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  • 简介:目的:构建一种能结合钛表面的载药纳米粒及钛-载药纳米复合材料组装和性质研究。方法:(1)多巴胺修饰非离子表面活性剂多巴胺-泊洛沙姆188(Dop-Poloxamer188)合成和检测;(2)Dop-Poloxamer188作为表面活性剂、PLGA作为油相基质,制备纳米粒及纳米粒载药和表征;(3)钛片预处理及钛片与修饰后纳米粒结合;(4)纳米粒修饰后钛表面的表征。结果:新合成Dop-Poloxamer188在285nm左右有紫外吸收峰,说明多巴胺成功修饰在Poloxamer188两端;Dop-Poloxamer188能和PLGA制备出很好纳米粒,平均粒径在110nm左右,PDI小于0.1;多巴胺修饰纳米粒与钛片通过简单浸渍过程结合后,通过水接触角、场发射扫面电镜(Fe-SEM)、荧光显微镜、X射线光电子能谱(XPS)等仪器检测都显示多巴胺修饰纳米粒成功且牢固修饰在钛片表面。结论:成功达到钛表面的载药纳米粒修饰目的,为钛种植体载药系统提供了新思路和方法。

  • 标签: 多巴胺 泊洛沙姆188 纳米粒
  • 简介:最近科学家首次发现了基底细胞癌细胞起源,并揭示了导致这种侵袭性肿瘤生长系列事件。基底细胞癌是最常见一种皮肤癌症。我们皮肤通过不断更新来保持健康,死细胞会脱落并被新细胞所替代。该过程靠干细胞形成祖细胞维持,祖细胞能够分裂并分化形成具有完整功能皮肤细胞。而祖细胞还需要一小群干细胞来支持,通常情况下干细胞会保持静默,当皮肤受到损伤时候就会活跃起来促进皮肤修复。

  • 标签: 干细胞 皮肤癌 正元 黑化 祖细胞 细胞起源
  • 简介:目的:研究细菌内同源重组法构建靶向Survivin腺病毒载体及其体外扩增表达。方法:将survivin基因克隆至穿梭质粒载体中,特异性酶切后回收、连接、转化,构建负载survivin片段重组腺病毒载体。提取重组病毒基因酶切鉴定后,包装成病毒,并扩增到所需滴度。行Westernblotting鉴定,观察重组腺病毒载体在真核细胞表达。结果:(1)重组穿梭质粒MluI酶切鉴定结果显示,酶切结果均与相应载体及目的片段大小相符合,基因测序结果基本一致。(2)凝胶电泳产生了两条大约15kb和8.5kb片段,由图2可知重组腺病毒质粒酶切充分完全,且回收率较高。(3)重组腺病毒载体转染AD293细胞24h后已出现细胞病变效应,病变细胞细胞核变大。(4)D260/OD280值为1.92,表明重组腺病毒纯度较高。(5)AD293细胞病毒上清中有能与抗Survivin单抗反应蛋白,其相对分子质量与理论值相吻合,阴性对照组无对应条带出现。结论:本方法成功构建表达了含Survivin重组腺病毒载体,为进一步进行Survivin基因功能研究提供了实验基础和理论支持。

  • 标签: 细菌内同源重组法 SURVIVIN 腺病毒载体
  • 简介:α7nAChR是配体门控离子通道蛋白超家族典型代表,烟碱型乙酰胆碱受体一个重要亚型,是复杂五聚体跨膜蛋白,介导Na^+、Ca^2+流入,K^+流出,尤以对Ca^2+通透性高。α7nAChR分布广泛且功能多样,不仅分布于中枢和外周神经系统,介导神经元快速突触传递,其在许多非神经元细胞和组织中亦有表达,包括内皮细胞,支气管上皮细胞,皮肤角蛋白细胞,膀胱上皮细胞,血管平滑肌等,并参与其功能调节及功能障碍相关疾病病理生理过程,如可调节细胞质运动和细胞间黏附,细胞增殖,血管生成以及肿瘤侵袭和迁移。本文主要介绍烟碱型乙酰胆碱受体α7亚型在不同胚层来源上皮组织细胞中表达及其功能特征,以期通过激活或抑制α7nAChR表达来降低与其密切相关疾病发生率。

