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  • 简介:韩国从俄罗斯、中国、新西兰友澳大利亚等国进口占全世界80%的鹿茸,是世界最大的鹿茸进口国。自2000年出现鹿疯牛病(鹿慢性消耗病,即狂鹿症),韩国开始全面禁止进口鹿茸。一些不法进口公司将尚未认定为鹿茸的北美大角鹿的角冒充俄罗斯产鹿茸投入韩国市场,造成了市场秩序的混乱。

  • 标签: DNA芯片 鹿茸 韩国 鉴别 市场秩序 进口国
  • 简介:研制人线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)表达谱芯片,鉴定芯片的特异性和稳定性,完善芯片的制备和使用程序,优化实验参数,为线粒体功能研究提供物质基础及技术保障。以人mtDNA剑桥序列为标准,设计mtDNA编码的13种mRNA、2种rRNA和9种tRNA基因及蛋白产物定位于线粒体的核DNA(nDNA)编码的5种凋亡相关基因寡核苷酸探针。芯片点样仪点制芯片,进行荧光显示和洗脱,用其检测人宫颈癌上皮Hela细胞和人肾小管上皮Hc1细胞cDNA文库mtDNA编码基因及nDNA编码凋亡相关基因的差异表达情况。所点制的芯片扫描结果显示,样点分布均匀、清晰,规整度好,无漏点、连点。cDNA文库杂交鉴定结果显示,整张芯片荧光信号均匀一致,背景清晰,各基因重复样点杂交结果一致,各质控点能正常显示。成功制备了人mtDNA基因表达谱芯片,完善了该芯片的制备和使用程序,通过初步应用,证明所研制的人mtDNA基因表达谱芯片具有特异性高、稳定性好等优点,可用于不同组织或细胞样本cDNA文库mtDNA基因的差异表达分析。

  • 标签: 线粒体DNA 基因表达 寡核苷酸芯片 信使RNA 核糖体RNA 转运RNA
  • 简介:摘要目的建立一种简便方法,用于乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)多态性分析。方法将标记生物素的dUTP在双重聚合酶链反应(PCR)时掺入DNA样品目的断片,并将目的断片杂交于含HBV核苷酸序列(1896、1814、1762、1764、P区552)的野生型及突变型探针的DNA芯片上,用亲和素-碱性磷酸酶进行显色,并转印于尼龙膜上,再用光学扫描仪读取结果。结果42例乙型肝炎患者HBV核苷酸序列1896、1814、1762、1764、P区552位点突变率分别为40%、31%、50%、50%、10%;该法检测敏感度为5.6×102病毒拷贝数/毫升;特异性高;强、弱阳性批内变异系数(CV)分别为15.1%和19.8%。结论生物素-亲和素系统用于HBVDNA多态性芯片显色,该法简便,不需特殊设备,易于推广应用。

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  • 简介:摘要目的应用甲基化芯片与生物信息技术,筛选大气污染细颗粒物(PM2.5)对人支气管上皮(HBE)细胞的差异甲基化位点及其包含的基因和通路,为进一步研究PM2.5对HBE细胞毒理学机制提供科学依据。方法于2020年8月,用10 μg/ml和50 μg/ml PM2.5水溶物染毒HBE细胞24 h,即PM2.5 10 μg/ml染毒组(低剂量组)和PM2.5 50 μg/ml染毒组(高剂量组);用未染毒的HBE细胞作为对照组,将DNA片段与芯片进行杂交,芯片扫描读取数据后分析数据,筛选差异甲基化位点,进行差异甲基化位点的GO分析和KEGG分析,功能表观遗传模块(FEMs)分析整体差异甲基化位点的相互作用关系。结果与对照组比较,低剂量组共筛选出127个差异甲基化位点,包含89个基因,其中甲基化水平升高的有55个位点,甲基化水平降低的有72个,甲基化差异位点主要集中在Body区域和UTR区域。与对照组比较,高剂量组共筛选出238个差异甲基化位点,包含168个的基因,其中甲基化水平升高的有127个位点,甲基化水平降低的有111个,其差异位点也主要集中在Body区域和UTR区域。通过FEMs分析,筛选出8个相互作用最多的基因,其中6个基因有明显甲基化水平变化。在低剂量组的甲基化差异位点中找到与细胞凋亡相关的MALT1基因;在高剂量组的甲基化差异位点中找到与癌变相关的PIK3CA、ARID1A基因;在FEMs分析结果中找到与肿瘤抑制相关的TNF基因。结论PM2.5染毒HBE细胞后,引起DNA甲基化水平明显变化,筛选出细胞凋亡和癌变相关基因,提示PM2.5致癌致突变作用可能与DNA甲基化有关。

