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  • 简介:摘要目的构建雌激素受体α配体结合域(ERα-LBD)表达载体,优化表达条件得到可溶ERα-LBD蛋白。方法在Addgene网站检索关键词ESR(雌激素受体,estrogen receptor),选择符合条件的质粒载体pcDNA-HA-ER WT(Addgene plasmid # 49498; http://n2t.net/addgene:49498; RRID:Addgene_49498),设计引物并扩增得到目的片段ERα-LBD,分别构建蛋白表达载体pET-28a-LBD和pGEX-4T1-LBD,改变诱导温度、异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱导时间对表达条件优化。待细菌裂解并提取蛋白后进行凝胶电泳,可在细菌上清的泳道中观察到明显的紫色蛋白表达条带,即为可溶ERα-LBD蛋白。结果pET-28a-LBD重组质粒未能表达重组蛋白ERα-LBD,重组质粒pGEX-4T1-LBD在Rosetta和BL21(DE3)感受态中以1 mmol/L IPTG诱导仅能得到包涵体;以0.2 mmol/L IPTG 16 ℃过夜诱导培养,则可得到可溶ERα-LBD蛋白。结论成功构建ERα-LBD表达载体并优化诱导表达条件,获得可溶ERα-LBD蛋白。

  • 标签: 雌激素受体α配体结合域 重组表达载体 条件优化 可溶性表达
  • 简介:BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统是一种快速、高效、便捷的表达系统.将人可溶CD14(sCD14)基因克隆入pFASTBAC1转移质粒中,重组质粒转化DH10BAC感受态细胞,目的基因通过同源重组插入BacmidDNA中,后者转染sf21昆虫细胞获得重组杆状病毒.利用重组蛋白C-末端的6×His@Tag,经TALON金属螯合色谱将重组病毒感染昆虫细胞获得的无血清培养上清--步纯化得到重组蛋白,计算表明从1L培养基中可纯化到约8mg纯度大于95%的重组sCD14蛋白,免疫印迹结果表明重组蛋白具有与抗6×His单抗和抗CD14单抗结合的抗原性.疑胶迁移实验和细胞活性实验表明重组sCD14蛋白能在体外与LPS结合,并能增强LPS诱导THP-1细胞产生细胞毒性因子.

  • 标签: CD14 细菌脂多糖 杆状病毒 昆虫细胞表达系统
  • 简介:本研究建立可溶人类白细胞抗原-Ⅰ类(sHLA-Ⅰ)检测方法,并探讨贮存血中sHLA-Ⅰ浓度变化的意义.采用ELISA双抗夹心法定量检测60例正常广东人血清中sHLA-Ⅰ水平和20例献血员成分血中sHLA-Ⅰ含量.结果表明:采用本技术时,可溶HLA-Ⅰ最低检测限为2.84ng/ml,批内变异系数为5.80%,批间变异系数为9.00%,回收率≥98.57%,广东人sHLA-Ⅰ平均值为(699.54±360.10)ng/ml.贮存28天的RBC和随机供者血小板的sHLA-Ⅰ的浓度明显高于其它成分血,并且与成分血中残存的白细胞数和贮存时间有关.结论:用ELISA法检测可溶HLA-Ⅰ灵敏、特异、稳定,在临床输血过程中可考虑选择性输注含有不同浓度可溶HLA-Ⅰ的成分血.

  • 标签: 可溶性人类白细胞抗原-I类 ELISA 成分血
  • 简介:复分解反应是化学反应中重要的反应类型之一,是初中化学的重点也是学习的难点,粗盐中可溶杂质的去除则是复分解反应的很好应用.以例题为例介绍了粗盐中可溶杂质的去除方法.

  • 标签: 粗盐 杂质 初中化学
  • 简介:摘要:Nanog蛋白能够维持胚胎干细胞的自我更新与多能性,是关键的转录因子。目前Nanog蛋白的体外生产形式主要通过微生物进行异源表达,为了能够高效制备可溶的人源Nanog蛋白,降低Nanog蛋白的应用成本,本研究通过分子克隆技术构建重组大肠杆菌,通过IPTG诱导来进行可溶的融合表达

  • 标签: Nanog 原核表达 蛋白质纯化 发酵优化
  • 简介:摘要目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清中可溶CD137的表达水平及其与病情严重程度相关性。方法选择HSP患儿46例作为研究组,健康儿童37例作为正常对照组,用ELISA法检测两组血清可溶CD137水平。用统计学分析两组血清中可溶CD137水平及其与病情严重程度的相关性。结果研究组血清可溶CD137水平显著高于正常对照组(P<0.05)。即与健康儿童对照组相比,HSP患儿血清中可溶CD137呈现异常高表达,且HSP患儿血清中可溶CD137含量与病情严重程度呈正相关。结论HSP患儿血清中可溶CD137水平显著升高及其与病情严重程度正相关,提示CD137可能参与了HSP的发生、发展。

  • 标签: 过敏性紫癜 CD137/CD137L 淋巴细胞
  • 简介:摘要:本文通过研究增加活性碳过滤器去除化工工艺凝液可溶TOC的可行性,并提出两种技改方案进行优缺点对比。最终通过确定技改方案解决生产问题。