  • 标签: 非神经性胆碱能系统 烟碱型乙酰胆碱受体 α7 NACHR 上皮细胞 功能特征
  • 简介:阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)是一种慢性进行性神经变性疾病,早期临床表现为近期记忆力下降,后来逐渐发展为生活不能自理最终死亡。目前,有许多种假说阐述其发病机制,如β-淀粉样蛋白、载脂蛋白E、一些金属元素、炎症因子等,但都不全面,也有人认为其可能与朊蛋白有关。部分药物被用于治疗AD,如美金刚、胆碱酯酶抑制剂等,但疗效均不显著。一些新治疗理念和方法也逐渐被发现,如脑源性神经生长因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)以及免疫疗法等,但其远期疗效还需进一步证实,且一些副作用还并未被人们所知晓。本文主要对阿尔茨海默病发病机制及药物治疗研究进展进行了综述。

  • 标签: 阿尔茨海默病 发病机制 药物治疗 研究进展
  • 简介:人口老龄化及其伴随各种疾病已成为全球性健康问题,细胞外基质在老化过程中发生变化及对机体产生影响逐渐成为研究衰老热点。在机体发育和衰老过程中,细胞外基质不仅可以为细胞提供结构支架、组织连接,调节实质细胞形态、增殖、分化、代谢、迁移等生理活动,并且其本身组成成分、合成、代谢、重构等变化也会对机体各系统功能产生深刻影响,具体表现为骨骼肌僵硬、左心室功能受损、神经突触传导抑制等。本文通过介绍机体在衰老过程中,运动、循环、神经等系统细胞外基质变化及相关机制最新研究进展,从非细胞角度探讨老化机制,了解衰老过程。

  • 标签: 细胞外基质 老化 机制
  • 简介:最近报道称某些肉类蛋白质对你来说并不好,德州农工大学生态农业研究学院科学家发现,食用充足优质蛋白质对人类生长、发育和健康是至关重要

  • 标签: 优质蛋白 FOOD 生长 人类 健康 发育
  • 简介:目的:探索蔗糖酯类超声造影剂制备方法,并研究其造影效果。方法:采用声振法制备蔗糖酯类造影剂,将F68和SE-5按一定质量比称取配置微泡包膜材料,以微泡浓度为指标进行制备优化,将F68和SE-5按1:1质量比称取,将其配置成乳状液置入声振仪,以不同超声功率(200W、400W、600W及800W),不同声振时间(30s、60s、90s、120s、150s、180s、210s、240s、270s及300s)进行声振处理。将F68和SE-5分别按6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、2:1、3:1及4:1质量比称取制成乳状液,选择最佳声振功率与声振时间,筛选最佳溶液配比。选用优化条件下制备微泡,观察兔肝脏造影效果。结果:蔗糖酯类造影剂最佳制备条件为:泊洛沙姆188(PluronicF68)和蔗糖酯-5(SE-5)配比为2:1,声振仪功率为600W,声振持续时间为240s。注射造影剂后兔肝脏超声造影图像清晰,回声强度明显增强。结论:通过优化制备工艺,制备出蔗糖酯类微泡浓度及直径均符合超声造影要求,具有良好显影效果。

  • 标签: 蔗糖酯 泊洛沙姆 六氟化硫 微泡 超声造影剂
  • 简介:目的:制备壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒。方法:首先利用课题组发表专利合成帕米膦酸修饰Brij78新型非离子表面活性剂(Pa-Brij78),然后以壳聚糖(CS)溶液为水相,Pa-Brij78为乳化剂,E-Wax为油相,采用微乳法,利用修饰帕米膦酸基团与壳聚糖分子链中质子化氨基交联反应原理,通过一系列实验条件探索,确定了最佳实验工艺条件,成功制备了壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒。通过动态光散射(DLS)粒径仪测定了纳米粒粒径大小和Zeta电位;透射电子显微镜(TEM)对CS-Pa-Brij78-SLNs形貌结构进行了表征。结果:实验结果显示,制备壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒最佳条件为:pH=6.0,壳聚糖浓度分别为0.1%,0.2%;反应温度65℃,反应时间40min,在该条件下,制备壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒(CS-Pa-Brij78-SLNs)粒径分别为97.9±6.6nm和182.4±62.2nm,表面电位分别为(+5.21±1.4mV);(+7.94±0.80mV),装载姜黄素时,载药量为10%,包封率在90%以上,透射电镜下观察其形态圆整,清晰可见壳聚糖包裹电晕。结论:本文以壳聚糖(CS)溶液为水相,合成新型非离子表面活性剂Pa-Brij78为乳化剂,E-Wax为油相,采用微乳化法,经过最佳实验条件探索,通过一步法成功制备了稳定壳聚糖和帕米膦酸双修饰固体脂质纳米粒(CS-Pa-Brij78-SLNs)。

