简介：目的:建立高转移肝癌细胞株，研究其肿瘤干细胞生物学特征,为靶向人肝癌干细胞治疗提供有价值的细胞模型。方法:肝癌细胞系Bel7402接种裸鼠皮下，成瘤后，取小鼠肺部转移灶，通过机械分离法，获取肺部肝转移细胞，体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠，获得稳定肺转移肝癌细胞株Bel7402-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定Be17402-V13中肿瘤干细胞的存在。流式细胞术分析亲本Bel7402和Bel7402-V13中肿瘤干细胞标志物ESA的表达情况，分选Bel7402和Bel7402-V13中ESA+细胞并进行体外生物学特征研究及裸鼠致瘤实验。结果:建立高转移Bel7402-V13细胞株,Bel7402-V13细胞无血清悬浮培养7d后形成的细胞球体中存在单个PKH26阳性细胞。与Bel7402中ESA+细胞相比，流式分析显示干细胞标志物[3人比例高转移丑<；17402-V13显著提高5.67倍（17.6±0.4￥33.1±1.5)。3(；17402-V13中ESA+细胞具有更强的自我更新能力[成球率:（94.8±7.5)%vs(52.3±6.9)%，P<0.01]，侵袭能力提高1.51倍（397.7±79.4v262.0±40.1，P<0.01)，耐药能力也显著增强（IC5。：0.286v0.196，P<0.01)，ESA+细胞Bel7402-V13在裸鼠皮下接种2xl02个细胞3月即可致瘤（3/6)，而接种2xl02个ESA+细胞Bel7402细胞3月才能致瘤（1/6)。结论:获得高转移肝癌细胞株Be17402-V13，伴随ESA+细胞增加，其体内外功能显著增强，为肝癌干细胞的靶向治疗提供有价值的细胞模型。

简介：

简介：背景:近年研究显示,荜茇酰胺(PL)在诸多恶性肿瘤中可通过升高活性氧(ROS)水平选择性杀伤肿瘤细胞,然而其对胃癌细胞的作用仍有待进一步研究。目的:探讨PL对人胃癌细胞株MKN45增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法:以不同浓度PL以及caspase抑制剂、抗氧化剂单独或联合处理MKN45细胞,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和细胞内ROS水平,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白XIAP、cleaved-caspase3、7、9、cleaved-PARP、p53及其下游靶基因p21、GADD45α、PUMA表达。结果:PL可剂量和时间依赖性地抑制MKN45细胞增殖,经PL处理的MKN45细胞G1期细胞比率、细胞凋亡率和细胞内ROS水平显著升高,抗凋亡蛋白XIAP表达下调,caspase依赖性凋亡途径、p53及其下游靶基因激活。抗氧化剂NAC或广谱caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理可逆转PL的促ROS生成以及增殖抑制和促凋亡作用。结论:PL能抑制MKN45细胞增殖,使细胞发生G1期阻滞,诱导细胞凋亡,其抗肿瘤效应的作用机制可能为升高肿瘤细胞内ROS水平,进而激活p53和caspase依赖性凋亡途径。

简介：目的构建稳定过表达X连锁凋亡抑制蛋白相关因子1（X-linkedinhibitorofapoptosisassociatedfactor1,XAF1）基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。方法分别将携带XAF1基因感染复数（multiplicityofinfection,MOI）为50的慢病毒稀释液。MOI为100的慢病毒原液和MOI为100的慢病毒原液加入终浓度为5μg/mL的聚凝胺（polybrene）转染人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。通过倒置荧光显微镜观察细胞内荧光数量及强度评判转染效率,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,qRT-PCR）和蛋白免疫印记法（westernblot）检测XAF1基因mRNA和蛋白的表达。结果慢病毒稀释液转染,约60%的细胞可观察到微弱荧光;慢病毒原液转染,约70%的细胞观察到较弱荧光;慢病毒原液加入5μg/mLpolybrene的转染效率较高,约90%的细胞观察到较强荧光。嘌呤霉素筛选上述转染效率最高的慢病毒原液加5μg/mLpolybrene组细胞,其成功将携带XAF1基因的慢病毒转入鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。qRT-PCR和westernblot进一步证实细胞株稳定过表达XAF1基因。结论慢病毒加polybrene转染可成功构建稳定过表达XAF1基因的鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞株。

