简介：目的探索构建针对人类核转运蛋白2(KPNA2)基因的重组慢病毒干扰RNA(shRNA)载体的方法,研究其对人骨肉瘤细胞株MG63的沉默效率。方法针对KPNA2基因设计小片段干扰序列。加入AgeⅠ酶和EcoRⅠ酶酶切位点,根据设计好的序列合成单链DNAoligo并退火合成双链DNAoligo。将合成好的双链DNAoligo与GV115载体重组,形成GV115-shRNA慢病毒载体。聚合酶链式反应(PCR)法鉴定筛选出阳性重组子,经测序后包装慢病毒载体。荧光法测定病毒滴度,重组慢病毒感染骨肉瘤细胞株MG63,通过显微镜观察细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达来计算其转染效率。RT-PCR法检测重组慢病毒RNA干扰载体对人骨肉瘤细胞株MG63中KPNA2表达的沉默效率。实验结果数据以均数±标准差(sx±)表示,应用SPSS13.0统计软件分析,两组均数间的比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计意义。结果经PCR分析和测序证实,成功构建KPNA2基因重组慢病毒RNA干扰载体;荧光法测定病毒滴度为4×108TU/ml;荧光显微镜下观察GFP,显示细胞感染效率达到80%以上;RT-PCR检测对照组及实验组KPNA2mRNA表达分别为0.991±0.087vs.0.216±0.012,差异有统计学意义(P<0.01)。结论KPNA2基因重组慢病毒RNA干扰载体构建成功,并有效干扰人骨肉瘤细胞株MG63中KPNA2mRNA的表达。

简介：摘要转运RNA(tRNA)是将信使RNA(mRNA)翻译成蛋白质的关键分子，研究表明它还是一些非编码小RNA的前体RNA。近年来，人们发现在细菌、真菌、植物和动物中存在一些长约16～60 nts的非编码RNA(ncRNA)，它们是由tRNA精确剪切而来的片段(tRF)，并非是随机降解的产物。目前人们对这类小分子RNA的认识还很有限，近年的研究表明tRF在各种疾病中具有重要的功能。本文针对tRF的分类、修饰及其在各种疾病中的作用及机制等研究进展进行综述。

简介：RNA干扰技术（RNAi）的发展对治疗脑部疾病展现出可观前景,而血-脑屏障在发挥保护中枢神经系统功能的同时,也阻碍各种药物运送到脑内。脑靶向运释系统研究开发实现了转运治疗性药物跨过血-脑屏障进入脑内。本文将对脑靶向运释系统的研究进展及脑靶向RNAi治疗脑部疾病的应用进行阐述,并结合靶向转运作用机制进行相关探讨,为脑靶向运释系统的设计研究和脑部疾病的治疗提供新思路。

简介：摘要目的分析阿霉素诱导的MCF-7耐药细胞(MCF-7/Adriamycin，MCF-7/ADR)中转运RNA及其来源片段(tRNA-Derived small RNAs，tDRs)表达谱变化，筛选出调控乳腺癌阿霉素耐药的tDRs。方法采用高通量测序检测MCF-7/ADR细胞的tDRs表达谱，筛选差异表达tDRs。基因本体和京都基因与基因组百科全书对差异tDRs进行生物学通路分析。细胞凋亡实验和实时定量聚合酶链反应检测转染后细胞凋亡能力和凋亡相关基因。两两比较采用成组t检验。结果MCF-7/ADR细胞中73条tDRs存在差异(差异倍数>2，P<0.05)。生物学分析示tDRs的主要功能及通路和肿瘤相关，尤其是上调的tDRs(tRF-58-75-Ala-AGC-1，tRF-58-75-Ala-AGC-5，tRF-58-75-Pro-AGG-1-M7和tRF-59-76-Tyr-GTA-4)与细胞凋亡关系密切。转染tRF-58-75-Ala-AGC-1抑制剂后，MCF-7/ADR转染组细胞凋亡率高于阴性对照组[(83.34±1.95)%比(71.12±5.01)%，t＝3.937，P<0.05]；MCF-7/ADR转染组细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2) mRNA表达水平低于阴性对照组(0.58±0.23比1.00±0.05)，t＝3.025，P<0.05)；半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、7、9 mRNA表达水平高于阴性对照组(1.29±0.11、1.50±0.16、1.22±0.07比1.00±0.05，t＝4.226、5.296、4.174，P<0.05)。结论MCF-7/ADR细胞的tDRs表达存在差异。

简介：

简介：1粉嫩萌腮提升你的幸运指数!最忆你少女的娇颜，俗话说爱笑的女孩运气不会太差无论面对什么样的逆境，姑娘展开你的笑颜吧，那粉嫩的娇颜会为你带来意想不到的好运气。粉粉嫩嫩的脸颊，让你看上去乐观又充满活力，新的一年，给自己一些幸运指数吧!

