简介：目的：从细胞水平探讨柔红霉素（DNR）和阿糖胞苷（Ara-C）联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）（DAG方案）能否提高抗肿瘤效果,并研究相应的作用机制。方法：以白血病细胞株HL-60为实验对象,分为DA方案组、DAG方案组和对照组3组。对照组不加任何药物;DA方案组为DNR加Ara-C;DAG方案组为DNR加Ara-C和G-CSF（G-CSF先于化疗药物前24h加入）。药物作用24、48h后收集细胞,对各组分别进行细胞计数、细胞形态观察,并采用MTT法检测不同组别细胞株的生长抑制率,采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡比例、细胞坏死比例。另对HL-60细胞单用G-CSF作用24h后进行细胞周期分析,并行实时定量PCR以检测细胞内Ara-C相关代谢酶基因表达情况的变化。结果：化疗药物作用后,相对于对照组,DAG方案组与DA方案组细胞数量明显减少,形态显示有明显细胞核固缩现象,且可见凋亡小体形成。DAG方案组与DA方案组相比,前者细胞生长抑制率更高（作用48h,为78.3%比72.1%）（P〈0.01）。细胞凋亡分析显示,与DA方案组相比,DAG作用24h后早期凋亡百分率增高（9.43%比7.52%）,且差异有统计学意义（P〈0.05）;作用48h后,2组早期凋亡比例均下降。与对照组相比,DAG方案组与DA方案组细胞坏死百分率在药物作用24h和48h后均显著增高（DAG方案组分别为44.16%和57.59%;DA方案组分别为41.54%和58.22%）,但2组间差异无统计学意义。相对于作用前,G-CSF单独作用HL-6024h,细胞周期分析显示,S期细胞比例增高[（39.91±1.16）%比（31.42±1.47）%]（P〈0.05）;实时定量PCR检测,细胞内Ara-C代谢酶中脱氧胞苷激酶（DCK）的基因表达增高,5′-核苷酸酶（5′-NT）基因表达减少,差异有统计学意义（P〈0.05）,而CDD的基因表达差异无统计学意义。结论：G-CSF联合DA方案能显著提高对HL-60细胞株生长的抑制率,其作用机制主要为促肿瘤细胞坏死,轻度促细胞凋�

简介：目的观察柑橘提取物诺必擂停对白血病细胞株K562、HL-60增殖的抑制作用。方法采用MTF法检测诺必擂停对细胞增殖的抑制率，电镜下观察细胞的形态变化。结果诺必擂停对白血病细胞株K562、HL-60的增殖有显著的抑制作用。电镜下可见细胞凋亡的形态学表现。结论柑桶提取物诺必擂停能够明显抑制白血病细胞株K562、HL-60的体外增殖，其机制与诱导K562、HL-60的凋亡有关。

简介：为了研究二烯丙基二硫化物（diallyldisulfide，DADS）对白血病HL-60细胞株VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白分泌的作用，并从影响VEGF生成的角度探讨DADS的抗白血病机制，应用ELISA法检测药物作用前后白血病HL-60细胞培养上清液中VEGF蛋白的含量；RT-PCR法检测药物作用前后白血病HL-60细胞VEGFmRNA的相对含量。结果表明：HL-60细胞中均有VEGFmRNA的表达和VEGF蛋白的分泌；与空白对照相比，DADS3个浓度组（0，625，1，25，2，5μg／ml）作用HL-60细胞48小时和72小时均能下调HL-60细胞VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌（P〈0.01）。3个浓度组间差异显著（P〈0．01），其下调HL-60细胞VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌效果与浓度相关（r〉0.9，P〈0．01）。结论：DADS可能通过抑制VEGFmRNA的表达及VEGF蛋白的分泌发挥抗白血病效应。

简介：摘要目的研究人急性白血病细胞株(HL-60)上清液对人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcell,HUVECs)血管形成能力的影响。方法以单独培养HUVECs为对照组,以HUVECs加HL-60细胞培养上清为实验组。采用MTT比色法分别在24h、48h、72h检测两组中HUVECs的吸光值；采用RT-PCR技术检测两组中HUVECs周期蛋白E（cyclinE）mRNA及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达情况。结果实验组与对照组相比HUVECs增殖速度加快，72小时后差异有显著性意义（p〈0.05）。72小时后,实验组中HUVECsCyclinEmRNA及VEGFmRNA表达明显增加，与对照组相比差异具有显著性意义（p〈0.01）。结论HL-60细胞培养上清液能够增强HUVECs的血管形成能力。