简介：目的研究参菝抗瘤液对人胃癌细胞株BGC-823细胞增殖和凋亡的影响，以及同化疗药物联用对的人胃癌细胞株BGC-823细胞作用。方法运用MTT法观察参菝抗瘤液对人胃癌细胞株体外增殖的影响，流式细胞仪检测参菝抗瘤液对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响，对作用后细胞染色并在电镜下观察其细胞形态学变化。结果本研究实验结果显示，不同浓度参菝抗瘤液均能抑制胃癌BGC-823细胞增殖，抑制率高于正常对照组，差异具有统计学意义（P〈0．05），且具有诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的作用，凋亡率高于正常对照组，差异具有统计学意义（P〈0．05）。抑制增殖和诱导凋亡的作用与浓度正相关，且存在时间依耐性。当100μg／mL剂量的参菝抗瘤液联合12．5μg／mL的紫杉醇时，抑制率和凋亡率均高于单纯化疗组，具有协同抑制胃癌BGC-823细胞增殖，诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的作用。结论参菝抗瘤液对人胃癌细胞株BGC-823具有较强的抑制增殖和诱导凋亡作用，联合化疗药物作用于人胃癌细胞株BGC-823具有协调增强抑制增殖和诱导凋亡作用。

简介：目的：研究血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）基因沉默对D-（-）-MTX/A549耐药细胞株迁移和侵袭的影响及可能的分子机制。方法：采用siRNA技术沉默D-（-）-MTX/A549耐药细胞株VEGF基因,细胞划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR检测VEGF、MMP-2mRNA,Westernblot检测p-ERK1/2蛋白的表达。结果：VEGFsiRNA序列及阴性对照成功转染至D-（-）-MTX/A549后,VEGFmRNA表达水平明显下降,与阴性对照相比下降了2.29倍,差异具有统计学意义（P=0.002）,表明转染成功。阴性对照组与空白组差异无统计学意义（P〉0.05）。转染后,D-（-）-MTX/A549迁移和侵袭能力明显下降（P值均〈0.05）,D-（-）-MTX/A549耐药细胞MMP-2mRNA、p-ERK1/2的蛋白达也较阴性对照水平明显下降（P值均〈0.05）。结论：抑制VEGF基因表达可以抑制D-（-）-MTX/A549细胞的迁移和侵袭能力,这一过程可能涉及到MMP-2和p-ERK1/2信号通路。

简介：研究全反式维甲酸（ATRA）抑制HGC-27人胃癌细胞系生长的作用.利用cck-8法分别在24h、36h、48h检测ATRA对人胃癌细胞株HGC-27的抑制率,并检测瘦素水平.不同浓度组间的生长抑制率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,各ATRA剂量组之间差异也存在显著性差异（P〈0.05）.各个ATRA剂量组的细胞抑制率和ATRA浓度之间呈正相关.抑制作用与剂量和时间呈依赖关系,ATRA的最佳抑制浓度和时间分别是400μmol/L和48h,最大抑制率达92.27%,800μmol/LATRA可下调瘦素水平.利用光学显微镜观察不同浓度ATRA作用于HGC-27细胞的形态结构改变,显微镜观察显示ATRA使HGC-27人胃癌细胞生长受抑制,细胞出现皱缩变小、细胞核固缩等异常现象,细胞凋亡呈典型形态学改变;得出结论：ATRA对人胃癌细胞HGC-27生长有抑制作用,并与ATRA的浓度及作用时间密切相关,其机理可能与瘦素有关.

简介：摘要目的探讨米非司酮与顺铂配伍作用对卵巢癌耐药细胞株CAOV3/DDP增敏、凋亡及性激素受体的影响。方法选取经RPMII640培养液培养的卵巢癌耐药CAOV3/DDP细胞株40株进行研究，分为4组，各10株，包括对照组（不予以任何药物）、低剂量组（低剂量米非司酮+顺铂）、中剂量组（中剂量米非司酮+顺铂）、高剂量组（高剂量米非司酮+顺铂），培养结束均实施MTT法观察，比较组间细胞增殖活力、凋亡率，以及性激素（雌激素受体、孕激素受体）阳性率。结果低剂量组、中剂量组、高剂量组MTT法细胞存活力OD值明显低于对照组（P<0.05），且高剂量组最低（P<0.05）；四组细胞凋亡率与孕激素受体阳性率有明显差异（P<0.05），高剂量组与其余组差异最明显（P<0.05），但四组雌激素受体阳性率比较无明显差异（P>0.05）。结论米非司酮与顺铂配伍会影响卵巢癌耐药CAOV3/DDP细胞株细胞增殖活力，而且与米非司酮浓度有关，浓度越高则抑制作用越明显；同时，米非司酮配伍顺铂会影响细胞凋亡与性激素受体，需加强重视。

