简介：目的探讨经鼠尾静脉移植的骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）对大鼠痛风肾的影响，具体为延缓上皮到间叶组织转化（EMT）、促进肾脏细胞分化和生长，以及抗氧化应激等方面的作用。并进一步研究其相应的机制。方法幼年雄性Wistar大鼠随机分为正常组和造模组，造模组采用腺嘌呤200mg/（kg?d）灌胃4周制作痛风肾大鼠模型，造模成功24h后，造模组再次被随机分为3组，分别为磷酸盐缓冲液模型组和BM-MSCs治疗组，BM-MSCs治疗组经鼠尾静脉移植入骨髓间充质干细胞（BM-MSCs是经密度梯度离心法结合贴壁筛选法在体外分离培养而成），同时磷酸盐缓冲液（PBS）模型组经鼠尾静脉注入相同量的PBS。注射6周后，收集大鼠的血液和尿液标本用来测定血肌酐、尿素氮和24h尿蛋白含量；对大鼠肾石蜡标本切片进行H-E染色、糖原染色和马松染色，观察并半定量评分评价各组肾病理情况；免疫组织化学法测定大鼠肾石蜡标本切片中的转化生长因子β1（TGF-β1）的表达水平，Western-Blot法测定肾组织中P38蛋白、P-P38蛋白、硫氧还蛋白还原酶1（TrxR1）的表达情况。数据经过正态性及方差齐性检验后，正常组和造模组两两比较采用LSD-t检验，3组之间比较采用单因素差分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。结果经腺嘌呤诱导制作的痛风肾大鼠相比正常组大鼠出现明显的肾功能降低，大量蛋白尿以及肾间质和肾小管尿酸结晶沉积，肾间质纤维化、炎症细胞浸润、肾小管上皮细胞坏死、肾小球硬化等，提示痛风肾模型制造成功，并出现了慢性肾功能衰竭；BM-MSCs治疗组较PBS模型组而言，血肌酐水平降低［（88.90±7.89）μmol/Lvs.（117.40±6.13）μmol/L］，尿素氮降低［（7.85±0.88）mmol/Lvs.（10.97±1.03）mmol/L］，24h尿蛋白减少［（27.72±4.90）mgvs.（54.66±6.72）mg］，TGF-β1表达减少［（11.00

简介：

简介：目的探讨体外培养大鼠骨髓间充质干细胞的可行性,分析其部分表型特点,为细胞移植治疗中枢神经系统疾病奠定基础.方法采用贴壁筛选法分离纯化大鼠MSCs,进行培养,传代扩增,免疫组化鉴定细胞是否表达具有干细胞特性的标记抗原-神经巢蛋白(nestin),并用流式细胞仪进行荧光检测初步鉴定.结果分离后的MSCs出现增殖性生长,免疫组化显示巢蛋白(nestin)表达阳性,经流式细胞仪检测显示CD44,CD90阳性,CD45阴性.结论在体外可培养出较大丰度大鼠骨髓间充质干细胞,而且此方法简单易行.

简介：运动创伤的修复是运动医学临床实践研究的热点与难点.伴随再生医学的发展,干细胞治疗技术已然成为修复运动创伤的新策略,尤其是脂肪间充质干细胞（adiposederivedmesenchymalstemcells;ADSC）由于其自身微创、大量获取等优势备受青睐.本文主要介绍了当前ADSC在运动损伤研究领域的几大热点问题,并通过对近年实验及临床研究成果的总结,为ADSC在临床实践中的应用提供理论支持.