简介：目的：研究柔红霉素（Daunorubicin,DNR）对人急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞株HL-60细胞中干扰素调节因子1（IRF1）-mRNA、干扰素调节因子8（IRF8）-mRNA、干扰素调节因子9（IRF9）-mRNA表达的影响。方法将HL-60细胞株设为HL-60组、HL-60＋DNR组,同时取3例正常人外周血白细胞为NC组。HL-60组为未加药处理组,HL-60＋DNR组为小剂量DNR持续作用HL-60细胞10d。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法检测IRF1-mRNA、IRF8-mRNA、IRF9-mRNA转录水平,每组实验重复3次。结果与NC组相比,IRF1-mRNA、IRF8-mR-NA转录水平在HL-60组显著下调（P〈0.05）,而HL-60＋DNR组显著上调（P〈0.05）；与NC组相比,IRF9-mRNA转录水平在HL-60＋DNR显著上调（P〈0.05）,在HL-60组则表现为下调,但无统计学差异（P〉0.05）。结论DNR可上调HL-60细胞中的IRF1、IRF8、IRF9表达水平。APL经DNR治疗后,可能通过上调IRF1、IRF8、IRF9的表达诱导白血病细胞的凋亡,促进其成熟,促进病情的缓解。

简介：含砷药物在传统中药中用于治疗多种疾病,其中雄黄近年来被用于治疗急性早幼粒细胞白血病,其疗效与三氧化二砷制剂相近,但安全性相对较高。在雄黄纳米微粒诱导的HL-60细胞（人早幼粒白血病细胞）分化早期,细胞内活性氧水平降低p38MAPK抑制剂（SB202190）增强雄黄的诱导分化作用,而线粒体膜通透性转运孔抑制剂（环孢菌素A）减弱雄黄的诱导分化作用。这些实验结果表明,雄黄诱导的HL-60细胞分化与细胞内活性氧水平的降低和线粒体膜通透性转运孔的开放密切相关。该研究为探索含砷抗白血病药物的分子机制提供了新的线索。

简介：摘要目的探讨由载体介导的靶向hTERT基因的RNAi技术对白血病HL-6细胞hTERT基因和细胞增殖的影响。方法用已经构建好的表达针对hTERT基因siRNA的质粒载体，经转染试剂RNAi-Mate转染HL-60细胞；以空质粒、转染试剂及空白组作对照，将转染后24h、72h、120h的细胞作为三个实验组，用RT-PCR检测细胞hTERT基因mRNA的表达，MTT检测细胞增殖活性。结果三个实验组HL-60细胞hTERTmRNA表达水平低于各对照组，细胞增殖活性抑制率高于各对照组（P＜0.05），实验组组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；三个对照组组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论载体介导的靶向hTERT基因的RNAi技术能在体外抑制HL-60细胞hTERT基因的表达，抑制细胞增殖。

简介：摘要目的HL-60细胞用经典方法不容易培养成树突状细胞（DC）,需探索一种有效获取HL-60细胞源性DC的方法,为APL复发及MDR的免疫治疗提供新的策略。方法HL-60细胞株在完全培养基中培养,以GM-CSF、IL-4、TNF-α等共处理,只在实验组加用卡介苗和ATRA。观测细胞形态，检测DC免疫表型、上清夜IL-12水平测定，观察MLR反应。结果使用卡介苗和ATRA后获得了具有较明显树突状突起的细胞，DC表型CD83为(29.46±2.67)%、CD80为（65.23±4.65)%、CD86为(56±3.76)%、HLA-DR为(27.87±3.64)%及CD1d为(30.11±3.92)%,均明显升高(p<0.05),上清液IL-12水平为(182.44±11.96pg/ml),亦明显升高(p<0.05)，并具有明显的MLR反应。结论利用ATRA联合卡介苗可以成功地诱导HL-60细胞为成熟DC，其CD1d表达明显增高，推测可能参与NKT细胞激活,具体机制需进一步研究。

