无胸腺裸鼠分成单纯磷酸盐缓冲液（PBS）组、单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组，每组9只，并建立全层皮肤缺损创面模型，伤后即刻，创面均一次性采用相应试剂处理。分别于伤后1、7、11、15 d，观察创面愈合情况并计算创面愈合率（样本数为3）；伤后7 d，行HE染色观察创面上皮化情况并测量未上皮化长度（此处及以下样本数均为4）；伤后11 d，行Masson染色观察创面胶原沉积和真皮化情况并计算创面切面真皮面积，行免疫荧光染色并计算创面表达ESC特异性标志物CD49f的细胞数，行实时荧光定量反转录PCR检测创面移植ESC的3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）的mRNA表达。对数据行独立样本t检验、单因素方差分析、重复测量方差分析、LSD-t检验。结果猪ADM为白色微粒状，内部无细胞存在，由网状结构组成，结构排列无序，表面粗糙；猪ADM分别在1 659、1 549、1 239 cm-1波数处出现吸收峰；猪ADM在溶液中主要粒径分布在500~700 nm；猪ADM表面带负电荷。放置30 min、1 d、5 d，猪ADM均形态相对稳定；放置30~120 min猪ADM吸水量保持相对高水平。6.5 g/L ADM浸提液组、12.5 g/L ADM浸提液组、25.0 g/L ADM浸提液组小鼠胚胎Fb在培养24 h细胞毒性分级为1级，其余各组各时间点细胞毒性分级均为0级。反应3 h，超纯水组红细胞中血红蛋白的吸光度值明显高于生理盐水组和15 mg/mL ADM浸提液组（t值分别为8.14、7.96，P<0.01）。第4代细胞常规培养3 d形态呈鹅卵石样且低表达CD71和高表达CD49f的被鉴定为ESC。猪ADM颗粒上有ESC附着、生长。伤后1 d，单纯PBS组、单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面大小基本一致。伤后7、11、15 d，各组裸鼠创面收缩，其中单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面收缩明显。伤后7 d，单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面愈合率明显高于单纯PBS组（t值分别为2.83、4.72，P<0.05或P<0.01）；伤后11 d，ESC/ADM组裸鼠创面愈合率明显高于单纯PBS组（t=4.86，P<0.01）；伤后15 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面愈合率均明显高于单纯PBS组（t值分别为2.71、2.90、3.23，P<0.05）。伤后7 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面未上皮化长度分别为（816±85）、（635±66）、（163±32）μm，明显短于单纯PBS组的（1 199±43）μm（t值分别为5.69、10.19、27.54，P<0.01）。伤后11 d，单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组裸鼠创面切面真皮面积明显大于单纯PBS组（t值分别为27.14、5.29、15.90，P<0.01）；单纯ADM组和ESC/ADM组裸鼠创面的胶原生成比单纯PBS组明显，单纯ESC组和单纯PBS组相近。伤后11 d，单纯ESC组和ESC/ADM组裸鼠创面中CD49f表达阳性数量分别为（135±7）、（185±15）个，GAPDH的mRNA表达阳性；单纯PBS组、单纯ADM组裸鼠创面均无CD49f、GAPDH的mRNA表达。结论ESC/ADM颗粒能够促进裸鼠全层皮肤缺损创面愈合，这可能与其提高了ESC移植后的存活率和ADM促进了真皮结构重排、血管新生有关。

简介：摘要目的探讨上睑凹陷型切开重睑术中辅助填充脂肪干细胞基质胶(SVF胶)的临床效果。方法2018年1月至2019年10月，河南整形美容医院美容外科收治上睑凹陷型单睑和重睑形态不佳的女性患者58例，年龄24~53 (35±7)岁，分为SVF胶填充组(观察组)和传统自体脂肪填充组(对照组)，每组29例。在切开重睑术前，观察组患者用SVF胶进行注射，对照组患者用传统自体脂肪进行注射。两组患者在填充完脂肪后，均设计传统切口重睑线。结果术后3个月，观察组患者及对照组患者脂肪填充存活量大致相同，脂肪存活均良好，观察组患者填充效果满意率和重睑满意率分别为93.10%和89.66%，高于对照组的82.76%、82.76%(均P<0.05)。对照组术后发生外观臃肿、结节和凹凸不平分别有4、1、3例，而观察组则未见术后并发症。结论上睑凹陷型患者重睑术中，同时辅助填充SVF胶与填充传统结构脂肪相比，具有明显优势，术后患者满意度高，临床应用效果较好。

