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  • 简介:在利用ISSR技术分析齿裂菌属和皮下盘菌属遗传多样性研究中,为获得条带清晰、重复性好ISSR扩增结果,对影响ISSR—PCR条件进行了筛选,确定了此类菌物ISSR—PCR反应最适宜条件:在15μLPCR反应体系中,10倍Taq酶缓冲液1.5μL,DNA模板8ng/μL,MgCl22.5mmol/L,dNTP0.15mmol/L,引物浓度0.4μmol/L,Taq酶1.00U,ddH2O9.0μL。最佳退火温度因不同引物而定,最佳循环次数为35次。

  • 标签: 齿裂菌属 皮下盘菌属 ISSR—PER反应条件 优化
  • 简介:IbpA是小分子热激蛋白家族成员。IbpA和IbpB协同作用,与其他伴侣蛋白一起在热激反应中保护底物蛋白,消除凝集,产生重折叠,回复活性。概述了IbpA在热激反应中作用、ibpA基因表达调控和IbpA分子结构对其功能影响。

  • 标签: IbpA 小分子热激蛋白 热激反应
  • 简介:金耳(TremellaaurantialbaBandonietZang)是我国稀有的珍贵食用菌和药用菌,具有化痰、止咳、定喘、调气、平肝阳之功效。多糖作为金耳主要生理活性成分之一,具有增强免疫、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗血栓和抗氧化等作用。但由于技术手段落后,金耳多糖化学研究比较滞后,其药理活性研究也主要集中于粗多糖研究,对均一多糖化学结构分析和生物活性还很少涉及,这种状况对合理开发和利用金耳多糖产品造成很大影响。该研究对金耳子实体多糖进行了提取、分离纯化、结构鉴定、分子修饰和生物活性研究,为更好地开发金耳资源提供可靠理论依据。利用水提醇沉、膜分离、离子交换层析(DEAE—SepharoseFastHow)和凝胶层析(SephacrylS500HR系列)等分离技术,采用体外刺激小鼠脾淋巴细胞增殖试验作为活性筛选依据,获得3个较高生理活性均一多糖(TAPAl、TAPBl和TAPEl)。其中TAPAl和TAPBl2种均一多糖分子量分别为1.35X106D和7.6X105D,利用单糖组成分析、甲基化分析、红外光谱和NMR谱(一维和二维),对其一级结构进行了研究。TAPAl、TAPBl结构分别为

  • 标签: 金耳 多糖 NMR 结构鉴定
  • 简介:早在70年代,Anfinsen就提出蛋白质分子一级序列决定其空间结构论断,这一论断得到多次实验证实并被人们广泛接受,成为蛋白质结构预测理论基础。由于蛋白质分子结晶非常困难,因此蛋白质三维结构预测成为目前了解蛋白质结构信息重要手段,这一研究领域也成为蛋白质工程研究一个非常活跃方向。

  • 标签: 同源模建 蛋白质空间结构 蛋白质分子 蛋白质结构预测 目标蛋白 序列相似性
  • 简介:天冬氨酸蛋白酶是主要蛋白水解酶之一,广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。近年来,对植物天冬氨酸蛋白酶结构及功能研究有了一些进展。本文简要总结了植物天冬氨酸蛋白酶结构,典型植物天冬氨酸蛋白酶加工产生成熟过程,植物天冬氨酸蛋白酶在植物生物胁迫、非生物胁迫、种子萌发、有性生殖过程及植物衰老等方面的功能。

  • 标签: 天冬氨酸蛋白酶 结构与分类 加工机制 胁迫反应 有性生殖与衰老
  • 简介:目的对西双版纳小耳猪群体遗传结构进行RFLP分析。方法采用ECL核酸直接标记和检测系统,以HRP标记ɑ-珠蛋白-3’HVR多基因座小卫星探针,对西双版纳小耳猪HinfⅠ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交,以化学发光法进行检测,获得了清晰可辨、具有高度多态性DNA指纹图谱。结果2kb以上谱带数在6~15条之间,HinfⅠ酶切产生图带数低于HaeⅢ。JB亚系内805、807家系和JS亚系内111、121、121、151家系不同个体间相似系数分别为0.94±0.09、0.85±0.08、0.84±1.7、0.78±1.6、0.83±0.42、0.87±0.07,显著高于各家系间相似系数,JB亚系内805家系和JS亚系内151家系不同个体间相似系数较大,分别为0.94和0.87。结论西双版纳小耳猪近交程度较高,个体间差异较小,均一性较强。