  • 标签: 甲基化 细颗粒物 基因 人支气管上皮细胞 DNA 生物标志物
  • 简介:摘要基因芯片技术迅速发展,因其高通量、高效性、节省资源等特点已被广泛运用,本文将对实验操作中可能的注意点做一个重点的阐述,以提高未来工作中效率。

  • 标签: 基因芯片 石蜡 包埋
  • 简介:瞄准:检验在精子DNA损坏和精子之间的关系原子嘘染色的(H2B)。方法:我们从14连续asthenoteratozoospermic评估了精子样品不肥沃的人和六连续肥沃的控制。精子原子嘘染色的(H2B)和精子染色质正直(由精子染色质结构试金估计了并且表示了使用(i)DNA破碎索引的百分比[%DFI]并且(ii)高DNA污点能力[%HDS)])被评估。结果:HistoneH2B免疫细胞化学表明了二个原子染色模式:(i)焦点的有小斑点的染色;并且(ii)扩散染色。不肥沃的人有展出弥漫的H2B染色比的精子的一个更高吝啬的百分比做了肥沃的人(7.7%±4.6%vs.1.6%±1.2%,分别地P<0.01)。我们观察了在精子的比例之间的重要关系与弥漫原子嘘一染色和两精子%DFI(r=0.63,P<0.01)并且精子%HDS(r=0.63,P<0.01)。结论:数据证明不肥沃的人有精子的一个更高的比例与弥漫嘘一H2B与做肥沃的人并且建议精子DNA损坏力量比,至少部分地,由于反常地高嘘一个H2B层次。

  • 标签: 精子 精液DNA 组蛋白 男性不育症
  • 简介:摘要目的讨论DNA鉴定结果探究。方法查阅文献资料并结合个人经验进行归纳总结。结论如果办案人员不能正确理解DNA鉴定结论的概率性含义,尤其是不能正确区分三种不同类型的DNA鉴定结论,就可能会对案件事实作出错误的认定。对此,法医学学者指出“关于线粒体DNA鉴定结论,不同的实验室可能会有不同的表述……这些结论的理解对侦查和判案有重要的影响,理解偏颇会将案件向错误方向引导。

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  • 简介:世界上爱吃面条的人很多,但他们或许想不到,这种细长而具韧性的食物,成了科学家们研究的好帮手,可能有助于破解脱氧核糖核酸(DNA)结构中存留的一些难解之谜。

  • 标签: 脱氧核糖核酸 DNA 面条 双螺旋结构
  • 简介:Colorectalcarcinoma(CRC)isacommoncauseofmorbidityandmortalityworldwide.TwopathogenicpathwaysareinvolvedinthedevelopmentofadenomatoCRC.ThefirstpathwayinvolvesAPC/β-catenincharacterizedbychromosomalinstabilityresultingintheaccumulationofmutations.ThesecondpathwayischaracterizedbylesionsinDNAmismatchrepairgenes.AberrantDNAmethylationinselectedgenepromotershasemergedasanewepigeneticpathwayinCRCdevelopment.CRCscreeningisthemostefficientstrategytoreducedeath.SpecificDNAmethylationeventsoccurinmultistepcarcinogenesis.EpigeneticgenesilencingisacausativefactorofCRCdevelopment.DNAmethylationshavebeenextensivelyexaminedinstoolfromCRCandprecursorlesions.ManymethylatedgeneshavebeendescribedinCRCandadenoma,althoughnodefiniteDNAmethylationbiomarkerspanelhasbeenestablished.MultipleDNAmethylationbiomarkers,includingsecretedfrizzled-relatedprotein2,secretedfrizzled-relatedprotein1,tissuefactorpathwayinhibitor2,vimentin,andmethylguanineDNAmethyltransferase,havebeenfurtherinvestigated,andobservationshaverevealedthatDNAmethylationbiomarkersexhibitwithhighsensitivityandspecificity.ThesemarkersmayalsobeusedtodiagnoseCRCandadenomainearlystages.Realtimepolymerasechainreaction(qPCR)issensitive,scalable,specific,reliable,timesaving,andcosteffective.Stoolexfoliatedmarkersprovideadvantages,includingsensitivityandspecificity.AstoolqPCRmethylationtestmayalsobeanenhancedtoolforCRCandadenomascreening.

