简介：摘要目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)技术诊断艾滋病患者肺结核的应用价值。方法回顾性分析2017年7月至2019年11月上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心收治的226例疑似肺结核的艾滋病患者的临床资料。分别进行痰涂片荧光染色显微镜下检查、BACTEC MGIT 960液体培养(或罗氏固体培养)和Xpert MTB/RIF检测，并分析在艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断MTB感染和利福平耐药的灵敏度和特异度。结果226例疑似肺结核患者中，痰培养阳性94例(41.6%)，其中MTB阳性51例(54.3%)，非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria，NTM)阳性43例(45.7%)。以痰分枝杆菌培养阳性且结核分枝杆菌分泌蛋白64抗原阳性为金标准，Xpert MTB/RIF技术诊断MTB的灵敏度为72.6%[95%可信区间(confidence interval，CI)66.7%～78.4%]，特异度为97.1%(95%CI 95.0%～99.3%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阳性患者MTB的灵敏度为76.7%(95%CI 67.7%～85.8%)，特异度为90.0%(95%CI 83.6%～96.5%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阴性患者MTB的灵敏度为50.0%(95%CI 41.8%～58.2%)，特异度为99.3%(95%CI 97.9%～100.0%)。18例患者同时检测利福平表型和基因型耐药，以表型耐药为金标准，Xpert MTB/RIF技术检测利福平基因型耐药的灵敏度为75.0%，特异度为100.0%。结论艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断肺结核的灵敏度和特异度均较高，且能快速区分MTB和NTM，具有较好的应用价值。

简介：

简介：摘要本研究旨在构建基于核酸滚环扩增（RCA）的简便快速、超灵敏的光学生物传感技术，并将其运用于结核杆菌耐药相关基因的多重检测。本研究在2020年2月至2021年5月期间，于陆军军医大学第一附属医院检验科，针对异烟肼、利福平和链霉素耐药的高频基因突变位点katG315（AGC➝ACC）、rpoB531（CAC➝TAC）和rpsL43（AAG➝AGG），分别设计锁式探针（padlock probe，PLP）、引物和捕获探针，构建了基于磁珠的固相RCA恒温扩增反应体系，并进行了实验参数的优化。通过多色荧光探针（Cy3/Cy5/ROX）对RCA产物精准捕获与信号放大，实现了对3种突变基因的单管多重检测。进一步对该方法的灵敏度、特异性与线性范围等分析性能进行验证，结果显示同一反应体系中katG315的响应范围为1.0 pmol/L至0.1 nmol/L，rpoB531和rpsL43的响应范围为1.0 pmol/L至50.0 pmol/L和1.0 pmol/L至20.0 pmol/L，且该方法具有较好的特异度与灵敏度，在混合靶标中可精确识别单碱基突变，最低检出限低至1.0 pmol/L；在模拟血清样本的回收实验中，回收率可达95.0%~105.2%。综上，本研究构建的恒温扩增型多重检测方法可快速实现3种耐药突变位点的单管多重检测，该技术成本低廉、简便快速、不依赖大型设备，为病原体耐药基因检测提供了一种新的分析方法。

简介：摘要：目的：对实时荧光定量PCR在痰标本中结核分枝杆菌检测中的应用价值进行分析。方法：本次实验对象为结核患者，实验时间集中在2018年9月-2020年9月，共计90例患者参与本次实验中来。本次实验分组依据为结核分枝杆菌检测手段，依据不同检测方法将所选患者分为甲组、乙组及丙组。甲组患者实施实时荧光定量PCR检测，乙组患者实施抗酸染色检测，丙组患者实施改良罗氏培养法检测，对三组患者检验结果进行分析及对比。结果：对本次实验进行系统的分析，甲组患者中共计16例患者检测结果为阳性，乙组患者中共计8例患者检测结果为阳性，丙组患者中共计10例患者检测结果为阳性，分别占总人数比重的53.33%、26.67%及33.33%，三组相关数据之间差异凸显，（p＜0.05）。结论：相比抗酸染色检测及改良罗氏培养法检测，实时荧光定量PCR检测在痰标本中结核分枝杆菌检测中的应用效果更加突出，其能够在一定程度上提高检测结果的准确性，而且具有操作简单、等待时间较短等优势，为疾病预防控制中心工作人员开展工作提供了极大的便利。