简介：目的前期研究表明，膜型TNF-α较分泌型TNF-α具有更强和更广的细胞毒作用，本研究拟进一步研究两型TNF-α介导胞毒效应的差异。方法采用对两型TNF-α反应性不同的HL-60为靶细胞；MTT法检测两型TNF-α对HL-60的胞毒活性；RT-SSCP法检测p53基因；通过检测荧光素酶报告基因表达水平，反映NF-kB活性的变化。结果TM-TNF可以有效杀伤HL-60，S-TNF则不能。S-TNF诱导HL-60的NF-kB活性升高，TM-TNF则不能诱导HL-60的NF-kB活性升高。同时我们发现HL-60细胞的p53基因是突变的。结论HL-60细胞对S-TNF胞毒作用耐受，对TM-TNF敏感；此种差异可能在于TM—TNF能够有效抑制NF-kB的激活，进而下调突变p53基因，最终导致其抗凋亡效应减弱，杀伤效应增强，其具体机制有待深入研究。

简介：目的研究姜黄素与阿霉素联合应用对人白血病多药耐药细胞系HL-60／ADR耐药性的逆转作用。方法采用MTT法测定药物的体外杀伤作用，应用金氏公式进行联合用药效果分析。应用流式细胞术分析细胞周期和测定细胞内药物浓度。结果姜黄素2．00μmol／L～16．001μmol／L，阿霉素0．801μmol／L～6．401μmol／L同时给药对HL-60／ADR细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果，对HL-60／ADR细胞周期的影响也有协同作用，HL-60／ADR细胞内ADR积聚增加是其原因之一。序贯给药法中先给姜黄素后给阿霉素结果为协同作用，先给阿霉素后给姜黄素为拮抗作用。结论姜黄素与阿霉素同时联合用药可产生协同作用，有效逆转多药耐药。序贯联合用药仅产生单向协同作用。

简介：为了探讨血管内皮生长因子(VEGF)在恶性血液病中的作用,以恶性血液细胞系HL-60和Raji为实验对象,应用RT-PCR及ELISA法检测肿瘤细胞.VEGF基因的表达,并采用免疫组织化学染色法测定细胞表面VEGF受体Flt-1的表达.结果显示:髓性白血病细胞系HL-60和淋巴瘤细胞系Raji中均存在VEGF-mRNA的表达.在培养48小时后,HL-60细胞和Raji细胞的培养上清液中VEGF含量明显高于正常人外周血单个核细胞.VEGF-R(Flt-1)在两种肿瘤细胞的胞膜上均有表达,而正常人外周血单个核细胞上无表达.这一结果表明,白血病和淋巴瘤细胞具有产生VEGF的能力,并可将VEGF分泌到细胞外基质微环境中.VEGF可作用于白血病和淋巴瘤细胞本身,在恶性血液肿瘤细胞中存有VEGF的自分泌途径,而VEGF的自分泌成为血液肿瘤细胞高侵袭性生物学特性的基础.结论:抑制VEGF的分泌将有助于阻断其与内皮细胞间的互动环,降低其增殖、抗凋亡和侵袭性能,对提高肿瘤细胞对化疗的敏感性也将十分有意义.

简介：本研究探讨人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（hrsTRAIL）单用或联合阿糖胞苷（Ara—C）诱导HL-60细胞凋亡作用及其机制。在体外以人类急性白血病细胞株HL-60为研究对象，分5组进行细胞培养：对照组、Ara—C组、rsTRAIL组、同时给药组（Ara—C＋rsTRAIL）、先后给药组（Ara—C→rsTRAIL）。采用MTT比色法测定细胞生长抑制率；应用AnnexinV／PI染色和流式细胞术检测细胞凋亡率；使用流式细胞术检测不同浓度的Ara—C对细胞表面DR5表达水平的影响及rsTRAIL单药组、先后给药组细胞表面DR5表达水平和细胞内caspase-8活性。结果表明：rsTRAIL能抑制HL-60细胞生长并诱导HL-60细胞凋亡。先后给药组诱导HL-60细胞凋亡率大于同时给药组。先后给药组细胞表面DR5表达水平和细胞内caspase-8的活性高于rsTRAIL组。5mg／L、10mg／LAra—C作用于HL-60细胞24小时，其细胞表面DR5表达水平升高，大于对照组。结论：rsTRAIL抑制HL-60细胞生长．诱导HL-60细胞凋亡。Ara—C上调HL-60细胞表面DR5表达水平。增强rsTRAIL诱导HL-60细胞凋亡的作用。Ara—C和rsTRAIL联合用药时，在先加Ara—C、再加rsTRAIL组诱导HL-60细胞凋亡的效果比同时给药组效果好，其机制可能与Ara—C上调细胞表面DIL5表达水平和（或）增强细胞内caspase-8的活性有关。