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  • 简介:据2012年5月20日SharonE(NatBiotechnol,2012May20.doi.10.1038/nbt.2205)报道,魏兹曼研究所研究人员的一项研究推进了DNA重写的图例,对于遗传代码的理解,这种方法是将大量预先设计好的DNA片段引人活细胞的基因组中,然后检测其引入后对基因组的改变。

  • 标签: DNA片段 科学家 信息 语言 研究人员 基因组
  • 简介:自英国乡村医生Jenner用牛痘疫苗预防天花取得成功以来,疫苗作为一种有效的免疫预防剂在临床应用已有200多年历史。20世纪九十年代,Wolff等偶然发现给小鼠肌注编码基因的重组质粒(细菌染色体以外的环状双链DNA)后,可在体内检测到编码蛋白,同时诱导机体产生了特异性免疫

  • 标签: DNA疫苗 免疫佐剂 肿瘤抗原
  • 简介:Someantitumoractivitiesofcomponent(E),extractedfromtherootofFagopynumCymosum(Trev)Meisn(FCTM),haverecentlybeendiscoveredinvivoandinvitro.ThecomponentE(CE)’spatternofactionwithtumorcellularDNAatthemolecularpharmacologicallevelwasinvestigatedbymacromolecularsynthesisexperiment(MSE)andhumanDNAinteractionsystemestablishedinourlaboratory.Theexperimentsdemonstratedthat,invitro,theagentcouldmarkedlyinhibittheincorporationof3H-TdRintothecellularDNA,andtheIC50inP388leukemiacellandinSGC-7901cellwas17.86μg/mland110.4μg/ml,respectively.Theagent,atmg/mllevel,couldproduceanintercalationreversionpatternwithDNAwithinashorttime(2hours).Butwhentheintervalwasprolongedforover4hours,theactionchangedtointercalationirreversiblepattern.Accordingtotheseobservations,theauthorsinferthatCEinteractswithDNAintwoways-directlyandindirectly.Theindirectaction,especiallyinlowconcentr

  • 标签: concentr DNA INTERCALATION INHIBIT ANTITUMOR PROLONGED
  • 简介:Themitochondrial12SrRNAhasbeenshowntobethehotspotformutationsassociatedwithbothaminoglycoside-inducedandnon-syndromichearingloss.Ofallthemutations,thehomoplasmicA1555GandC1494Tmutationsatahighlyconserveddecodingregioninthe12SrRNAhavebeenassociatedwithaminoglycoside-inducedandnon-syndromichearinglossinmanyfamiliesworldwide.TheA1555GorC1494Tmutationisexpectedtoformnovel1494C-G1555or1494U-A1555base-pairatthehighlyconservedA-siteof12SrRNA.ThesetransitionsmakethesecondarystructureofthisRNAmorecloselyresemblethecorrespondingregionofbacterial16SrRNA.Thus,thenewU-AorG-Cpairin12SrRNAcreatedbytheC1494TorA1555Gtransitionfacilitatesthebindingofaminoglycosides,therebyaccountingforthefactthattheexposuretoaminoglycosidescaninduceorworsenhearinglossinindividualscarryingthesemutations.Furthermore,thegrowthdefectandimpairmentofmitochondrialtranslationwereobservedincelllinescarryingtheA1555GorC1494Tmutationinthepresenceofhighconcentrationofaminoglycosides.Inaddition,nuclearmodifiergenesandmitochondrialhaplotypesmodulatethephenotypicmanifestationoftheA1555GandC1494Tmutations.TheseobservationsprovidethedirectgeneticandbiochemicalevidencesthattheA1555GorC1494TmutationisapathogenicmtDNAmutationassociatedwithaminoglycoside-inducedandnonsyndromichearingloss.Therefore,thesedatahavebeenprovidingvaluableinformationandtechnologytopredictwhichindividualsareatriskforototoxicity,toimprovethesafetyofaminoglycosideantibiotictherapy,andeventuallytodecreasetheincidenceofdeafness.