简介：脂肪间充质干细胞（Adipose-DerivedStemCells，ADSC）是来源于脂肪组织的多能干细胞，具有自我更新和多向分化能力，并能分泌多种生物活性因子，在组织损伤、修复方面蕴含着广阔的应用前景。近年来，ADSC在抗皮肤老化方面的作用也被证实。本文就ADSCs在皮肤抗皱、美白、促进毛发再生、增强组织修复能力等方面的研究现况进行综述。

简介：终末期肝病的治疗十分棘手，原位肝移植一直被认为是最理想的方法，但由于缺乏供体、费用昂贵、手术风险大、手术后存在免疫排斥反应等因素限制了其广泛应用。自1999年以来，Petersen等、Theise等和Alison等的研究相继指出，骨髓干细胞能够在鼠肝内转化成为肝卵圆细胞甚至成熟的肝细胞和胆管细胞，并证明了在接受过骨髓移植或肝移植的患者体内这种现象也同样存在。随后，大量实验研究结果证明，BM—MSCs无论在动物体内、体外还是人类都可以在适当的条件下分化为成熟的有功能的肝细胞，并能改善肝损伤机体的肝功能，这为终末期肝病的治疗提供了新的思路。

简介：摘要目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对慢性胰腺炎大鼠的治疗作用及其机制。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组及被膜下治疗组、门静脉治疗组、尾静脉治疗组五组，每组均10只。治疗后取胰腺组织分别行病理检查，并进行PKH26、Pax4、Ngn3基因，表面标记物PKH26＋/Pax4＋，PKH26＋/Ngn3＋双阳性及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、白细胞介素(IL)-10的表达水平检测。结果治疗组大鼠胰腺病理学评分及纤维化程度评分均低于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)，三个治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组胰腺组织中PKH26，Pax4，Ngn3的表达高于模型组及空白对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)，而三个治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组可见PKH26＋/Pax4＋，PKH26＋/Ngn3＋双阳性表达，且三个治疗组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)；治疗组α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白的表达水平低于模型组，IL-10的表达水平高于模型组，差异均具有统计学意义(均P<0.05)，而三个治疗组之间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论BMSCs对慢性胰腺炎大鼠胰腺损伤有修复作用，其机制可能与BMSCs定植归巢于受损胰腺、诱导分化为胰系细胞，并通过旁分泌作用抑制炎症反应有关。

简介：摘要：目的 分离培养经血来源间充质干细胞 (Menstrual Blood-Derived Mesenchymal Stem Cells， MenMSCs)，检测胚胎干细胞转录因子 (octamer-binding transcriptionfactor- 4， Oct4）的表达。方法 通过密度梯度离心和差速帖壁法分离间充质干细胞，体外传代培养，通过倒置相差显微镜观察细胞的粘附、生长情况。取对数生长期的细胞在酶标仪 450nm波长处检测吸光度值，绘制细胞生长曲线 ，有限稀释法观察克隆形成，免疫细胞化学方法检测干细胞表面标志的表达。结果 经血间充质干细胞在体外培养体系中增殖迅速，免疫细胞化学染色Oct4、 CD44阳性。结论 经血间充质干细胞增殖能力强，具有成体干细胞和胚胎干细胞的特性。

简介：摘要：近年来，随着我国科技实力的不断增强，骨组织工程飞速发展，为骨修复带来了全新的期盼。骨髓间充质干细胞是骨组织工程中的种子细胞，通过诱导骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞能够有效治疗骨关节炎、软骨缺损等疾病，由于骨髓间充质干细胞在分化过程中不仅涉及众多信号通路，并且还会受到蛋白质、药物、RNA以及基因等多种因素的影响，因此，为进一步提升骨髓间充质干细胞在科学研究和临床中的应用效果，本篇文章将依据国内外的相关研究，对骨髓间充质干细胞成软骨分化机制的研究进展展开综述。

简介：摘要：近年来，随着我国科技实力的不断增强，骨组织工程飞速发展，为骨修复带来了全新的期盼。骨髓间充质干细胞是骨组织工程中的种子细胞，通过诱导骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞能够有效治疗骨关节炎、软骨缺损等疾病，由于骨髓间充质干细胞在分化过程中不仅涉及众多信号通路，并且还会受到蛋白质、药物、RNA以及基因等多种因素的影响，因此，为进一步提升骨髓间充质干细胞在科学研究和临床中的应用效果，本篇文章将依据国内外的相关研究，对骨髓间充质干细胞成软骨分化机制的研究进展展开综述。