简介：摘要目的探讨转运RNA来源的小分子片段770（tRF-770）调控细胞骨架相关蛋白2（CKAP2）对乳腺癌细胞增殖的影响。方法使用MINTbase数据库v2.0序列与基因组中成熟的tRNA进行比对，确认tRF-770的染色体定位；TA克隆实验鉴定tRF-770；利用TargetScan和miRBase数据库分析预测tRF-770的靶基因；利用癌症基因组图谱（TCGA）数据库数据分析CKAP2在乳腺癌中的表达情况。选择乳腺癌细胞株MDB-MA-231和MCF7，分别分为空白对照组（不予任何处理）、tRF-770过表达组（转染tRF-770过表达序列）及阴性对照组（转染阴性对照序列）；另外设立tRF-770过表达+CKAP2-HA组（共转染tRF-770过表达序列与CKAP2过表达序列）。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测乳腺癌细胞中tRF-770的相对表达量；CCK-8法检测乳腺癌细胞增殖能力并进行挽救实验；双荧光素酶报告基因实验验证tRF-770的靶基因；蛋白印迹法检测CKAP2-ERK2信号通路相关蛋白的表达情况。结果tRF-770与9类tRNA剪切修饰的5'端完全匹配，TA克隆测序验证结果表明产物大小以及碱基与预期tRF-770序列一致。基于TCGA数据库数据分析发现CKAP2在乳腺癌组织中高表达（t=7.21，P<0.05）。qRT-PCR检测结果显示，在MDA-MB-231细胞中，空白对照组、阴性对照组、tRF-770过表达组tRF-770相对表达量分别为1.00±0.00、2.42±0.11、3.75±0.01，差异有统计学意义（F=1 395.00，P<0.001）；在MCF7细胞中，3组tRF-770相对表达量分别为1.00±0.00、2.45±0.21、3.26±0.16，差异有统计学意义（F=169.30，P<0.001）；两种细胞中，与空白对照组及阴性对照组比较，tRF-770过表达组中tRF-770相对表达量均升高（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果表明，tRF-770与CKAP2 mRNA 3'UTR结合。CCK-8法检测结果显示，在MDA-MB-231、MCF7细胞中，第3天和第4天tRF-770过表达组细胞增殖能力均低于空白对照组和阴性对照组（均P<0.05）；第3天和第4天阴性对照组与tRF-770过表达组细胞增殖能力比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）。CCK-8法挽救实验结果显示，在两株乳腺癌细胞中，tRF-770过表达+CKAP2-HA组自转染第2天起，细胞增殖能力均高于tRF-770过表达组（均P<0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，两种乳腺癌细胞中，tRF-770过表达组与阴性对照组比较，CKAP2、p-ERK2、PCNA蛋白表达均下降（均P<0.05）；ERK2蛋白在MDA-MB-231细胞中表达量变化较小，而在MCF7细胞中tRF-770过表达组蛋白表达下降。结论tRF-770可能通过CKAP2-ERK2信号通路抑制乳腺癌细胞增殖。

简介：

简介：RNAi是双链RNA介导的、序列特异性的转录后基因沉默,自1998年发现至今已有很大进展.本文综述了RNA干涉的分子机理及其应用研究进展.

简介：摘要：目的：探究安全转运程序管理是否具有临床推广价值。方法：从我院2015年11月到2017年4月期间接诊的高危儿中选取符合本次纳入标准的患儿一共300例，然后对其展开研究，将这些高危儿平均分为两组，对于A组的高危儿而言，采用的是安全转运程序管理的护理方式，对于B组高危儿而言，采用的是常规性质的转运管理，期间医护人员需要记录A、B组高危儿在转运过程中发生的不良情况、转运效果等等，以作对比分析。结果：采用安全转运程序管理的这一组高危儿转运成功率更高，家属对于转移到满意度更高。A、B组高危儿转运过程中的差异较为明显，具有统计学意义。结论：安全转运程序管理在高危儿转运中值得推广。