简介：据悉，美国诺唯真邮轮（NCL，NorwegianCruiseLine）或将与意大利Fincantieri船厂签订一份6艘豪华邮轮建造合同。此前，该公司已在MeyerWerft船厂订造了3艘Break-awayPlus级邮轮，预计分别将于2017年、2018年和2019年交付使用。

简介：中国科学院武汉病毒研究所崔杰带领的团队在流感病毒重配方面取得新进展．研究人员发现了由H5N6重配产生的新毒株H3N6，该毒株的发现为禽流感病毒的防控提供了新的素材。相关研究日前在线发表于《科学报告》。

简介：目的对一株人感染H9N2禽流感病毒进行高通量测序（next—generationsequencing，NGS）分析，探讨其在人群流行的可能性。方法应用高通量测序技术进行全基因组序列测定（wholegenomesequencing，WGS）。对8个基因进行相似性检索，构建系统进化树并分析其关键位点的分子特征。结果8个基因与GenBank基因库相似度最高序列的来源不完全一致，系统进化树显示HA基因属于欧亚系I群，M基因位于G1-like分支，PB2位于G9-like分支，NA位于一独立分支，PBl，PA，NP，NS均位于SH／F／98-like分支。HA基因裂解位点为PSRSSR／GLF，226位受体结合位点为L。除M2基因$31N突变之外，NA基因茎63～65位缺失，PA和PB2基因未发生L336M和Q591R，E627K等可以增强病毒对哺乳动物适应性的突变，但发现可以增强病毒毒力的突变如M1基因N30D和T215A，PB2基因L89V，NSl基因P42S。除M2基因S31N突变外，NA基因和M2基因的药物结合位点未发生E119G，R152K，H274Y，R292K和L26F，V27A，A30T，G34E等耐药性突变。HA和NA糖基化位点预测结果都有8个糖基化位点，其中分别有7个和5个可靠程度较高。结论该H9N2禽流感病毒的大部分关键性位点较保守，只有少部分位点发生一定程度进化与变异，在人群引起流行的可能性不大，但需加强分子方面动态监测。

简介：目的:探讨淫羊藿素（icrm)通过PI3K/AKT信号通路对非小细胞肺癌H460细胞增殖的影响。方法:采用MTT比色实验检测，不同浓度(0、5、10、20、40、80Jma/L)淫羊藿素处理H460细胞24、48、72h后细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测不同浓度淫羊藿素对H460细胞凋亡的影响,Wetenblot实验检测不同浓度淫羊藿素对H460细胞中PI3K、AKT、p-AKT、Cleavd-Caspase-9蛋白质表达水平的影响。结果:淫羊藿素可抑制非小细胞肺癌H460细胞的增殖,并表现为剂量和时间依赖性（P<0.05)。0、5、10、20jmol/L淫羊藿素处理只460细胞2411后，只460细胞凋亡率分别为（4.90±1.20)%、（13.5±2.32)%、（16.47±1.90)%和(27.43±3.15)%'<0.05。淫羊藿素可下调？13民、人『1'的表达水平,降低人『1'的磷酸化^-人『1')水平，上调Clavd-Capae-9表达水平(P<0.05)。结论:淫羊藿素可能通过抑制TOKAKT信号通路激活，抑制H460细胞增殖。

简介：药用植物内生菌有产生活性物质的潜力,是天然功能色素的潜在来源之一。文章从温度、pH、光照、金属离子、氧化剂与还原剂、食品添加剂等方面探究铁皮石斛内生菌H1B1所产红色素的稳定性。结果表明,该菌所产红色素对温度、自然光较为稳定,对紫外线敏感;该色素在pH≥7环境条件下色素稳定性高且有增色效应;金属离子中,K＋、Mn2＋、Mg2＋、Co2＋、Al3＋、Cu2＋、Na＋、Zn2＋对该色素有护色或增色作用,但Fe3＋和Ca2＋对色素有明显的不良影响,容易产生沉淀;NaCl和葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等食品添加剂和配料能较好地保持红色素色价的稳定性,且10%~15%的葡萄糖对其有明显的增色效应。

简介：Let'stakeHasaninfinite–dimensionalHilbertspaceandK(H)bethesetofallcompactoperatorsonH.UsingSpectraltheoremforcompactself–adjointoperators,weprovetheHyers–UlamstabilityofJensen*-derivationsfromK(H)intoK(H).