  • 标签: 家系 珠蛋白 RFLP分析 多基因 HRP 化学发光法
  • 简介:对小刺猴头过滤掉发酵液发酵菌丝体,水提和碱提后获得均一组分多糖HMP-w1.1和HMP-a1.1进行结构性质研究。结果表明:HMP-w1.1是分子量为36.3kDα型吡喃糖,单糖组成为甘露糖(Man),葡萄糖(Glc),半乳糖(Gal),岩藻糖(Fuc);HMP-a1.1是分子量为42.8kDβ型吡喃糖,单糖组成为甘露糖(Man),半乳糖醛酸(GalUA),葡萄糖(Glc),半乳糖(Gal),岩藻糖(Fuc)。综合高碘酸氧化和Smith降解试验结果,推断HMP-w1.1糖苷键构型可能为1→、1→4、1→4→6、1→6、1→2、1→2,6;HMP-a1.1糖苷键构型可能为l→6、1→2、1→2,6。

  • 标签: 小刺猴头菌 菌丝体多糖 结构研究
  • 简介:利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达蛋白质直接送入细胞中.将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到特异作用于SV40启动子上9bp序列三锌指结构序列插入含有TAT蛋白蛋白质转导结构表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白表达载体pET-TAT-NLS-clone3.融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好纯化融合蛋白.

  • 标签: TAT 蛋白质转导结构域 SV40启动子 三锌指结构 融合蛋白 可溶性表达
  • 简介:锌指蛋白是一类具有手指状结构转录因子,对基因调控起重要作用。根据其保守结构不同,可将锌指蛋白主要分为C2H2型、C4型和C6型。锌指通过与靶分子DNA、RNA、DNA-RNA序列特异性结合,以及与自身或其他锌指蛋白结合,在转录和翻译水平上调控基因表达。我们简要综述了近年来锌指蛋白结构、分类及其与核酸及蛋白质相互作用等方面的研究进展。

  • 标签: 锌指蛋白 转录因子 结构 功能
  • 简介:[背景]自入侵中国之后,红火蚁已给农林业、健康卫生、生态环境等造成了危害。红火蚁在中国入侵、扩散路径及方式等仍然是待解决问题。[方法]利用微卫星分子标记,对来自国内14个地区和国外1个地区共15个红火蚁地理种群遗传多样性水平及种群遗传结构进行了研究。[结果]应用7对微卫星引物共检测到28个等位基因,15个红火蚁种群在各微卫星位点基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡。各种群平均表观杂合度HO、预期杂合度HE、Shannon信息指数Ⅰ、基因多样性指数Nei's和多态位点百分率P分别为0.2848、0.2708、0.3174、0.2629和43.63%,研究结果表明这15个红火蚁种群具有比较丰富遗传多样性。种群间平均分化系数FST为0.4258,说明有42.58%变异来源于种群间,表明红火蚁各种群之间有较高程度分化,且遗传分化可能是由地理隔离和基因流障碍(Nem=0.7442)共同引起。遗传距离D显示,河源种群与其他种群间遗传距离均相对高于其他各种群间遗传距离,表明河源种群与其他地理种群之间存在较大遗传差异,可能是较为原始类型。[结论与意义]短距离种群主要通过自然扩散方式传播,地理距离与亲缘关系有一定相关性;长距离种群主要依靠人为传播,因此地理距离与遗传距离不成正比。对于长距离入侵事件,监控与检疫是关键预防措施。

  • 标签: 红火蚁 种群 遗传结构 微卫星
  • 简介:[目的]苹果绵蚜是我国重要入侵害虫,对苹果生产造成了严重危害。近年来,苹果绵蚜扩散面积增大,危害加重。了解苹果绵蚜入侵过程中分子生态变化,可为该虫综合防控提供依据。[方法]利用微卫星标记技术,选择6个微卫星位点对山东省6个地区(烟台、威海、青岛、潍坊、聊城、泰安)2012-2015年苹果绵蚜种群遗传结构变化规律进行分析。[结果]2012-2015年,山东省6个地区苹果绵蚜遗传多样性随时间推移逐渐降低。其中,2012年遗传多样性极显著高于2013-2015年;2013-2015年之间虽然差异不显著,但随时间推移,等位基因观测值(Na)和期望杂合度(He)等遗传多样性指数有逐渐降低趋势。通过无限等位基因模型、双相突变模型和逐步突变模型分析发现,6个地区苹果绵蚜均经历了瓶颈效应,是遗传多样性降低主要原因。对6个微卫星位点分析发现,Erio20、Erio75和Erio78扩增到苹果绵蚜等位基因数量以及这3个位点多样性指数随时间推移逐渐降低。[结论]Erio20、Erio75和Erio78是引起苹果绵蚜遗传多样性降低主要多态位点。苹果绵蚜可能进化出了“超级克隆”基因型,因此,其可在我国适应不同生态环境并增大扩散范围。