  • 标签: NONSYNDROMIC HEARING loss SECONDARY structure cell
  • 简介:目的:用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法准确地定是检验血清中乙型肝炎病毒(HBV)的数量和免疫指标,以指导临床。方法:采用HBV-DVAFQ-PCR诊断试剂盒,以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术组合所产生的实时检验定量PCR方法,检测了58例临床血清标本。结果:经FQ-PCR检测,9例HBV的HBsAg、HBeAg、HBcAg、HBcAb都阳性标本,其HBV-DNA的阳性率为100%,平均HBV-DNA拷贝数为2.0×10^8/ml;16例HBsAg、HBeAb、HBcAb都阳性的标本,其阳性率为62.5%(10例),平均拷贝数为5.2×10^5/ml,而常规PCR只有33%的阳性率;7例HBsAb、HBeAb、HBcAb都阳性的标本,其阳性率为14.3%(1例),平均拷贝数为4.7×10^3ml。结论:HBV-DNA的FQ-PCR检测较常规PCR更具有较高的灵敏度和特异性,且定量准确,结果可靠,能够避免PCR后处理导致物假阳性污染,可以真实反映HBV的感染和低复制状态,对于乙型肝炎的临床诊断,治病方案的选择和疗效观察有较大的指导意义。

  • 标签: 乙型肝炎病毒 荧光定量 聚合酶链反应 DNA HBV 假阳性污染
  • 简介:摘要人类线粒体是细胞质中重要的细胞器之一,随着mtDNA测序和线粒体基因组组成的确定,mtDNA突变与线粒体遗传病关系的研究逐渐受到人类的关注,从分子水平上探讨mtDNA突变及其所引起的线粒体遗传病和表达方式,且助于揭开这些遗传病的本质,为人类最终防治线粒体病提供理论基础。

  • 标签: 线粒体DNA 突变 遗传病
  • 简介:Objective:TolookforthefurtherevidenceforHPVL1HPV16E6,HPV18E6andEBVascarcinogenicfactorsinlaryngealcarcinoma.Method:weexaminedrepresentativenumbersofspecimensfromlaryngealcancerwithhighlysensitivePCRtechniqueforthepresenceofHPVL1andhigh-risktypesHPV16E6,HPV18E6andEBVLMP1.Results:UsingPCRdetection,7.3%sampleswereHPVL1positive,52.03%wereHPV16E6positive,30.89%wereHPV18E6positiveand9.13%wereEBVLMP1positive.ThelowincidenceofHPVL1andhighincidenceofHPV-16E6andHPV18E6genessuggestthatHPVmightbeintegratedintotumorcells.OurresultssupportaroleofHPV-16andHPV-18infectioninthepathogenesisoflaryngealcarcinomainChina.Conclusion:IntegrationofE6intohostgenomeandstableexpressionofthesegenesmaybeassociatedwiththecarcinogenesisoflaryngealcarcinoma.HPV-16andHPV-18maysynergisticallyfunctiononthepathogenesisoflaryngealcarcinoma.Ourresultssuggestanassociationoflaryngealcarcinogenesisandinfectionwiththehigh-riskHPVtypes16,HPV18andEBV.

  • 标签: 爱泼斯坦病毒 喉癌 EBV 病毒感染 HPV-16 HPV-18
  • 简介:摘要目的探讨用女性尿液检测沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)DNA和淋病奈瑟菌(neisseria gonorrhoeae,NG)DNA的临床意义。方法随机选取2019年1—6月性病科女性患者212例,每位患者取宫颈拭子做CT-DNA、NG-DNA、淋球菌培养,尿液做CT-DNA、NG-DNA。同时设置对照组30例。结果宫颈拭子CT-DNA阳性率为18.40%(39/212);尿液CT-DNA阳性率为19.81%(42/212),二者阳性率比较差异无统计学意义(χ2=0.14,P=0.71);宫颈拭子CT-DNA和尿液CT-DNA检测结果一致性好(Kappa=0.92,P<0.01)。淋球菌培养阳性率为5.19%(11/212),宫颈拭子NG-DNA阳性率为12.26%(26/212),二者阳性率比较差异有统计学意义(χ2=6.662,P=0.010);尿液NG-DNA阳性率为10.38%(22/212),与淋球菌培养阳性率相比,差异有统计学意义(χ2=3.976,P=0.046);宫颈拭子NG-DNA阳性率与尿液NG-DNA阳性率相比,差异无统计学意义(χ2=0.376,P=0.540)。宫颈拭子NG-DNA与尿液NG-DNA检测结果一致性好(Kappa=0.86,P<0.01)。结论用女性尿液检测CT-DNA、NG-DNA敏感性高、特异性好,取材方便,建议在临床普及。

  • 标签: 尿液 沙眼衣原体-DNA 淋球菌-DNA
  • 简介:摘要组织芯片也称组织微阵列,是生物芯片技术的一个重要分支,是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载玻片上,进行同一指标的原位组织学研究。组织芯片具有高效、快速、成本低、信息含量高、实验误差小、一次性实验即可获大量结果等特点。该技术自1998年问世以来,得到了大范围的推广应用。

  • 标签: 组织芯片 制作过程 体会