简介：摘要：手术和药物治疗是宫腔粘连目前常用治疗手段，但每种治疗方法均有局限性，临床上不断探索新的治疗方法，间充质干细胞属于研究的热点，这种细胞为多能干细胞，能实现自我更新与多向分化能力，可用于多种疾病的治疗，近年有研究将上述细胞用于治疗宫腔粘连。本文对间充质干细胞治疗宫腔粘连的研究进展作综述。

简介：摘要目的探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）对肝星状细胞（HSC）的直接接触调节作用。方法建立HSC及BMSC共培养系（共培养组），共培养72 h后通过流式细胞术分离细胞，采用Western blot分别检测共培养组HSC中Notch通路相关受体（Notch1、Notch2、Notch3及Notch4）及BMSC中Notch相关配体（Dll1，Dll3，Dll4，Jag1及Jag2）的表达情况，以单独培养HSC及BMSC为对照组。两组蛋白表达比较采用t检验。结果共培养组中Notch1表达量为1.85±0.34，明显高于对照组的0.98±0.25（t=4.235，P<0.05）；而Notch3表达为0.40±0.12，明显低于对照组的1.00±0.08（t=-7.971，P<0.05）；Notch相关配体Jag1表达为2.03±0.30，明显高于对照组的0.99±0.13（t=6.386，P<0.05）。结论BMSC可能通过Jag1结合Noch1以直接接触机制调控HSC。

简介：目的：骨髓间充质干细胞（bonemesenchymalstemcells，BMSCs）具有向多种组织分化的潜能，在多种疾病的治疗取得了很大的进展。在缺血性心脏疾病中，BMSCs能明显改善心脏的功能。本研究的目的为BMSCs是否能够对心肌细胞的电生理产生影响。方法：共培养大鼠BMSCs和新生乳鼠心肌细胞；采用冠状动脉前降支结扎建立大鼠心肌梗塞模型；

简介：摘要目的研究体外培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)在特定的条件下诱导分化为成骨细胞。方法从骨髓血中提取MSCs，在含10%胎牛血清，地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基培养的DMEM培养基中培养，放免法检测骨钙蛋白。比色法检测碱性磷酸酶、vonKossa法钙结节染色。结果MSCs诱导培养后碱性磷酸酶、钙结节、骨钙蛋白表达明显增强。结论MSCs在一定条件下能诱导分化为成骨细胞，能作为骨组织工程的种子细胞应用于临床治疗。

简介：摘要钙化防御病罕见且死亡率高，因皮肤缺血坏死和感染导致剧痛，尚缺乏有效治疗方法。常发生在终末期肾病（ESKD）患者，又称钙化性尿毒症性小动脉病（CUA），组织学特征是真皮微血管钙化、内膜纤维增生和微血栓形成。本文创新性运用人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）多学科再生治疗1例34岁尿毒症女性患者，其臀部、双下肢广泛进行性溃疡，伴剧痛和恶臭分泌物，皮肤病理符合钙化防御病。患者因常规治疗无效，经医院伦理委员会批准行hAMSCs抢救性治疗，包括静脉和局部肌内注射、创面外敷hAMSCs培养上清液。患者的皮肤和软组织再生，血生化、炎症、矿物质和骨代谢指标、免疫功能紊乱好转。患者的视觉模拟疼痛量表治疗前为10分、治疗15个月为0分；Bates-Jensen伤口评价量表治疗前为65分、治疗15个月为13分；伤口生活质量调查问卷治疗前为68分、治疗15个月为0分。hAMSCs治疗CUA具有良好的应用前景，机制可能与抑制血管钙化、促进新生血管和皮肤软组织再生修复、抗炎及免疫调节等有关。