  • 标签: 壳聚糖 微乳化 固体脂质纳米粒 药物载体
  • 简介:目的:外泌体是活细胞分泌来源于多囊泡体膜性囊泡,其主要作用包括携带与运输。雪旺细胞是周围神经再生中非常优秀种子细胞,但其迁移能力较差,影响修复效果.本文旨在探讨外泌体和雪旺细胞共培养是否可以促进雪旺细胞迁移.方法:本实验通过分离纯化人脐带干细胞外泌体和大鼠坐骨神经雪旺细胞并鉴定,随后将其共培养于Transwell小室观察雪旺细胞迁移率.结果:通过人脐带干细胞超高速离心法得到外泌体高表达干细胞标志物CD44(92.2±3.6%)、CD73(99.1±0.6%),并且低表达单核细胞表面抗原CD14(0.5±0.06%)以及造血千细胞表面抗原CD34(0.4±0.07%),外泌体鉴定高表达CD81和CD9;雪旺细胞培养鉴定纯度达(92.3±2.7)%;均符合实验要求。通过Transwell小室实验发现外泌体可以明显促进雪旺细胞迁移,并且具有一定剂量关系:结论:外泌体可以提高雪旺细胞迁移能力,从而使雪旺细胞在组织工程领域中应用产生巨大突破.

  • 标签: 外泌体 人脐带间充质干细胞 雪旺细胞 神经再生
  • 简介:Dpl是第一个经过鉴定类朊蛋白。称为叠朊蛋白。对其分子结构、分布情况,生物学功能,已经有所了解。Dpl蛋白在Prp基因敲除小鼠(Prnp^0/0或Prnp^-/-)表现出神经毒性。以及在Prnd基因敲除小鼠表现出对雄性小鼠可育性重要性,使其具有很大研究价值。本综述对Dpl最新研究进展进行了总结,便于进一步研究工作进行。

  • 标签: DOPPEL 进展 生物学功能 细胞凋亡 雄性不育
  • 简介:营养因素对家禽免疫具有重要作用。糖是家禽必须重要营养元素之一,不仅是维持家禽正常生长、繁殖、生产不可缺少组成成分与营养物质,也是调节家禽免疫器官、组织和免疫应答反应不可缺少物质基础。本文就多糖对家禽免疫器官发育、体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫、细胞因子产生影响等方面进行了综述。为指导家禽生产实践提供合理依据。

  • 标签: 多糖 家禽 免疫
  • 简介:目的:肿瘤多药耐药现象会显著降低肿瘤细胞内药物浓度,本研究通过制备抗肿瘤多药耐药靶向给药系统来逆转肿瘤耐药性以提升细胞对药物敏感性,从而降低该现象对癌症治疗阻碍。方法:本文使用乳化溶剂挥发法制备以含姜黄素两亲性嵌段共聚物载体、以紫杉醇和磁性粒为核心抗肿瘤多药耐药纳米粒,使用透射电镜和动态粒径散射仪等对纳米粒进行表征和磁响应性测试后,使用MTT法测定纳米粒对肿瘤耐药细胞MCF-7/ADR抑制率以探究给药系统耐药逆转性能。结果:制备抗肿瘤多耐药纳米粒粒径为105nm左右,磁响应性良好。所制得载紫杉醇纳米粒包封率为74.74%,载药率为12.40%。纳米粒可以通过磁场和生物素受体介导作用促进肿瘤细胞对粒子内化,以增加抗癌药物蓄积。与游离紫杉醇相比,逆转细胞耐药指数达8.5。结论:纳米系统在维持自身稳定性同时,能够凭借协同作用和靶向作用较大程度提升药物对耐药肿瘤细胞杀伤效果。

  • 标签: 纳米粒 抗肿瘤 靶向性 逆转耐药
  • 简介:目的:研究多肽JFT合成工艺。方法:本实验采用固相合成法(spps),以Fmoc-氨基酸为原料,TBTU/HoBt/DIEA混合试剂缩合。用三氟乙酸\苯甲硫醚\巯基乙醇\苯酚\水脱保护,将多肽从MBHA树脂上切割下来。结果:粗肽收率为62%,经RP-HPLC纯化,即可获得纯度在98%以上目标肽。经MALDI—MS质谱分析其分子量与理论值一致。结论:此工艺操作简单,便于推广,适合大规模生产。

  • 标签: 固相合成多肽 Fmoc-氨基酸 Rink—Amide—MBHA树脂 分离纯化
  • 简介:2013年9月NatureCommunications报告了吃糖造成肥胖症和代谢综合症一个新机制。这项工作表明。葡萄糖在肝脏中向果糖代谢转化,是小鼠在由葡萄糖诱导肥胖症、胰岛素抗性和脂肪肝形成中一个关键步骤。

