简介:摘要目的探讨ZNA (ZIP Nucleic Acid)探针的PCR性能及其在沙眼衣原体(CT)核酸定量检测中的研究。方法使用CT阳性质粒,比较偶联不同ZIP数量的ZNA探针的PCR扩增曲线差异;比较ZNA探针与29mer普通Taqman探针(DNA长探针)、20mer普通Taqman探针(DNA短探针)、MGB探针在PCR扩增曲线、反复冻融稳定性及低浓度质粒检出率的差异;使用CT阳性临床样本,比较ZNA探针与DNA长探针、DNA短探针、MGB探针扩增曲线差异及低浓度样本检出率的差异。结果(1)偶联5个ZIP单位的ZNA探针Ct值和荧光值最优,与偶联1个ZIP的探针相比:Ct值提升1.34 (灵敏度提升2.37倍),荧光值提升30%。(2)偶联5个ZIP的ZNA探针的扩增效率是优选的普通Taqman探针和MGB探针的2.14~2.64倍,荧光值高17%~90%。(3)四组探针冻融稳定性结果显示,ZNA探针的稳定性最佳,低浓度(1×104拷贝/mL)的Ct值偏离最小(CV%= 1.4),优于DNA长探针、DNA短探针、MGB探针(CV%= 1.7~3.7)。(4)用35例CT临床样本比较四组探针(DNA长探针、DNA短探针、MGB探针、ZNA探针)的PCR扩增性能,相对于其他三组探针,ZNA探针的扩增灵敏度分别提升1.60倍、0.99倍和1.06倍,且Ct值一致性分析结果显示,ZNA探针对临床样本的检出性能提升更优。(5)使用低浓度质粒模板(分别为200、100、50和10拷贝/mL)比较四组探针的扩增灵敏度,ZNA探针的检出率均优于DNA长探针、DNA短探针、MGB探针;在最低浓度10拷贝/mL时,其他三组探针的检出率只有15%~20%,ZNA探针仍有30%。(6)在20例不同低浓度(分别为200、150、100和50拷贝/mL)临床样本中ZNA探针检出率最高,分别为100%、95%、90%和70%。结论偶联5个ZIP的ZNA探针的扩增效率、荧光值、冻融稳定性、临床样本的扩增性能及低浓度样本检出灵敏度都优于普通Taqman探针和MGB探针,ZNA探针可作为一种设计灵活和合成易得的新探针技术,在基因表达领域可进一步提升检测的灵敏度及低浓度样本的检出率。
简介:摘要目的了解深圳市南山区性病相关门诊就诊人群生殖道沙眼衣原体(CT)感染的患病状况及其影响因素,为制定相关的防治策略提供依据。方法2018年4月1日至5月16日,通过对性病相关门诊就诊者的问卷调查人口社会学和临床诊疗信息,以及采集首段尿样本进行核酸扩增检测,判断CT感染状况。应用非条件Logistic回归模型进行CT感染影响因素的分析。结果深圳市南山区10个性病相关门诊共1 359名就诊者CT感染患病率为7.8%;单因素非条件Logistic回归分析提示,18~24岁年龄(OR=2.10,95%CI:1.06~4.48),单身(OR=1.93,95%CI:1.29~2.87),有临床症状(OR=1.56,95%CI:1.03~2.39)和淋病(OR=17.65,95%CI:5.53~60.59)是CT感染的危险因素;有医疗保险(OR=0.49,95%CI:0.33~0.74)是CT感染的保护因素。多因素非条件Logistic回归分析提示,淋病(aOR=14.41,95%CI:4.32~51.57)和有医疗保险(aOR=0.53,95%CI:0.33~0.85)分别是CT感染的独立危险因素和保护因素。结论淋病是CT感染的独立危险因素,对该人群开展主动筛查和干预将有利于CT感染的有效控制。
简介:摘要目的了解快速抗原检测(胶体金)对育龄妇女生殖道沙眼衣原体(CT)感染的诊断效果以及相关的影响因素。方法于2018年12月至2020年6月收集深圳市南山区7 936名育龄妇女的阴道拭子样本和尿液样本,应用快速抗原检测和核酸扩增检测法检测CT,以核酸扩增检测为标准,评价快速抗原检测的效果,同时检测拭子样本的念珠菌、线索细胞、阴道清洁度和尿液样本的尿潜血、尿蛋白和尿白细胞,分析与快速抗原检测结果相关的影响因素。结果7 936名育龄妇女的尿液样本核酸扩增检测检出CT感染269例(3.39%),拭子样本快速抗原检测检出CT感染69例(0.87%)。快速抗原检测法的灵敏度为16.73%,特异性为99.69%,阳性预测值为65.22%,阴性预测值为97.15%。单因素分析提示线索细胞检测阳性与CT快速抗原检测假阳性有关(P<0.05)。结论快速抗原检测诊断价值低,且结果假阳性与线索细胞检测阳性有关,临床医生可结合线索细胞检测结果判断,必要时进行核酸扩增检测。