简介：目的建立可行的人骨髓间充质干细胞（humanmarrowmesenchymalstemcells,hMSCs）的培养方法,并对其生物学特性进行初步研究。方法于2013年1月—2014年6月采用密度梯度离心法和贴壁法分离培养hMSCs,用免疫组织化学（免疫组化）法鉴定表面标志并分析其核型,光镜观察其生长和形态变化。结果本实验分离的hMSCs纯度高、贴壁好,以长梭形为主,至少在传代培养6代内增殖快,性状稳定。免疫组化染色显示hMSCs表达CD29和CD44,不表达CD45及CD34,核型正常。结论密度梯度离心法可获得增殖活跃且纯度较高的hMSCs,有特征性表型,适合体外较长期的培养hMSCs。

简介：目的:研究miR-34a对人颌骨骨髓间充质干细胞(hOBMSCs)成骨分化的影响。方法:实时定量RT-PCR检测miR-34家族在hOBMSCs成骨诱导过程中的表达情况;采用碱性磷酸酶及茜素红染色检测miR-34a对于hOBMSCs成骨分化能力的影响;Westernblot检测hOBMSCs成骨分化过程中miR-34a对于成骨相关蛋白的影响,同时检测hOBMSCs在正常培养条件下miR-34a对于DKK1蛋白表达的影响;双荧光素酶报告基因检测miR-34a与DKK1的靶向关系;通过裸鼠皮下成骨实验检测miR-34a对于hOBMSCs体内成骨的影响。结果:在hOBMSCs成骨诱导过程中,miR-34家族的miRNA表达量均显著上升(P<0.05),其中miR-34a最为明显;过表达miR-34a可显著提高hBMSCs的体外成骨能力;miR-34a可以负向调节DKK1,同时双荧光素酶报告基因实验证实DKK1为miR-34a的靶基因;体内实验同样证实miR-34a可以促进hOBMSCs的成骨分化。结论:miR-34a可能通过抑制DKK1的表达,促进hOBMSCs的成骨分化。

简介：【目的】研究人骨髓间充质干细胞（humanbonemarrowstromalcells，hBMSCs）治疗大鼠脊髓损伤的可行性。【方法】从人的骨髓中分离、培养骨髓间充质干细胞。制作大鼠脊髓半横断模型，按照试验分组分为单纯损伤组和hBMSC移植组。术后按照不同时间点评价损伤和移植后的大鼠运动功能。6周后处死大鼠，分别观察两组大鼠损伤区域血管生长情况、营养因子表达情况以及移植细胞的轴突生长情况。【结果】免疫荧光检测发现，移植后6周，病变部位产生新轴突，hBMSCs移植组比单纯损伤组有更多的神经丝蛋白（neurofilaments，NF）的信号。透射电镜检查发现hBMSCs组有大量的新生轴突和血管。单纯损伤组中，仅检测到极少量的新轴突生长。采用Real-timePCR检测脊髓组织里的神经营养因子，显示移植hBMSCs可以使脊髓组织中神经营养因子的表达增加。移植hBMSCs后脊髓组织转录神经营养因子3（neurotrophin-3，NT-3）与血管内皮生长因子，（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的mRNA量在移植术后第2、3周明显高于单纯损伤组。移植hBMSCs的大鼠的BBB评分从损伤后第1周至第8周都比单纯损伤组大鼠的评分高，二者具有统计学差异。在损伤后的第4、6周所做的运动诱发电位结果表明，移植hBMSCs得大鼠的潜伏期与对照组相比明显缩短。【结论】hBMSCs具有促进神经功能恢复作用，其机制可能为hBMSCs在体内促进营养因子和VEGF表达和分泌，进而促进轴突再生和血管生成，使损伤的神经功能更好地恢复。