简介：摘要为了利于腔镜器械的转运和使用安全，方便供应室人员操作，特别对于腔镜器械体积大小、结构复杂、光学目镜精密及昂贵，易损坏，我院消毒供应中心与手术室接送器械的路途特点、对转运车进行改良，转运车具体要求长90厘米、宽60厘米、高70厘米，内部放置10厘米防震垫、车轮5寸的防震静音轮。分两层设计使车上的器械更加整齐有序，可提高工作人员的工作效益。腔镜器械转运车的运用，可以保证精密器械放置、转运途中和保管中的安全。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-205靶向调控单羧酸转运蛋白1(MCT1)对结直肠癌细胞乳酸水平和增殖能力的影响。方法选取2017年6月至2019年6月新乡市中心医院收集的280例结直肠癌和对应癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-205和MCT1表达水平；采用慢病毒介导对照miRNA和miR-205感染SW480结直肠癌细胞系，构建miRNA对照组和miR-205组细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖能力；采用比色法测定肿瘤组织和两组细胞胞内乳酸水平；采用碘化丙锭测定两组细胞周期；采用双荧光素酶报告基因分析miR-205靶基因；采用Western blot分析两组细胞增殖和周期相关蛋白的表达水平。应用SPSS 17.0统计学软件分析，符合正态分布的以均数±标准差表示，组间比较采用t检验。结果癌旁组织miR-205表达水平(1.22±0.19)明显高于结直肠癌组织(0.51±0.11)，差异有统计学意义(t＝4.991，P<0.05)。癌旁组织MCT1蛋白相对表达水平(0.87±0.17)明显低于结直肠癌组织(2.72±0.23)，差异有统计学意义(t＝5.198，P<0.05)。癌旁组织乳酸水平[(1.97±0.24) mmol/L]明显低于结直肠癌组织[(4.71±0.87) mmol/L]，差异有统计学意义(t＝3.718，P<0.05)。miRNA对照组细胞乳酸水平[(2.76±0.82) mmol/L]明显高于miR-205组[(1.20±0.18) mmol/L]，差异有统计学意义(t＝3.338，P<0.05)。miRNA对照组细胞吸光度值[(1.86±0.64)]明显高于miR-205组[(1.23±0.39)]，差异有统计学意义(t＝3.011，P<0.05)。miRNA对照组细胞G0+G1期比例[(32.73±3.09)%]明显低于miR-205组[(43.19±3.12)%]，差异有统计学意义(t＝2.810，P<0.05)。miRNA对照组细胞S期比例[(34.22±4.17)%]明显高于miR-205组[(24.44±2.95)%]，差异有统计学意义(t＝2.422，P<0.05)。生物信息学分析结果显示MCT1是miR-205的靶基因。miRNA对照组细胞MCT1相对表达水平(1.09±0.12)明显高于miR-205组(0.48±0.10)，差异有统计学意义(t＝2.864，P<0.05)。结论miR-205通过调控MCT1表达水平，调节细胞内乳酸水平，进而促进了肿瘤细胞增殖。

简介：AbstractGastric cancer (GC) is a common malignancy and is the third leading cause of cancer-related death. At present, there is no simple and effective screening method for early-stage GC, and the treatment results and prognosis are poor. With the continuous improvement of molecular biology techniques, research on circular RNA (circRNA) has gradually expanded over time. Much data supports the role of circRNA in tumorigenesis. Moreover, due to its structural specificity and biological stability, circRNA is anticipated to be a potential biomarker for tumor diagnosis. Studies have confirmed that circRNA can participate in the proliferation, invasion, metastasis, and apoptosis of GC. These findings will lead to novel directions for the diagnosis and treatment of GC. This article reviews the structure and function of circRNA, summarizes the current studies on circRNA, and discusses the potential diagnostic value of circRNA in GC.