简介:摘要目的评估实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)检测无创样本沙眼衣原体的性能。方法以罗氏Cobas® 4800CT/NG作为参照试剂,收集广西壮族自治区皮肤病研究所性病门诊就诊的男性患者尿液样本(248份)及女性患者阴道拭子样本(224份),评估SAT法检测沙眼衣原体的临床性能。结果最终有470份样本纳入统计。罗氏PCR检出阳性60例(12.8%),男性阳性数33例,女性27例;SAT检出沙眼衣原体阳性41例(8.7%),男性阳性数19例,女性22例。SAT试剂应用男性尿液检测的灵敏度为57.58%,特异性为99.06%;女性阴道拭子检测的灵敏度为81.48%,特异性100.00%。结论SAT试剂可以应用于无创样本,但是其应用尿液检测沙眼衣原体上还需要对尿液的核酸提取方法进一步的优化,提高其检测的灵敏性。
简介:摘要目的探讨用女性尿液检测沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)DNA和淋病奈瑟菌(neisseria gonorrhoeae,NG)DNA的临床意义。方法随机选取2019年1—6月性病科女性患者212例,每位患者取宫颈拭子做CT-DNA、NG-DNA、淋球菌培养,尿液做CT-DNA、NG-DNA。同时设置对照组30例。结果宫颈拭子CT-DNA阳性率为18.40%(39/212);尿液CT-DNA阳性率为19.81%(42/212),二者阳性率比较差异无统计学意义(χ2=0.14,P=0.71);宫颈拭子CT-DNA和尿液CT-DNA检测结果一致性好(Kappa=0.92,P<0.01)。淋球菌培养阳性率为5.19%(11/212),宫颈拭子NG-DNA阳性率为12.26%(26/212),二者阳性率比较差异有统计学意义(χ2=6.662,P=0.010);尿液NG-DNA阳性率为10.38%(22/212),与淋球菌培养阳性率相比,差异有统计学意义(χ2=3.976,P=0.046);宫颈拭子NG-DNA阳性率与尿液NG-DNA阳性率相比,差异无统计学意义(χ2=0.376,P=0.540)。宫颈拭子NG-DNA与尿液NG-DNA检测结果一致性好(Kappa=0.86,P<0.01)。结论用女性尿液检测CT-DNA、NG-DNA敏感性高、特异性好,取材方便,建议在临床普及。
简介:摘要目的了解深圳市性病相关门诊女性就诊者生殖道沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)感染现状及危险因素,为开展相关干预工作提供科学依据。方法招募2018年4月15日至5月16日深圳市22家医疗机构的5 742名女性就诊者作为研究对象,开展问卷调查,同时采集尿液样本进行CT和淋球菌检测。结果共调查5 742名女性就诊者,生殖道CT阳性率为8.3%(474例),淋球菌感染阳性率0.8%(47例)。多因素Logistic回归分析显示,年龄18~24岁(aOR=2.08,95%CI:1.34~3.25)、25~30岁(aOR=1.85,95%CI:1.25~2.73)、单身(包括未婚、离异及丧偶)(aOR=1.84,95%CI:1.40~2.42)、初中及以下文化程度(aOR=1.58,95%CI:1.17~2.15)、对CT感染不了解(aOR=1.76,95%CI:1.22~2.54)、淋球菌感染阳性(aOR=7.37,95%CI:3.73~14.56)为女性就诊者CT感染的危险因素。结论深圳市女性就诊者的CT感染率普遍较高,且与部分社会人口学因素相关。18~30岁、单身、文化程度偏低、对CT认知偏少以及合并淋球菌感染是深圳市性病相关门诊女性就诊者CT感染的危险因素。