简介：【摘 要】目的：本次研究多通道荧光探针的滚环扩增技术应用在结核分枝杆菌耐药基因的检测中的应用。方法：通过多通道荧光探针(HEX/FAM/ROX)对滚环扩增产物精准捕获与信号放大，实现对三种突变基因的单管多重检测。结果：通过应用多通道荧光探针的滚环扩增技术，同一反应体系中中katG315的响应范围为1.5 pmol/L至0.1 5nmol/L, rpoB531和rpsL43的响应范围为1.5pmol/L至60.0 pmol/L和1.5 pmol/L至25.0 pmol/L,特异度与灵敏度较高，可精确识别单碱基突变；模拟血清样本回收实验中，回收率95.3%-105.5%。结论：多通道荧光探针的滚环扩增技术检测具有较高的特异性，耗时短，灵敏度高的优势，临床应用价值显著。

简介：目的评价检测rpoB基因突变在结核分枝杆菌耐利福平（I肝）耐药性测定中的应用价值。方法采用DNA序列分析法和聚合酶链反应-单链构象多态性（PER—SSCP）法对91株结核分枝杆菌临床分离株（其中药物敏感株35株，耐RFP或含耐RFP耐多药株56株）rpoB基因核心区域的突变情况进行检测。结果以结核分枝杆菌H37RV为对照，所有35株药物敏感株的rpoB基因均无突变，用DNA序列分析方法检测56株耐药株中53株发生突变，敏感性为94．6％（53／56），其中最常见的突变位点是531位丝氨酸和526位组氨酸。PER—SSCP检测56株耐RFP分离株中，52株rpoB基因SSCP图谱异常，其敏感性为92．9％（52／56）。结论DNA序列分析对判断结核分枝杆菌耐利福平非常有价值。PER—SSCP可初步筛选结核分枝杆菌RFP耐药性。

简介：摘要目的分析灌洗液结核分枝杆菌(TB)及利福平耐药快速检测(XpertMTB/RIF)、TB培养及TB脱氧核糖核酸(TB-DNA)检测在肺结核诊断中的应用价值。方法选取温州市中心医院2018年1月至2020年1月收治且经临床诊断为肺结核的患者75例作为研究对象。以临床诊断结果作为金标准，分析XpertMTB/RIF检测、TB培养及TB-DNA检测肺结核的敏感性、特异性及准确性，并评估TB对利福平耐药性及患者痰中带血、发热等不良反应情况。结果XpertMTB/RIF检测诊断肺结核的敏感性、特异性、准确性分别为95.24%、72.71%、85.33%；TB培养检测诊断肺结核的敏感性、特异性、准确性分别为80.95%、66.67%、74.67%；TB-DNA检测诊断肺结核的敏感性、特异性、准确性分别为78.57%、69.70%、74.67%。XpertMTB/RIF检测肺结核的敏感性与TB培养检测、TB-DNA检测比较，差异均有统计学意义(χ2＝4.086、5.126，P＝0.043、0.024)。以临床诊断结果为金标准，在获取的阳性标本中，XpertMTB/RIF对耐药性检测的灵敏度、特异度分别为72.73%、93.55%；TB培养对耐药性检测的灵敏度、特异度分别为54.55%、74.19%；TB-DNA对耐药性检测的灵敏度、特异度分别为63.64%、70.97%。XpertMTB/RIF对耐药性检测的灵敏度、特异度均高于TB培养与TB-DNA检测，差异均有统计学意义(χ2＝4.292、5.415，P＝0.038、0.020)。进行纤维支气管镜检查、肺泡灌洗及刷检过程中，75例患者均未出现严重不良反应，术后可见2例痰中带血、1例发热，以上患者在1～3 d后不良反应均消失。结论XpertMTB /RIF检测、TB培养及TB-DNA检测在肺结核诊断中均有较好的应用价值，但在快速检测肺结核及利福平耐药方面，XpertMTB/RIF检测的准确性更好。

