简介:以部分脱乙酰几丁质为载体,戊二醛为偶联剂,共价法固定果胶酶(E.C.3.2.1.15),研究了果胶酶的固定化条件、固定化酶的性质,结果表明:固定化果胶酶的最适pH为3.5,比游离酶小0.5个单位;最适温度为50℃,比游离酶提高了10℃;其表观Km(3.67mg/mL)接近游离酶的Km(3.97mg/mL).以pH4.0、0.25%果胶溶液为底物进行柱式反应,结果表明:以1.7mL/min的流速运行26h,果胶酶活力基本无变化,操作半衰期为37d.以可溶性固形物含量5%的山楂汁、12%的苹果汁为例进行柱式实验,粘度可分别降低66%和60%.
简介:【摘要】本文对人教版生物新教材必修一中增加的几丁质新内容进行分析,并概括与几丁质相关的信息,为高中生物教学提供一些基础资料,同时对几丁质新内容的教学提出一些建议。
简介:摘要静电纺丝技术是一种有效的制备纳米纤维技术。本文综述了静电纺丝技术原理、影响因素,以及在聚电解质膜中的应用情况。此研究为开展纳米纤维在燃料电池隔膜领域的应用做好前期的铺垫工作。
简介:摘要目的通过生物信息学探讨几丁质酶3样1蛋白(CHI3L1)在胃癌中的作用及其临床意义。方法利用Oncomine、基因表达谱交互分析(GEPIA)和Kaplan-Meier Plotter等数据库探讨CHI3L1在胃癌中的表达及其与患者生存之间的关系。利用Methsurv数据库分析CHI3L1启动子和CpG位点甲基化水平及其与胃癌临床病理特征的相关性。通过LinkedOmics分析胃癌中CHI3L1共表达网络并进行基因本体和京都基因(GO)和基因组百科全书(KEGG)富集分析。通过分析肿瘤免疫估计资源(TIMER)和肿瘤免疫系统交互数据库(TISIDB)数据库探讨CHI3L1与胃癌免疫浸润之间的关联。体外实验使用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell、蛋白质印迹法(Western blot)等方法进一步验证CHI3L1在胃癌中的生物学功能。结果Oncomine数据库和GEPIA数据库均示CHI3L1在癌组织的表达水平高于正常组织(P<0.05),Kaplan-Meier Plotter数据库也显示CHI3L1表达在胃癌组织中显著增高(P<0.05)并与较低的总体生存率相关(P<0.01)。胃癌组织中CHI3L1的启动子和大部分CpG位点(cg19081101、cg04361579和cg14085262)甲基化水平显着高于正常组织且与患者的生存明显相关。GO和KEGG分析显示CHI3L1共表达相关性较高的前50个基因主要参与免疫反应与代谢调节。在免疫浸润方面,胃癌患者肿瘤组织中CHI3L1表达与CD8+细胞、B淋巴细胞、树突状细胞和嗜中性粒细胞浸润显著相关。在体外实验中,CHI3L1不仅被证明作为癌基因促进细胞增殖和转移,且促进PD-L1的表达。结论CHI3L1的表达上调和甲基化突变位点可能有助于预测胃癌患者的不良预后,CHI3L1能够调控胃癌免疫抑制微环境。
简介:摘要目的探讨裸角质膜同源蛋白(NKD1)在骨肉瘤组织中表达及与患者临床病理特征和预后的关系。方法选取2014年1月到2019年1月信阳职业技术学院附属医院保存的骨肉瘤组织样本和周围正常骨组织样本各63例作为研究对象。采用免疫组织化学检测骨肉瘤和正常组织NKD1蛋白表达,分析NKD1表达水平与患者临床病理特征和预后的关系。组间计量数据比较采用t检验,NKD1与临床病理特征的关系采用χ2检验,NKD1与生存时间和预后的关系采用Kaplan-Meier分析。结果NKD1主要表达于细胞质,呈黄色或棕黄色。癌旁组织NKD1表达阳性率[95.20%(60/63)]明显高于骨肉瘤组织[14.29%(9/63)],差异有统计学意义(χ2=12.091,P<0.05)。不同性别骨肉瘤患者NKD1表达阳性率比较(11.90%比19.05%),差异无统计学意义(χ2=0.517,P>0.05)。<20岁和≥20岁骨肉瘤患者NKD1表达阳性率比较(11.90%比19.05%),差异无统计学意义(χ2=0.489,P>0.05)。