简介：Theeventsofcelldeathandtheexpressionofnuclearmatrixprotein(NMP)havebeeninvestigatedinapromyelocyticleukemiccelllineHL-60inducedwithetoposide.BymeansofTUNELassay,thenucleidisplayedacharacteristicmorphologychange,andtheamountofapoptoticcellsincreasedearlyandreachedmaximunabout39%aftertreatmentwithetoposidefor2h.NucleosomalDNAfragmentationwasobservedaftertreatmentfor4h.ThemorphologicalchangeofHL-60cells,thus,occurredearlierthantheappearanceofDNAladder.Totalnuclearmatrixproteinswereanalyzedby2-dimensionalgelelectrophoresis.Differentialexpressionof59nuclearmatrixproteinswasfoundin4hetoposidetreatedcells.Westernblottingwasthenperformedonthreenuclearmatrixacssociatedproteins,PML,HSC70andNuMA.TheexpressionofthesuppressorPMLproteinandheatshockproteinHSC70weresignificantlyupregulatedafteretoposidetreatment,whileNuMA,anuclearmitoticapparatusprotein,wasdownregulated.Theseresultsdemonstratethatsignificantbiochemicalalterationsinnuclearmatrixproteinstakeplaceduringtheapoptoticprocess.

简介：ＴＨＥＳＴＵＤＩＥＳＯＦＲＥＶＥＲＳＡＬＯＮＩＮＨＩＢＩＴＩＮＧＤＮＡＳＹＮＴＨＥＳＩＳＡＮＤＣＬＯＮＡＬＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＨＬ－６０ＣＥＬＬＳＷＩＴＨＨＹＰＥＲＴＨＥＲＭＩＡＣｈｅｎＸｉｅｑｕｎ；ＳｈｅｎＳｕｙｕｎ；ＨｕＳｈｅｎｇｈｕｉ；ＷｕＢ...

简介：本研究旨在探讨曲古菌素A(trichostatinA,TSA)高效低毒的抗癌机理.应用细胞培养、MTT法,免疫细胞化学技术和Annexin-V-FITC/PI双标流式细胞术观察TSA对HL-60细胞和正常人外周血单个核细胞(normalhumanperipheralbloodmononuclearcell,NPBMNC)的生长抑制,组蛋白乙酰化水平以及诱导凋亡的影响.结果表明:TSA能够以时间、剂量依赖性方式抑制HL-60细胞增殖,36小时IC50为100ng/ml.TSA能够诱导HL-60细胞凋亡,其作用也呈时间、剂量依赖性.TSA在显著诱导HL-60细胞凋亡的浓度和时间范围内对NPBMNC无明显的诱导凋亡作用.TSA处理4小时后,HL-60细胞和NPBMNC组蛋白乙酰化水平上调显著高于未用TSA各组(P<0.05),但两者之间无显著性差异(P>0.05).结论:TSA对HL-60细胞有明确的抑制增殖能力;TSA有明确的诱导HL-60细胞凋亡的能力,这可能是TSA体外抑制白血病细胞系HL-60生长和发挥抗白血病作用的主要机理之一;与NPBMNC相比较,TSA能够选择性诱导HL-60细胞凋亡;TSA选择性抑制HL-60细胞的机理与TSA调控HL-60细胞和NPBMNC组蛋白乙酰化水平的差异无关.

简介：本研究旨在探讨白血病细胞中nucleostemin（NS）基因下调对其非依赖p53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR的相关分子表达的影响.通过重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至p53缺失型HL-60细胞以干扰NS基因的表达.用Real-timePCR技术评价转染后HL-60细胞NS基因的表达情况并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关分子水平表达的变化.结果表明：重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见GFP荧光水平较高,大于80％.Real-timePCR结果显示,NS基因mRNA的抑制率在HL-60细胞中为56.5％;干扰NS的表达后PI3K、AKT和GβL基因mRNA表达量分别为0.491±0.084、0.398±0.164、0.472±0.097,下调明显,与空白对照组（分别为1.002±0.171、1.000±0.411、1.001±0.206）比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：在HL-60细胞中PI3K/AKT/mTOR通路相关分子的变化与NS基因的下调呈正相关,两者的关联性为证明PI3K/AKT/mTOR信号通路可能是NS的一种非依赖p53作用途径提供了依据.