简介：摘要日趋升高的结核病患病率，以及耐药菌株的增多和扩散，使结核病成为危害全球民众健康的公共卫生问题。结核杆菌可以侵害人体各个器官，主要损害肺脏，引起肺结核病。在单一传染病导致人类死亡的名单中，结核病致死率排名第二。近年来，结核病在大多数国家中出现流行回升的趋势，每年约有900万例新发患者和200万例死亡患者。为了给该病临床诊断治疗提供理论参考，本文概述了结核分枝杆菌的最新检测方法及其耐药机制。

简介：摘要目的研究同时检测患者是否结核，以及是否对利福平耐药，对涂阴培阳病人具有非常高的敏感性和特异性，两小时内即可得到检测结果，所用仪器设备简单。

简介：

简介：摘要目的了解本地区结核分枝杆菌利福平耐药基因的突变特征。方法利用基因芯片检测346例经鉴定为结核分枝杆菌的菌株利福平耐药基因，分析本地区利福平耐药基因突变特征。结果346例结核分枝杆菌中利福平耐药基因发生突变的例数为58例（16.7%）。利福平rpoB基因耐药位点分布如下531位点为58.6%，526位点为31.1%，511位点为6.9%，516位点为3.4%。结论本地区MTB对利福平耐药rpoB基因耐药位点以531位点最多，526位点次之。

简介：摘要目的探析分子信标荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌方法建立及其临床应用效果。方法选取167份肺结核患者痰液为研究标本，分别采用分子信标荧光定量PCR技术、抗酸染色法、集菌培养法对标本进行检测，回顾性分析三种检测方法的阳性检出率。结果分子信标荧光定量PCR技术的阳性检出率为70.66%，抗酸染色法为29.34%，集菌培养法为42.51%，分子信标荧光定量PCR技术的阳性检出率优于其他两种检测方法（P＜0.05）。结论分子信标荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌的阳性检出率、特异性、敏感性较高，可为肺结核的临床诊断和治疗提供借鉴，值得进一步推广和应用。

简介：【摘要】目的：分析荧光定量 PCR对痰结核分枝杆菌的检测效率。 方法：对2017.9~2019.9期间我院接收的 156例结核病患者为研究对象， 收集其痰标本，分别应用荧光定量PCR检测、改良罗氏培养法、涂片染色法检测结核分枝杆菌，对三种方法的检测结果进行比对分析。结果：与改良罗氏培养方法、涂片染色法相比，荧光定量 PCR检测方法阳性检出率提升明显，检测结果差异有统计学意义（ P<0.05）。结论：荧光定量 PCR对痰结核分枝杆菌具有较高的灵敏度，可提升检出率。

简介：摘要目的评估Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术用于快速筛查利福平耐药结核病的临床价值。方法收集2016年9月3日至2019年8月11日在浙江省中西医结合医院收治的经Bactec MGIT 960液体培养药敏确诊为结核病，且具有Xpert MTB/RIF和基因芯片技术结果的150例患者临床资料，对所有患者分离培养菌株行荧光PCR熔解曲线检测。以Bactec MGIT 960液体培养药敏结果为金标准，分析Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术对利福平耐药结核病的诊断效能。绘制受试者工作曲线(ROC)评估三种方法在利福平耐药结核病诊断中的价值。结果以Bactec MGIT 960药敏结果为金标准，Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术检测利福平耐药的敏感度分别为88.89%(16/18)、94.44%(17/18)、88.89%(16/18)，特异度分别为96.21%(127/132)、96.21%(127/132)、95.45%(126/132)。三种检测方法的敏感度和特异度比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。三种分子方法检测利福平耐药与Bactec MGIT 960药敏结果的一致性Kappa值分别为0.794、0.827、0.770。ROC曲线分析显示，Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术的ROC曲线下面积分别为0.926、0.953、0.922。三种检测方法对利福平耐药均具有较好的诊断价值(P<0.01)，但三种方法比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。三种方法检测利福平耐药与Bactec MGIT 960药敏不一致结果共8例。结论Xpert MTB/RIF、荧光PCR熔解曲线和基因芯片技术三种分子方法对利福平耐药性检测能力相当，均具有较高的敏感度和特异度，适合快速筛查利福平耐药结核病。