膝关节周围和其他部位发病的患者NKD1表达阳性率比较(11.63%比20.00%),差异无统计学意义(χ2=0.367,P>0.05)。Enneking分期Ⅱ期患者NKD1表达阳性率(23.33%)明显高于Ⅲ期患者(6.06%),差异有统计学意义(χ2=7.109,P<0.05)。无肺转移患者肿瘤组织NKD1表达阳性率(29.63%)明显高于肺转移患者肿瘤组织(2.78%),差异有统计学意义(χ2=12.722,P<0.05)。不同组织类型患者NKD1表达阳性率比较(13.79%比14.29%比15.38%)差异无统计学意义(χ2=0.732,P<0.05)。NKD1表达阳性者的中位生存时间(29个月)明显高于NKD1表达阴性者(13个月),差异有统计学意义(χ2=7.271,P<0.05)。生存曲线显示,NKD1表达阳性者的3年生存率[77.78%(7/9)]明显高于NKD1表达阴性者[25.93%(14/54)],差异有统计学意义(Log-rank=4.901,P<0.05)。NKD1表达水平、Enneking分期和肺转移均是骨肉瘤患者独立预后因素(P<0.05)。结论NKD1蛋白在骨肉瘤组织表达下调,与肿瘤恶性程度和患者预后明显相关。
简介:摘要目的检测寻常型天疱疮患者血清中几丁质酶3样蛋白1(YKL-40)水平,并分析其与病情严重程度的相关性。方法2017年1月至2018年5月于西南医科大学附属医院皮肤科采集38例寻常型天疱疮患者血清,同时收集14例年龄、性别、体重指数匹配的健康对照者血清,采用多功能流式点阵仪测定血清中YKL-40以及Th1/Th2/Th17相关细胞因子浓度。采用Mann-Whitney U检验分析患者组与对照组细胞因子差异;利用二元Logistic回归法分析与病情严重程度独立相关的因素;绘制受试者操作特征曲线(ROC),采用曲线下面积(AUC)、敏感性及特异性评价YKL-40预测天疱疮严重程度的能力。结果与对照组相比,寻常型天疱疮患者血清中YKL-40水平[M(Q1,Q3)][15.22(14.19,15.93)比13.64(13.21,14.63)μg/L,z = -3.88]以及细胞因子白细胞介素(IL)-6 [2.05(1.49,4.21)比1.57(1.38,1.75)ng/L,z = -2.44]、IL-7 [7.45(5.63,11.63)比3.77(2.21,5.97)ng/L,z = -3.26]、IL-8 [6.59(3.60,14.73)比4.36(2.96,6.53)ng/L,z = -1.96]、IL-2R-α[509.08(386.36,757.67)比336.44(309.86,458.71)ng/L,z = -2.35]和C5a水平[100.35(78.31,140.84)比72.08(37.23,82.08)ng/L,z = -3.04]均显著升高(P < 0.05)。天疱疮患者YKL-40血清浓度随着皮损面积的减少而逐渐降低(r = 0.63,P < 0.001),且YKL-40与病情严重程度独立相关[P = 0.025,优势比:46.54(95% CI:1.61~1 347.19)]。YKL-40区分重度和极重度患者与轻中度患者的AUC为0.783(95% CI:0.613~0.953)]。结论血清YKL-40水平与寻常型天疱疮严重程度相关性强,具有预测寻常型天疱疮病情严重程度的潜在价值。
简介:目的利用根癌农杆菌介导的基因转化定点插入突变几丁质合成酶chsC基因,实现基因失活而构建几丁质合成酶chsC基因缺失烟曲霉突变体。方法构建根癌农杆菌二元载体pDHt/SK,利用根癌农杆菌介导的转化插入突变烟曲霉几丁质合成酶chsC基因,用潮霉素抗性基因筛选转化子,并进行实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定。结果潮霉素抗性基因通过同源重组成功插入烟曲霉基因组中;经RT-PCR鉴定,烟曲霉几丁质合成酶基因chsC表达失活。结论利用根癌农杆菌介导的基因转化可以定点插入突变并失活目的基因,此方法有可能成为烟曲霉基因转化和功能基因组研究的有力工具。