  • 标签: 肥胖症 果糖 通讯 自然 胰岛素抗性 葡萄糖
  • 简介:C/EBPs增强子结合蛋白是核转录因子,其作用范围广泛,既参与正常生理代谢过程,又与多种疾病发生和发展相关,其作用方式多样,对转录有正、负调控作用。C/EBPβ是其第二位成员主要通过对靶细胞基因转录调节,参与细胞增殖与分化、肿瘤发生与凋亡等重要生命活动;其功能受到蛋白酶降解、磷酸化、蛋白质相互作用等多种途径调控。本文就C/EBPs调控机理及其与肿瘤关系综述如下。

  • 标签: C/EBP增强子结合蛋白β 肿瘤 磷酸化
  • 简介:目的:探讨医学模拟教学结合以问题为导向(PBL)教学模式在重症医学教学中应用价值。方法:选取2015年1月-2017年1月在我院重症医学科轮转实习五年制医学生64人作为研究对象。按随机数字表法将64名医学生分为PBL组(n=32)和结合教学组(n=32)。PBL组采用PBL教学,结合教学组采用医学模拟结合PBL教学。分别在入科时和轮转实习结束时对两组学员进行理论考试和技能操作考核,记录成绩并比较。理论考试和技能操作考核后采取发放问卷进行调查形式获得学员对教学效果主观评价。结果:轮转实习结束时,两组理论考试分数差异无统计学意义(P〉0.05);而结合教学组技能操作考核成分数显著高于PBL组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。两组学员在教学方法接受度高、学习兴趣提升、自学能力提升和临床诊疗水平提高所占比例差异无统计学意义(P〉O.05);结合教学组学员在团队协作能力提高、沟通能力与人文关怀提高和技能操作水平提高所占比例高于PBL组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:与单独PBL教学相比较,医学模拟教学结合PBL教学模式应用于重症医学教学对学员技能操作掌握有更好效果,同时能提高学员团队协作能力、沟通能力以及对患者的人文关怀,且受到学员认同与喜爱,应在重症医学教学实践中逐步完善并进一步推广应用。

  • 标签: 医学模拟教学 以问题为导向的教学 教学模式 重症医学
  • 简介:目的:检测人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA表达状况及构建pcDNA3.1-FHIT真核表达载体。方法:RT-PCR法检测三种不同类型人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA表达,构建真核表达质粒pcDNA3.1-FHIT,通过酶切法、PCR扩增法和DNA序列分析鉴定重组质粒后,用脂质体转染至FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选后RT-PCR鉴定。结果:FHIT基因在人胃癌细胞系BGC-823中呈阳性表达,在MGC-803、MKN-45细胞系中呈阴性表达。FHIT基因cDNA正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并成功转染FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45。结论:FHIT基因在不同类型人胃癌细胞系中表达各异。成功构建pcDNA3.1-FHIT,并转染到FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,使其FHIT基因阳性表达。

  • 标签: FHIT基因 胃癌 基因表达 构建 转染
  • 简介:目的:构建含Ubc9逆转录病毒表达载体,筛选建立携带该基因高滴度产毒细胞系,深入研究SUMO化修饰作用。方法:聚合酶链反应(PCR)扩增获取目的基因Ubc9,定向插入逆转录病毒表达载体pMSCVneo,形成重组质粒pMSCV-Ubc9;脂质体法将pMSCV-Ubc9转染逆转录病毒包装细胞PT67;G418筛选产毒细胞克隆,扩大培养产毒细胞克隆,收获病毒感染NIH3T3细胞。结果:限制性酶切和测序鉴定证实Ubc9正确插入逆转录病毒表达载体。G418筛选获得稳定产毒抗性细胞克隆,收获病毒能有效感染NIH3T3细胞。结论:携带Ubc9基因重组逆转录病毒表达载体pMSCV-Ubc9构建成功,转染PT67细胞后包装出重组逆转录病毒,进而筛选获得了能转录表达Ubc9产毒细胞系PT67-Ubc9。

  • 标签: Ubc9基因 逆转录病毒载体pMSCVneo PT67细胞
  • 简介:在最近发表在《MolecularPsychiatry》杂志上一项研究中。科学家们检测了阿兹海默症患者在发病过程不同阶段大脑中tau蛋白沉积样扩散特征。这一结果表明沉积斑块大小以及其扩散速度具有明显个体差异性,而大脑中tau蛋白水平与记忆损伤严重程度之间也有明显相关性。

  • 标签: TAU蛋白 扩散特征 沉积 患者 检测 MOL