简介：摘要目的探讨轻度炎症状态下人牙髓干细胞（human dental pulp stem cell，hDPSC）产生的外泌体与基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1，SDF-1）联合应用对牙髓组织再生的影响。方法分离培养hDPSC，脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激hDPSC，超速离心法提取hDPSC经LPS刺激后产生的外泌体（exosomes from lipopolysaccharide-stimulated hDPSC，L-EXO）和正常状态下分泌的外泌体（exosome from normal hDPSC，N-EXO），通过透射电镜和蛋白质印迹法鉴定提取物。将40只6~8 周龄的SD 大鼠通过随机数字表法分为S组（单独应用SDF-1）、L+S组（SDF-1 与L-EXO 联合应用）、N+S组（SDF-1与N-EXO联合应用）和空白对照组（根管内不植入任何物质），每组10只。以双侧下颌第一磨牙为实验牙，建立大鼠无髓根管模型，根据分组分别在根管内植入不同的内容物。植入后30 d过量麻醉处死所有大鼠，取大鼠双侧下颌骨组织，应用HE、Masson及免疫组织化学染色法进行组织学评价。结果HE染色结果显示，除空白对照组外，其他3组根管内均可见新生牙髓样组织，其中L+S组根管内新生组织的量及组织中的细胞数量最多，S组最少。Masson染色结果显示，L+S组矿化组织沿根管壁纵向排列，胶原纤维有序排列，N+S组呈无规律紊乱分布。定量分析各组新生血管面积，结果显示L+S组血管密度［（2.03±0.65）%］显著高于S组［（0.65±0.05）%］及N+S组［（1.06±0.38）%］（F=5.879，P<0.05）。免疫组织化学结果显示，S 组及L+S组的趋化因子受体4表达量显著低于N+S 组（F=8.633，P<0.01）。结论hDPSC分泌的外泌体联合SDF-1可提高根管内新生组织的量和组织中的血管密度，L-EXO的作用较N-EXO强，并且新生组织中胶原纤维及矿化组织的排列更规律有序。

简介：摘要骨髓增生异常综合征（MDS）是一种起源于造血干细胞、以造血功能异常、高风险向髓系白血病转化为特征的异质性髓系肿瘤。异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）对于MDS患者具有巨大的治疗潜力，是唯一能治愈MDS的有效方法。疾病类型、疾病预后分层、不同治疗时机、预处理强度及移植后复发等因素均影响着患者移植后的生存。明确移植适应证，灵活在不同时机纳入移植患者，选择合适的预处理方案，监测移植后复发情况对于改善MDS患者移植预后具有至关重要的作用。文章将围绕这些方面对allo-HSCT在MDS患者中的应用进展进行综述。

简介：摘要目的探讨二十二碳五烯酸(DPA)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)向软骨细胞分化的影响。方法通过Binding DB寻找DPA潜在的作用靶点，利用京都基因及基因组百科全书(KEGG)和Gene ontology(GO)富集DPA靶点调控通路及生物学过程。在hBMSCs诱导成软骨分化中添加DPA，培养15 d进行实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测(n＝3)，比较DPA组与CON组软骨分化关键基因性别决定区Y框蛋白9(SOX9)和聚蛋白聚糖(ACAN) mRNA的表达量。培养21 d后用鬼笔环肽染色和免疫荧光染色检测细胞骨架和ACAN蛋白分布(n＝10)，采用独立样本t检验分析组间差异。结果DPA具有16个潜在作用靶点，这些靶点可能参与过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路和脂质代谢相关生物学过程。分化中的软骨细胞，SOX9和ACAN的mRNA表达DPA组均高于CON组(1.965±0.118比1.002±0.041，q＝9.974，P<0.01)和(1.216±0.018比1.000±0.018，q＝3.057，P<0.05)。细胞骨架重建DPA组低于CON组(9.682±0.762比21.450±1.653，t＝6.466，P<0.01)；而ACAN蛋白积累DPA组高于CON组(12.510±1.215比9.539±0.746，t＝2.087，P<0.05)。结论DPA促进hBMSCs成软骨细胞分化。

简介：摘要目的观察WNT2B对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成骨分化的影响。方法hMSCs分离自临床髂骨植骨手术中剩余的松质骨的骨髓，采用慢病毒载体在hMSCs中过表达WNT2B基因(实验组)，以空慢病毒载体作为对照(对照组)，部分实验将未经处理的hMSCs作为空白对照。检测hMSCs的增殖和干性特征变化，并将hMSCs进行成骨细胞诱导分化后检测其碱性磷酸酶活性、以茜素红染色定量检测其矿化能力。计量数据组间比较采用t检验、方差分析或者Mann-Whitney检验。结果在hMSCs成骨分化早期WNT2B的表达水平即发生明显变化，过表达WNT2B可以提高β-catenin的表达水平，促进hMSCs的增殖、维持其干性。实验组细胞碱性磷酸酶活性和茜素红染色强度均显著低于对照组(0.40±0.01比0.36±0.01，t＝4.899，P<0.01；0.92±0.02比0.53±0.01，t＝34.249，P<0.01)。结论WNT2B可以体外促进hMSCs的增殖、维持其干性、并抑制hMSCs向成骨细胞分化。