简介：摘要目的观察肝细胞癌患者血清中微小RNA(miRNA，miR)-432、微小RNA-432(miR-30b)及微小RNA-432(miR-764)水平。方法选取安徽医科大学第三附属医院2015年1月30日至2018年1月30日收治的150例肝细胞癌患者，同时选取150例年龄匹配的体检结果健康者作为对照组，采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测研究对象外周血中miR-432、miR-30b及miR-764表达水平。观察miR-432、miR-30b及miR-764与肝细胞癌患者临床病理因素的相关性，并对肝细胞癌患者进行随访，观察miR-432、miR-30b及miR-764与患者总生存期(OS)的相关性。采用独立样本t检验及Log-rank检验。结果肝细胞癌患者外周血中miR-432(2.11±0.71)、miR-30b(1.88±0.68)及miR-764(1.90±0.65)水平均较对照组高(1.12±0.40、1.01±0.38、0.99±0.35，t＝4.879、13.679、15.097，P<0.01)。miR-432、miR-764表达量与肝细胞癌TNM分期有相关(P<0.05)，miR-30b与肝细胞癌TNM分期及分化程度有相关(P<0.05)。Kaplan-Meier法及Log-rank检验显示，miR-432、miR-30b及miR-764表达量升高组OS短于降低组(Log-rank χ2＝16.433、10.575、7.998，P<0.05)。Cox多因素分析均显示，TNM分期、miR-432、miR-30b、miR-764、肿瘤分化程度是肝细胞癌OS的独立影响因素[比值比(OR)＝2.904、2.135、1.651、1.496、1.205，P<0.05]。结论肝细胞癌患者循环中miR-432、miR-30b及miR-764表达上调，且与患者总生存率降低密切相关。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-519靶向ATP结合盒转运体G1(ABCG1)对乳腺癌细胞吉西他滨耐药性的影响。方法选取2015年6月到2018年6月来焦作市人民医院接受治疗的乳腺癌患者148例。根据患者对吉西他滨化疗敏感性分为敏感组和耐药组。荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析两组乳腺癌组织中miR-519表达水平。构建miR-519或对照miRNA过表达慢病毒载体，包装慢病毒，感染MCF-7乳腺癌细胞，构建miR-519(miR-519组)和对照组细胞株(miRNA对照组)。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法分析miR-519组和miRNA对照组细胞对吉西他滨的敏感性。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-519的靶基因；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-519对靶基因表达的影响。组间数据比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果与吉西他滨敏感组(1.21±0.23)比较，耐药组患者肿瘤组织中miR-519 mRNA表达水平(0.30±0.12)明显下降，差异有统计学意义(t＝3.091，P<0.05)。CCK-8结果显示，miR-519组和miRNA对照组细胞增殖能力(1.76±0.23比1.65±0.26)比较差异无统计学意义(t＝0.691，P>0.05)。经吉西他滨处理后，miR-519组细胞增殖能力(0.68±0.19)较miRNA对照组细胞(1.12±0.22)明显下降，差异有统计学意义(t＝2.819，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示ABCG1是miR-519靶基因。耐药组肿瘤组织中ABCG1蛋白表达水平(1.65±0.25)明显高于敏感组肿瘤组织(0.84±0.19)，差异有统计学意义(t＝2.619，P<0.05)。miR-519组细胞ABCG1蛋白表达水平(0.34±0.11)较miRNA对照组细胞(1.43±0.24)明显增加，差异有统计学意义(t＝3.014，P<0.05)。结论miR-519可能通过ABCG1调控乳腺癌对吉西他滨的敏感性。

简介：摘要目的探讨微小RNA-140-5p（miR-140-5p）在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）中的表达及其在ESCC细胞增殖和侵袭中的作用。方法即时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）分析ESCC组织和细胞样本中miR-140-5p的表达。将阴性对照和miR-140-5p类似物转染Eca109和KYSE70细胞，细胞增殖与活性检测试剂盒（CCK-8）和Transwell分别检测转染后细胞的增殖和侵袭能力的变化，双荧光素酶报告实验证实miR-140-5p与葡萄糖转运蛋白1（Glut1）的相互作用，Western blot用来检测转染后Glut1蛋白的表达。结果GEO数据分析结果表明，ESCC组织中miR-140-5p的表达水平显著低于正常组织，差异均具有统计学意义（P<0.01）。qPCR结果显示，ESCC组织和细胞中miR-140-5p的表达均显著低于正常组织和正常食管上皮细胞Het-1A，差异均具有统计学意义（P<0.01）。miR-140-5p的表达与ESCC患者肿瘤的分化程度、TNM分期和淋巴结转移均密切相关，高表达miR-140-5p的ESCC患者生存率显著高于低表达患者，差异具有统计学意义（P<0.05）。miR-140-5p类似物显著上调Eca109和KYSE70细胞中miR-140-5p的表达，其表达上调显著抑制Eca109和KYSE70细胞的增殖和侵袭能力。双荧光素酶报告实验结果表明，Glut1是ESCC细胞中miR-140-5p的直接作用靶点，其在ESCC组织中表达显著上调，其与miR-140-5p表达呈负相关关系，miR-140-5p类似物显著抑制Eca109和KYSE70细胞中Glut1蛋白的表达。结论miR-140-5p在ESCC的发生发展中发挥重要作用，靶向miR-140-5p/Glut1可能成为ESCC患者新的治疗策略。

简介：摘要目的总结探讨车祸伤患者院前急救与转运方法及处理经验。方法2010年11月至2011年9月196例车祸伤患者的急救资料进行回顾性分析，总结抢救过程中的经验教训。结果196例中因伤势过重现场死亡10例,8例在转运中因伤势过重死亡,余178例病例均得到及时有效的院前救治,院前急救总有效率达90.8%。结论采取合理正确的综合对症性院前急救方法能够有效提高车祸患者救治成功率，给后续治疗创造更好的机会。

简介：摘要燃料转运装置是核电厂燃料操作与贮存系统中重要的换料设备之一，承担着传输燃料组件的重要作用。本文主要对在燃料转运装置调试过程中出现的一些问题及处理方法进行小结，以期对相关人员有所帮助。

简介：

简介：据ClarkeTA2011年6月7日[ProcNatlAcadSciUSA,2011,108（23）：9384-9389]报道,英美科学家首次精确地展示了细菌中运送电荷的细胞内蛋白质分子结构,详细揭示了细菌如何将电子由细胞内推到细胞外的＂细枝末节＂,