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  • 简介:核受体是一类高度保守配体依赖性转录因子家族,在哺乳动物发育、繁殖、免疫应答、心血管功能、组织生长、肿瘤形成、外源物清除及糖类和脂质代谢等生理过程中发挥重要作用。机体对外源物质清除主要是由孕烷X受体等核受雄介导。孕烷X受体最早是作为外源物感受器而被研究,可以被大多数亲脂性药物等外源性化合物及一些内源性化合物如胆汁酸等结构差异很大配体激活,进而与视黄醇类X受体等形成异源二聚体,结合在ER6、XREM等DNA元件上,调控下游靶基因(包括一相代谢酶、二相结合酶及药物转运体等基因)表达。此外,孕烷X受体在能量代谢和免疫反应中也有重要作用,参与某些代谢疾病发生发展,且已在动物模型中被证明是Ⅱ型糖尿病、血脂异常、肥胖症和动脉粥样硬化等代谢疾病治疗有效靶标。我们主要就其发现、结构、组织分布、作用方式、自身表达调节等方面的最新研究进行综述。

  • 标签: 核受体 孕烷X受体 外源物代谢
  • 简介:用PCR技术获得抗菌肽-X基因、TNFα基因,与温度诱导表达载体pRC连接成为重组表达载体,导入大肠杆菌TG1,通过温度诱导表达重组蛋白.将重组质粒转入不同表达菌中进行表达,经SDS-PAGE选出EcoliBL21(DE3)为最佳表达宿主菌.培养后,离心得菌体,经超声破碎离心得包涵体,溶解后用CNBr切割并透析,最后经CM52纤维素柱分离纯化得到有活性高纯度抗菌肽-X.

  • 标签: 抗菌肽—X基因 克隆 大肠杆菌 表达
  • 简介:IbpA是小分子热激蛋白家族成员。IbpA和IbpB协同作用,与其他伴侣蛋白一起在热激反应中保护底物蛋白,消除凝集,产生重折叠,回复活性。概述了IbpA在热激反应中作用、ibpA基因表达调控和IbpA分子结构对其功能影响。

  • 标签: IbpA 小分子热激蛋白 热激反应
  • 简介:早在70年代,Anfinsen就提出蛋白质分子一级序列决定其空间结构论断,这一论断得到多次实验证实并被人们广泛接受,成为蛋白质结构预测理论基础。由于蛋白质分子结晶非常困难,因此蛋白质三维结构预测成为目前了解蛋白质结构信息重要手段,这一研究领域也成为蛋白质工程研究一个非常活跃方向。

  • 标签: 同源模建 蛋白质空间结构 蛋白质分子 蛋白质结构预测 目标蛋白 序列相似性
  • 简介:天冬氨酸蛋白酶是主要蛋白水解酶之一,广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。近年来,对植物天冬氨酸蛋白酶结构及功能研究有了一些进展。本文简要总结了植物天冬氨酸蛋白酶结构,典型植物天冬氨酸蛋白酶加工产生成熟过程,植物天冬氨酸蛋白酶在植物生物胁迫、非生物胁迫、种子萌发、有性生殖过程及植物衰老等方面的功能。

  • 标签: 天冬氨酸蛋白酶 结构与分类 加工机制 胁迫反应 有性生殖与衰老
  • 简介:利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达蛋白质直接送入细胞中.将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到特异作用于SV40启动子上9bp序列三锌指结构序列插入含有TAT蛋白蛋白质转导结构表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白表达载体pET-TAT-NLS-clone3.融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好纯化融合蛋白.

  • 标签: TAT 蛋白质转导结构域 SV40启动子 三锌指结构 融合蛋白 可溶性表达
  • 简介:锌指蛋白是一类具有手指状结构转录因子,对基因调控起重要作用。根据其保守结构不同,可将锌指蛋白主要分为C2H2型、C4型和C6型。锌指通过与靶分子DNA、RNA、DNA-RNA序列特异性结合,以及与自身或其他锌指蛋白结合,在转录和翻译水平上调控基因表达。我们简要综述了近年来锌指蛋白结构、分类及其与核酸及蛋白质相互作用等方面的研究进展。

  • 标签: 锌指蛋白 转录因子 结构 功能
  • 简介:蜘蛛丝是一类天然蛋白质纤维,具有独特机械性能(高强度、高弹性和高断裂功等)和卓著生物学特性(生物可降解性和与生物组织相容性等),在生物医学、材料、纺织和军事等领域都有着很高潜在应用价值。综述了不同蜘蛛丝蛋白模块结构特征及与其功能关系,扼要介绍了目前利用各种基因工程方法表达重组蜘蛛丝蛋白研究进展。

  • 标签: 蜘蛛丝蛋白 分子模块 结构和功能 重组表达
  • 简介:利用同源模建方法模拟得到了肝细胞生长因子4个Kringle域三维结构。结果表明,HGFKringle与纤溶酶原Kringle氨基酸序列具有较高同源性,其功能区附近序列比较保守。HGFKringlel和3与其它具有Lys结合功能Kringle相比,功能区残基发生了变化,可能丧失了结合Lys功能,而2和4仍具有一定该功能。根据Kringle1模建结构,推测该Kringle功能区结构为一个通道,该通道底部和一侧有部分疏水残基,同时两侧还分布着少量酸性或碱性残基,该通道可能具有结合特定肽链功能,从而与Kringle2一起实现HGF与受体结合作用。

  • 标签: 肝细胞生长因子 KRINGLE 三维结构 结构与功能关系
  • 简介:用Biosym公司开发计算机辅助分子设计系统模建了鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断三维结构。Fv是由重链可变区(Vh)和轻链可变区(Vl)两个结构域组成具有抗原结合能力最小抗体片断。先分别模建了Vh和Vl两个结构域,然后搭建出Fv片断整体三维结构,并对模建结构进行了分子力学和动力学优化。对结构合理性验证显示模建结构是合理。本研究为鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的人源化分子设计打下了基础。