简介：目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)信号通路抑制剂SB431542在体外对人牙龈间充质干细胞(hGMSCs)增殖及成骨分化能力的影响。方法:组织块法原代培养hGMSCs,采用流式细胞术检测表面标志物,然后给予不同浓度(0、0.1、1、10μmol/L)SB435142处理,CCK-8及流式细胞仪分别检测增殖活性及凋亡比例;成骨培养基分组诱导培养21d后,进行茜素红染色,检测成骨分化;hGMSCs给予1μmol/LSB431542处理,采用Westernblot检测成骨诱导过程中的成骨相关蛋白的表达及TGF-β信号通路信号分子的变化。结果:原代培养的hGMSCs高表达CD105、CD90和CD73,而阴性表达CD14、CD34、CD19、CD45和人类白细胞DR抗原(HLA-DR)。与对照组相比,各处理浓度SB431542并不引起hGMSCs凋亡率的明显改变(P>0.05)。而10μmol/LSB431542作用于hGMSCs第7天时,细胞增殖能力较对照组降低(P<0.05)。1μmol/LSB431542能显著增加hGMSCs矿化结节的形成(P<0.05),且在成骨诱导11d后,Runt相关转录因子2、碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原蛋白表达明显高于对照组及空白组(P<0.05)。成骨诱导30、60min时,SB431542处理组的TGF-β信号通路下游Smad3信号分子磷酸化水平明显被抑制(P<0.05)。结论:SB431542可能通过抑制成骨分化过程中Smad3的磷酸化水平来诱导hGMSCs体外成骨。

简介：摘要目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对糖尿病视网膜病变(DR)模型大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的影响及对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的调节作用。方法取SPF级8周龄SD雄性大鼠45只，采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射联合高糖高脂饮食建立DR大鼠模型，期间每周测量大鼠空腹血糖(FBG)和体质量，采用眼底血管造影观察视网膜血管走行和渗漏情况。将40只建模成功大鼠按照随机数字表法随机分为模型组和hUC-MSC注射组，每组20只；另选取20只正常大鼠腹腔注射等量柠檬酸缓冲液并常规饲养，作为对照组。hUC-MSC注射组玻璃体内注射hUC-MSC，对照组和模型组玻璃体内注射等量磷酸盐缓冲液(PBS)。采用荧光金(FG)逆行示踪标记RGCs观察存活RGCs数目；采用苏木精-伊红染色观察视网膜病理学变化；采用TUNEL法观察RGCs凋亡情况；采用Western blot法检测视网膜组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达量。结果未造模大鼠FBG维持在正常水平，体质量随时间逐步增长，视网膜血管走行正常，无荧光素渗漏；造模大鼠FBG维持在较高水平，体质量增长缓慢，且于造模2周开始随着病程延长，体质量逐渐下降，视网膜远端血管发生扭曲，可见毛细血管荧光素渗漏，渗漏面积较大。对照组、模型组和hUC-MSC注射组RGCs密度分别为(2 136.10±215.17)、(849.40±167.82)和(1 549.20±183.26)个/mm2，总体比较差异有统计学意义(F＝115.218，P<0.01)；模型组和hUC-MSC注射组RGCs密度明显低于对照组，hUC-MSC注射组RGCs密度明显高于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组视网膜结构清晰，层次分明，RGCs形态完整，数目较多；模型组RGCs数量明显减少，出现核固缩，RGC层变薄萎缩；hUC-MSC注射组视网膜结构较完整，RGCs数较模型组多。对照组、模型组和hUC-MSC注射组RGCs凋亡率分别为(2.16±1.11)%、(43.47±2.26)%和(20.75±2.18)%，总体比较差异有统计学意义(F＝445.159，P<0.01)；模型组和hUC-MSC注射组RGCs凋亡率明显高于对照组，hUC-MSC注射组RGCs凋亡率低于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、模型组和hUC-MSC注射组视网膜组织Bax、Bcl-2和p-p38MAPK蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F＝30.982、12.526、73.158，均P<0.01)；模型组和hUC-MSC注射组Bax和p-p38MAPK蛋白相对表达量明显高于对照组，Bcl-2蛋白相对表达量明显低于对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；hUC-MSC注射组Bax、p-p38MAPK蛋白相对表达量明显低于模型组，Bcl-2蛋白相对表达量明显高于模型组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组p38MAPK蛋白相对表达量总体比较，差异无统计学意义(F＝1.182，P＝0.322)。结论hUC-MSC玻璃体内注射可抑制DR模型大鼠RGCs凋亡，保护视网膜结构，其可能是通过抑制p38MAPK信号通路发挥抗细胞凋亡作用。