  • 标签: 苹果绵蚜 入侵害虫 微卫星 遗传多样性 动态
  • 简介:蜘蛛丝是一类天然蛋白质纤维,具有独特机械性能(高强度、高弹性和高断裂功等)和卓著生物学特性(生物可降解性和与生物组织相容性等),在生物医学、材料、纺织和军事等领域都有着很高潜在应用价值。综述了不同蜘蛛丝蛋白模块结构特征及与其功能关系,扼要介绍了目前利用各种基因工程方法表达重组蜘蛛丝蛋白研究进展。

  • 标签: 蜘蛛丝蛋白 分子模块 结构和功能 重组表达
  • 简介:受体酪氨酸蛋白激酶是细胞信号转导进行关键信号酶,在生长因子调控细胞生长、发育与功能过程中起着重要生理作用。本文主要介绍生长因子受体酪氨酸蛋白激酶分类、结构与功能及其部分相关信号转导机制研究进展。

  • 标签: 生长因子 受体酪氨酸蛋白激酶 信号转导
  • 简介:铁硫簇是普遍存在于生物体中最古老生命物质之一。铁硫簇基本结构单元有[2Fe-2S]、[3Fe-4S]、[4Fe-4S]TZ[8Fe-7S]等几种形式,不同结构铁硫簇具有不同生物学功能,主要包括参与电子传递、底物结合与激活、铁/硫存储、基因表达调控、酶活调控等。铁硫簇既可在生物体内合成,也可在体外进行人工组装。铁硫簇生物合成主要和NIF、ISC、SUF这三个系统有关。研究已确定了参与铁硫簇合成关键蛋白,但对它们分子水平上机制及如何进行相互作用在体内外合成铁硫簇认识尚待进一步研究。

  • 标签: 铁硫簇 铁氧还蛋白 生物合成 支架蛋白 分子伴侣
  • 简介:目的探讨猪TCR基因分子结构复杂性及其与人类相似性。方法以公开猪TCRα链基因为参考序列设计两对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏淋巴细胞中克隆了93个猪TCRα基因(简称STA)。结果测序分析表明,克隆猪TCRα链基因均含有可变信号肽区和V区、高变J区和恒定C区基因片段,但基因间核苷酸序列组成都不完全相同,且具有十分复杂多态性和多样性,基因间同源性在68.4%-98.7%,这与TCRα链基本基因结构特征相一致。依据TCRα基因同源性对其分子结构、遗传演化关系和归类分析发现,在其信号肽区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区和CDR3区都存在一些变异集中点和变异热点区。用IMGT/V-QUEST分析方法可将合作小型猪TCRαV区(STAV)、J区(STAJ)基因片段与人类进行比较分析,发现合作小型猪TCRα与人类遗传演化关系较近,每个序列都能找到与人类对应TRAV、TRAJ基因片段,甚至V区相似性可达92%以上。结论近交培育合作小型猪在正常状态具有应对外界复杂微生物等环境TCR遗传多样性分子基础,且适合作为人类免疫学及疾病研究动物模型。

  • 标签: 合作小型猪 TCRα基因 生物信息学 多样性
  • 简介:目的:通过扫描电镜比较4种树脂水门汀(RelyXUnicem、PanaviaF、VariolinkⅡ、Vitique)粘结牙本质时超微结构差异。方法:新鲜拔除的人无龋坏第三磨牙12颗,随机分为4组(n=3),制备牙本质粘结面,分别与4种树脂水门汀(RelyXUnicem、PanaviaF、VariolinkⅡ、Vitique)粘结处理,将所得粘结试件二次纵切,SEM观察牙本质粘结界面。结果:四种树脂水门汀与牙本质粘结中,RelyXUnicem未见明显树脂突,而PanaviaF、VariolinkⅡ和Vitique均可见明显树脂突形成。结论:新型自粘结树脂水门汀粘结牙本质超微结构完全有别于传统树脂水门汀。

  • 标签: 树脂水门汀 牙本质 扫描电镜