简介：摘要在应用抗结核药物治疗结核病时，最为临床医师所关注的是细菌产生的耐药性。因为结核分枝杆菌对治疗药物不可避免的产生耐药性，而影响肺结核病的治疗效果。以致成难治型肺结核。

简介：

简介：摘要：目的 探讨环介导等温扩增法（ LAMP）检测结核分枝杆菌的应用价值。方法 选取我中心 2019年 1月到 2020年 1月期间临床诊断为肺结核的 70例患者的痰标本，分别运用 LAMP法与荧光染色法涂片法进行检测，分析检验结果。结果 70例标本中， LAMP法与荧光染色法涂片法的阳性检出率分别为 45.71%（ 32/70）、 28.57%（ 20/70），与荧光染色法涂片法对比， LAMP法的灵敏度为 95%（ 19/20）、特异度为 76%（ 38/50），总体一致率为 81.43%（ 57/70）。两种方法一致性对比差异具有统计学意义（ P<0.05），两者一致性良好。在检测时间上，与涂片法相比，大批量标本检测中 LAMP法所用时间较短。结论 痰标本检测中， LAMP法阳性检出率优于荧光染色法涂片法，批量检测性好，具有较好的临床应用前景。

简介：摘要目的通过罗氏固体培养法,对环介导等温扩增技术(LAMP)和实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测痰结核分枝杆菌的优劣评价。方法选择临床经罗氏固体培养为阳性痰标本68份,阴性标本68份,分别采用LAMP和RT-PCR方法进行结核分枝杆菌检测结果，两者阳性检出率分别为88.2%.85.3%,两者差异没有统计学意义(P＞0.05);培养阳性标本经LAMP、RT—PCR检测结果灵敏度分别为91.2%和82.4%,两者差异没有统计学意义(P＞0.05);培养阴性标本经LAMP、RT—PCR检测结果的特异性分别为85.3%和88.2%,两者差异没有统计学意义(P＞0.05)。结论LAMP检测法阳性率高于RT-PCR法,但两者之间的差别尚无统计学意义,LAMP具有简单快速、准确,LAMP检测阳性标本灵敏度比RT-PCR好,LAMP检测阴性标本特异性稍低,LAMP具有简单、快速、准确,不需要昂贵的检验设备和严格的实验室设置，更适合基层结核病的实验诊断推广应用。

简介：结核病是严重危害人民身体健康的传染性疾病。耐药结核杆菌尤其是耐多药结核杆菌（MDR—TB）的出现和传播是导致结核病发病率升高的重要原因。结核杆菌无法通过质粒的介导从其他细菌获得耐药性，因此染色体介导的耐药是结核杆菌产生耐药的分子基础。目前对结核杆菌耐药机制的研究主要集中在药物作用靶位及相关基因的突变上。

简介：目的分析我所183株痰培养阳性菌株的耐药情况。方法采用药敏比例法对183株阳性菌株进行菌种鉴定及药物敏感性试验。结果共分离出174株结核分枝杆菌,且4种一线抗结核药物异烟肼（INH）、利福平（RFP）、乙胺丁醇（EMB）、链霉素（SM）的总耐药率为25.3%,耐多药率为8.0%。4种抗结核药物的耐药率由高到低依次为SM、INH、EMB、RFP。结论陕西省结核耐药情况仍较严重。