简介：目的：观察三氧化二砷（As2O3）对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法：不同浓度As2O3处理HL-60细胞,应用MTS/PES方法检测细胞增殖,NBT实验测定细胞分化,流式细胞术检测细胞凋亡和分化相关抗原CD11b的表达,SYBRGreenreal-timeRT-PCR方法检测C-FES、BCL-2、BAX、Survivin、P21和P27mRNA水平变化。结果：As2O3能明显抑制HL-60细胞增殖,其效应呈剂量依赖和时间依赖性（r=-0.967;r=-0.954）;低浓度（0.1、0.5和1.0μmol/L）As2O3能明显促进细胞分化,NBT阳性率和CD11b表达水平均有不同程度的增高;较高浓度As2O3（2.5和5.0μmol/L）能明显诱导细胞凋亡,抑制细胞分化。HL-60细胞经1.0和5.0μmol/L浓度As2O3处理后,C-FESmRNA表达均明显上调,但以1.0μmol/L组更为明显,证实C-FESmRNA表达水平与细胞分化程度成正比。此外,5.0μmol/L浓度As2O3显著下调了HL-60细胞BCL-2和Survivin的表达,相反明显上调了BAX、P21和P27的表达。结论：As2O3能明显抑制HL-60细胞增殖、促使细胞分化成熟及诱导细胞凋亡,其机制可能涉及C-FES以及细胞周期和凋亡相关基因的调控。

简介：Objective:TodetecttheeffectofarsenictrioxideorATRAonAPLcellsorHL-60cellsandtoinvestigatethemechanismofthehyperleukocytosisanddetectthecrossresistancebetweenATRAandarsenictrioxide.Methods:Thenumberofpromyelocytesormorematuredgranulocyteswerecountedbyregularmethod,MTTtestwasusedtomeasuretheproliferationofHL-60cellsorAPLcells,flowcytometryanalysistomeasuretheapoptosis,NBTmethodtodetectthedifferentiationofHL-60cellsorAPLcells.Results:TheproliferationofprimaryAPLcellsorHL-60cellscouldbeinhibitedinvitrobyeitherarsenictrioxideorATRA,whichcouldinduceobviousapoptosisorobviousdifferentiationofprimaryAPLcellsorHL-60cells.InhibitionofproliferationorapoptosisofATRAresistantHL-60cellswereachievedbyexposuretoarsenictrioxideinvitro.Ontheotherhand,theresultsofinvivotreatmentshowedthatarsenictrioxidealsoinduceofhyperleukocytosis.Conclusion:TheresultsindicatedthatthehyperleukocytosisinducedbyATRAisnotcontributedtothemechanismofmoredifferentiationthanapoptosis,therewasnotcrossresistancebetweenATRAandarsenictrioxide.

简介：摘要目的探讨左旋—二脱水伊地醇双甲磺酸酯(DMDAI-L)对HL-60细胞Bax蛋白表达的影响。方法通过免疫细胞化学法和westernblot分别测定不同剂量DMDAI-L对HL-60细胞的Bax蛋白的表达情况。结果免疫细胞化学法定性实验结果显示药物干预后HL-60细胞Bax阳性表达高于正常对照组；westernblot结果显示不同浓度药物（2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml）干预HL-60细胞48h后，Bax蛋白相对表达(0.59±0.02、0.90±0.09、1.07±0.03)，正常对照组为（0.32±0.03）;各给药组与正常对照组比较均有统计学意义（p<0.05）。结论DMDAI-L诱导HL-60细胞凋亡过程中，其作用机制可能与上调Bax蛋白表达有关。

简介：目的:研究L-门冬酰胺酶脂质体对体外培养的人早幼粒细胞白血病(HL-60)细胞活性的影响.方法:MTT测定L-门冬酰胺酶脂质体的抗肿瘤活性,电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响,流式细胞仪检测药物对肿瘤细胞周期的影响.结果:L-门冬酰胺酶脂质体(经前体脂质体水合而得)组与肿瘤细胞作用后,HL-60细胞的G0/G1期细胞量明显增加,而进入S期的细胞明显减少.增殖指数L-门冬酰胺酶脂质体组的PI值显著下降.HL-60细胞凋亡比例显著增多.结论:L-门冬酰胺酶脂质体抑制HL-60细胞的繁殖,可能与抑制细胞的S期有关.