  • 标签: 可溶性TOC 活性炭 过滤器 工艺凝液
  • 简介:传统的加工方法大多数是将魔芋精粉在碱性条件下加热,形成不溶性凝胶,然后经充分水洗,使这些杂质被中和或脱除。与此同时,魔芋葡甘露聚糖(KGM)由可溶膳食纤维变成不溶性膳食纤维(ISDF),从而大大降低了它的保健功能。本文研究了用酒精对魔芋精粉提纯去杂的工艺条件,得到了KGM含量较高、杂质含量较低的纯化粉。然后对纯化粉进行碱液溶解处理生产可溶膳食纤维饮料。

  • 标签: 魔芋精粉 酒精 提纯去杂 可溶性膳食纤维饮料 碱液溶解处理
  • 简介:用碱性硅酸盐处理裸皮后再进行中和,裸皮就获得了足够的稳定性,可以进行削里操作。得到的皮屑未被改性,基本上是天然的。此外,使用这种硅酸盐,可促进皮对此后加入的皮化材料的吸收。尤其是铬鞣剂。此天然革屑可作混合肥料使用或作其它用途.这有助于制革厂应对日益严厉的固体废渣的处理要求。基于此新成果得出了改进可持续发展的总概念。

  • 标签: 制革生产 可溶性硅酸盐 天然革屑 混合肥料 废渣处理 环境保护
  • 简介:摘要因为现代城市建设经济的理念转型,针对城市居民身体健康与生态环境的协调越发被引起关注,其中针对于油漆工程中可溶铅元素含量的危害更是被推到了风口浪尖,在这种环境中许多油漆厂家在建筑市场中受到经济损失更是难以估量,只有采取有效且科学的可溶铅含量检测技术确保相应行业的平衡统筹,稳定城市居民使用的安全,才能够重新营造现有市场环境的平衡。本文依据现有油漆中可溶铅含量的特点进行技术检测分析,具备一定实际意义。

  • 标签: 油漆 可溶性铅含量 技术检测
  • 简介:固体颗粒密度的测量有着各种各样的测量方法,由于有些物质易溶于水,有的物质具有吸水性,特别是有些不规则的小颗粒状固体小而溶于水,给测量物质的体积带来了困难.本文中提出了一种测量物质密度的新方法,把传统实验的液体换成气体,利用理想气体状态方程,即可测量出可溶、吸水性物质的体积,特别是可以测量小颗粒易溶于水固体颗粒的体积.测出物质的体积后,利用托盘天平秤量出物质的质量,既可以求出不规则固体颗粒的密度.本实验装置成本低,操作简单,实验现象明显.

  • 标签: 固体颗粒 可溶性物质 吸水性物质 理想气体状态方程 密度
  • 简介:摘要:聚酰亚胺(PI)是一类具有优异综合性能的聚合物材料。PI 的主链包含芳香环和酰胺, 导致形成 pi-π、 p-π 和其他共聚系统之间的分子链, 有助于电子的极化和电荷转移到系统中, 本文分析了可溶联苯聚酰胺的合成和表征作为参考。

  • 标签: 聚酰亚胺 可溶性 合成 两步法
  • 简介:摘要目的构建肝脏及淋巴结窦内皮细胞C型凝集素糖基识别结构域(LSECtin-CRD)双半胱氨酸(Cys)突变体原核表达载体,获得LSECtin-CRD突变体蛋白,并鉴定其生物学活性。方法基于LSECtin-CRD的三维结构模型选择突变位点;通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对LSECtin-CRD基因引入Cys点突变,构建pET28b-Tat-LSECtin-CRD突变体载体;IPTG诱导可溶表达LSECtin-CRD突变体蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白质表达水平;亲和层析方法对突变体蛋白进行纯化;通过检测突变体蛋白的甘露糖和GlcNAc结合能力鉴定其生物活性。结果菌液PCR和测序结果表明LSECtin-CRD双Cys突变体G205C-A227C和G205C-D279C原核表达载体构建成功,SDS-PAGE结果显示两个突变体蛋白均实现高效可溶表达,单糖结合试验结果显示两个突变体蛋白均具有良好的生物学活性。结论本研究获得了具有生物学活性的LSECtin-CRD双Cys突变体蛋白,为进一步研究LSECtin-CRD结构和功能关系提供实验依据。

  • 标签: LSECtin-CRD 原核表达 突变体 糖基结合
  • 简介:摘 要:为了能够显著提升膳食纤维的摄入量,并推广麦麸在面粉中的使用,本文将以麦麸为研究对象,通过调整可溶和不溶性膳食纤维的比例,构建膳食纤维-淀粉混合体系,并研究其对流变特性及消化特性的作用机制。研究发现,麦麸中的可溶(SDF)和不溶性膳食纤维(IDF)对小麦淀粉性质的影响是不同的,尤其是麦麸中的水溶性膳食纤维对小麦淀粉性质的影响更为显著。