简介：我是什么时候睡在这片树林的？不知道,当我醒过来的时候,就发现自己被遗弃了,或者说被收麦人遗落在这片离麦田不远的林子里。我是随着收麦车的颠簸掉下来的,还是被收割机旋转的飞轮甩出去的,一点印象也没有。当时,我一定昏过去了,现在醒过来,不见了众多的麦姐麦妹,我顿时觉得无比冷清和孤单。我本来是一粒具有蓬勃生命力的种子,在等待下田的日子,可以说是度日如年。北方的天气时好时坏,

简介：

简介：江南四月,芳菲已尽,杜鹃却在春的尾巴上绯红成片,云蒸霞蔚了起来.无论是开阔的市中心广场,亦或是临水的滨江公园,花的繁盛,绝非一般.时而风过,吹起一朵朵零落的花儿,飞扬中,带着宿命般的投入.不知道下一站的命途,却依旧带上憧1景飞扬,那若有似无的清香,便是将未来付与四月天的虔诚.看似随遇而安,却有着将身体和灵魂双双交付的沉重,在极致的盛放中寻找与回归.看似空灵,亦有着最后的沉重,看似妥协,却透着本质的刚烈.

简介：我在草坪上晒太阳，我在大树下乘凉，我在草坪和大树之间尽情玩耍，我就是一株自由自在的蜡梅。有一天，我和小草弟弟一起玩耍。谁知，在我们玩儿得正愉快时，有一个人突然把我拔了起来，我努力挣扎着试图要脱离这个人的手，可怎么也挣脱不掉，只好跟这个来路不明的家伙走了。

简介：摘要目的探究蜂毒素与沉默组织蛋白酶S（CTSS）对于MHCC97H细胞增殖、凋亡的影响。方法通过制备的沉默CTSS的MHCC97-H细胞株（沉默CTSS的细胞株用PLVT1150表示，正常表CTSS的细胞株用PLVT8表示）,使用不同浓度蜂毒素干预2组细胞30min，后流式细胞仪检测细胞凋亡率,重复三次。制作沉默CTSS的MHCC97-H裸鼠皮下荷瘤模型，使用80μg/（kg*day）蜂毒素干预，对照组予以PBS代替。观察裸鼠移植肿瘤生长的状况，记录肿瘤生长情况。免疫组化检测caspase3，cleved-caspase3在裸鼠荷瘤模型中的表达。结果用流式细胞仪检测各组凋亡率，PLVT1150细胞凋亡率依次为18.87%、36.72%、52.98%，PLVT8凋亡率依次为4.27%、15.32%、28.86%，进行两两比较，P<0.05。比较裸鼠皮下移植瘤发现第1组（PLVT1150+PBS）与第2组（PLVT1150+蜂毒素）比较、第3组（PLVT8+PBS）与第4组（PLVT8+蜂毒素）比较，裸鼠荷瘤体积在第14天出现统计学差异；第2组与第4组比较在第22天出现统计学差异；第1组与第4组比较，在第31天出现统计学差异。在裸鼠肿瘤组织切片的免疫组化实验中检测到4组Caspase-3阳性表达率依次为40%、20%、80%、40%，进行灰度值比较1组与2组相比，P<0.05；3组与4组相比，P<0.05.Cleved-caspase-3阳性表达率分别为40%，80%，20%，60%，灰度值比较1组与2组相比，P<0.05；3组与4组相比，P<0.05。结论沉默CTSS促进MHCC97-H细胞凋亡，蜂毒素与沉默CTSS引起的MHCC97-H细胞凋亡有协同作用，蜂毒素有可能为肝细胞癌生物学治疗的新研究方向。

简介：多年前，看到诗人旧海棠的名字，便想，又一个李清照的红粉？如今，读到旧海棠的小说新作，竟真的就看到了绿肥红瘦，浓淡相宜了。小说以朴素天然的风姿，静静地掀开人性的裂口，幽微又有幽光，悲凉又有悲悯。