  • 标签: 计算机辅助分子设计 同源模建 抗体Fv片断
  • 简介:溶栓疗法不仅已被常规地用于急性心肌梗死治疗,而且也已用于其它血栓病治疗中,如急性缺血性脑血栓、肺栓塞、急性周围动脉血栓等。尿激酶原是双链尿激酶单链前体,它主要激活纤维蛋白表面的纤溶蛋白原,所以具有选择性溶栓作用。临床结果表明它是一种安全有效溶栓药物,与t-PA、链激酶或尿激酶伍用均有协同作用。本文综述它了特性、结构与功能,以及它药代动力学和临床治疗效果。

  • 标签: 溶栓疗法 尿激酶原 结构与功能 药代动力学 临床效果
  • 简介:目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构原核表达载体并进行重组蛋白质原核表达和纯化。方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头RNA,用RT-PCR法分离SRK13-b基因;将编码SRK13-b激酶结构序列插入大肠杆菌表达载体pET-14b中,构建原核表达质粒pET-SRK13-bCT,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,经0.1mmol/LIPTG诱导,用Ni—NTA亲和层析柱对SRK13-b激酶结构域蛋白进行纯化。结果:分离获得羽衣甘蓝SRK13-b基因长度为2571bp,编码856个氨基酸,GenBank收录号为EU180597;对SRK13-b激酶结构域蛋白进行诱导表达及纯化,SDS—PAGE显示相对分子质量约43×10^3蛋白质特异表达,对表达产物进行分离纯化,获得了SRK13-b激酶结构融合蛋白。结论:羽衣甘蓝SRK13-b基因克隆及激酶结构原核表达,为研究SRK功能及自交不亲和性奠定了基础。

  • 标签: 羽衣甘蓝 自交不亲和 S13-b位点受体激酶 原核表达 纯化
  • 简介:目的:用生物信息学方法对沙丘芦苇胸腺嘧啶二磷酸葡萄糖脱水酶(PcTGD)序列进行分析与结构预测,为后续研究提供参考。方法:以GOR法预测了PcTGD二级结构,以ProtScale分析它疏水性,最终通过现有的序列同源性比较,用MODELLER预测了PcTGD三维结构。结果:PcTGD具有高度保守活性中心Tyr***Lys和N末端Gly*Gly**Gly高度保守结构。结论:PcTGD属于一个短链脱氢酶/还原酶家族。

  • 标签: 疏水性 短链脱氢酶/还原酶 二级结构 沙丘芦苇胸腺嘧啶二磷酸葡萄糖脱水酶
  • 简介:腺相关病毒(AAV,AdenoassociatedVirus)是一类线状单股DNA微小病毒。腺相关病毒因共具有定点整合(19q13qter)及非病原性等特点而在基因转移与治疗中可望作为较为理想载体。其在宿主染色体DNA上整合需要辅助病毒共转染。根据Cavalier-Smith线状SSDNA分子复制模式,即复制过程中3′OH端作为引物在DNA聚合酶作用下合成另一姊妹股DNA分子,然后共价地连接到亲代未折叠5′端回纹末端而进行DNA复制。本文

  • 标签: 腺相关病毒 ITRs NEOMYCIN 染色体基因 DNA 末端反向重复
  • 简介:本文作者已有的研究结果证明,完整的人干细胞生长因子(hSCGF)没有种属特异性,即可以作用于小鼠骨髓造血细胞.这一点与在Ca2+依赖糖识别结构域(CRD)缺失了78个氨基酸残基截短分子(hSCGFβ)有所不同.本研究从hSCGF全长cDNA中完全删除了CRD结构域编码序列,进一步探讨CRD结构生物学功能.由于该突变体序列GC含量较高,因此将该缺失突变体序列克隆在GST融合表达载体中进行融合表达.通过低温(28℃)诱导,表达产物主要以可溶蛋白形式存在.利用亲和层析纯化CRD结构域完全缺失hSCGF突变体融合蛋白,通过检测重组突变分子协同刺激造血活性有无改变来初步探讨CRD结构域在hSCGF分子中生物学功能.研究结果表明,去掉完整CRD结构突变分子仍然具有造血刺激活性.据此推断CRD结构域在hSCGF分子中可能对于受体配体结合起辅助作用.

  • 标签: 细胞生长因子 缺失突变体 Ca^2+ 结构域 糖识别 生物学活性
  • 简介:现代林业对于社会可持续发展,保持生态环境有着极为重要价值与意义,成为当今社会发展中十分重要方面。尤其是近几年来,随着我国经济社会不断发展,环境问题日益突出,林业建设与发展引起了国家和社会广泛重视。

  • 标签: 现代林业 生态环境 可持续发展 环境保护
  • 简介:母体胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)是蔗糖非发酵1/AMP活化蛋白激酶(Snfl/AMPK)家族中一个独特成员,是一种周期依赖性激酶。与家族其他成员不同,MELK并不参与代谢应激状态下细胞生存调控,而更多参与细胞周期、细胞增殖、肿瘤生成和细胞凋亡等过程。MELK在人体多种肿瘤中表达升高,与肿瘤预后密切相关。MELK在肿瘤干细胞中被异常激活,使肿瘤细胞获得生长、侵袭、迁移等能力,因此,MELK可以作为肿瘤治疗重要靶点。我们就MELK基因生物学功能、作用机制及其在肿瘤研究中进展做简要综述。

  • 标签: 母体胚胎亮氨酸拉链激酶 细胞周期 胚胎发育 肿瘤形成 靶向治疗