  • 标签: 麦麸 可溶性膳食纤维 不溶性膳食纤维 小麦淀粉
  • 简介:摘要目的探讨细菌性感染性心内膜炎(infectious endocarditis,IE)术后辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)相关因子、可溶细胞间黏附分子1(soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)、凝血功能的表达及其意义。方法选取2016年12月至2018年12月首都医科大学附属北京安贞医院心脏外科手术治疗且符合纳入标准的IE患者进行前瞻性分析,38例IE患者作为观察组;选取同期健康体检者30名为对照组。采用双抗夹心酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定两组血清Th17相关因子[白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)及白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)]、sICAM-1及凝血功能指标[可溶P-选择素(P selectin,sP-SLT)]浓度,并对两组间相关指标的浓度差异进行统计学分析比较。结果观察组患者术前血清IL-1β、IL-6、IL-17及IL-21浓度[(29.88±6.49)、(14.89±3.31)、(21.89±3.01)、(563.26±67.36) ng/L]显著高于对照组[(16.56±4.11)、(7.52±2.34)、(12.91±1.01)、(423.38±56.49) ng/L],差异有统计学意义(t值分别为10.30、10.74、17.20、49.48,P均<0.05)。观察组术前血清sICAM-1、sP-SLT浓度[(1 247.57(581.39,1794.66) μg/L、(60.29±6.61) mg/L]显著高于对照组[(837.28(405.68,954.47) μg/L、(27.37±5.56) mg/L],差异有统计学意义(Z=12.37、t=22.30,P均<0.05)。术后感染性心内膜炎患者血清IL-1β、IL-6、IL-17及IL-21浓度[(16.19±4.07)、(7.73±2.40)、(13.83±0.94)、(425.33±52.12) ng/L]较术前[(29.88±6.49)、(14.89±2.31)、(21.89±3.01)、(563.26±67.36) ng/L]均显著降低,差异有统计学意义(t值分别为11.02、13.25、15.76、9.98,P均<0.05)。术后感染性心内膜炎患者血清sICAM-1、sP-SLT1浓度[(901.46(472.15,1 276.58) μg/L、(30.70±5.31) mg/L]较术前[(1 057.26±463.06) μg/L、(60.29±6.61) mg/L]显著降低,差异有统计学意义(Z=11.16、t=21.51,P均<0.05)。结论在IE患者中Th17相关因子、sICAM-1及sP-SLT呈高浓度表达,同时术后上述因子浓度降低,提示以上因子可能作为辅助诊断、评估IE患者病情及预后的相关因子。

  • 标签: 感染性心内膜炎 Th17相关因子 可溶性细胞间黏附分子1 凝血功能
  • 简介:生产技术指标的控制是浸渍纸生产企业的关键控制工序,对生产质量的影响较大,特别是"可溶树脂"指标的波动较频繁,不易控制,更是关键中的关键。文章综述了浸渍实际生产过程中可溶指标的一些控制细节,对一些主要的影响因素和必要的应对措施进行了总结。

  • 标签: 可溶性 浸渍
  • 简介:摘要:实验室用水质量的好坏直接影响到分析结果,可溶硅含量是一、二级水的重要指标,执行GB/T6682《分析实验室用水规格及试验方法》,该方法中可溶硅含量的分析时间需

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  • 简介:美国PPG公司的一个产品管理部一全面服务解决方案公司日前推出一种新型可溶喷漆生产线磨料“清洁逻辑DA1”,这将成为该公司“清洁逻辑”喷漆生产线维护产品和服务中的一部分。

  • 标签: 美国PPG公司 喷漆生产线 可溶性 磨料 产品管理 逻辑
  • 简介:摘要可溶髓样细胞触发受体-1(solubletriggeringreceptorexpressedonmyeloidcell-1,sTREM-1)是髓样细胞触发受体-1(triggeringreceptorexpressedonmyeloidcells-1,TREM-1)的可溶形式。TREM-1是免疫球蛋白超家族受体中的成员,主要表达于中性粒细胞、噬细胞与成熟单核细胞的表面。

  • 标签: 可溶性髓系细胞触发受体-1 炎症疾病
  • 简介:目的探讨抽动秽语综合征(TS)患者疾病过程中免疫损伤的相关机制。方法应用抗脑抗体(ABAb)、抗核抗体(ANA)、可溶白介素-6受体(sIL-6R)及可溶gp130(sgp130)的ELISA方法商品试剂盒,检测患者和正常人血清中sIL-6R、sgpl30及相应抗体的含量。结果TS组血清sIL-6R、sgp130含量显著高于正常对照组(44.078±15.777):(30.290±9.048),P〈0.01;(69.032±24.604):(47.309±14.137),P〈0.01);TS患儿血清ABAb、ANA检出率显著高于对照组(66.7%:3.6%,P〈0.01;53.3%:25%,P〈0.05)。且ABAb水平与sgpl30负相关(r=-0.451,P=0.046)。结论在TS患者血清中sIL-6R、sgp130水平显著增高表明依赖IL-6信号传导的生理功能上调和反馈抑制的网络机制启动;自身免疫相关的损伤机制参与了疾病发生发展的病理生理过程。

  • 标签: 抽动秽语综合征 抗脑抗体 抗核抗体 可溶性IL-6受体 可溶性GP130