简介：据2012年5月31日GuoLT[PLoSPathog，2012，8（4）：e1002659]报道，加拿大多伦多大学研究者揭示Nlrplb的蛋白酶解加工需要炎性小体（inflammasomes）的活化。炎性小体是一种多重的蛋白质复合物，可以推进前细胞凋亡蛋白酶对于病原体相关的分子模式（PAMPS）内源性危险相关的分子模式（DAMPS）产生必要的应答。Nlrplb是一种NOD样受体．可以检测炭疽致死毒素的催化活性，随后通过共寡聚体化来激活前细胞凋亡蛋白酶－1的活化。

简介：回顾了葡萄糖氧化酶（GOD）传感器研究的新进展。介绍了GOD的固定（包括物理吸附、化学偶联、使用载体等方法的研究进展）、电子的转移（使用碳纳米管、纳米颗粒等方法的研究进展），并对GOD传感器的发展前景进行了预测。

简介：为了考察海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊的毒性特征,我们利用MTT比色法和小鼠尾静脉注射法,分别考察了该微胶囊的细胞毒性和急性全身毒性。结果表明：微胶囊浓度≤1.0mg/mL时,材料对L929细胞生长无明显抑制作用;微胶囊浸提液即使在高浸提比（10.0mg/mL）下,浸提产物也无细胞毒性作用。急性全身毒性试验结果显示：微胶囊浸提液不引起急性全身毒性反应,表明微胶囊浸提液无有毒的沥滤物和降解产物产生。说明海藻酸钙/聚组氨酸微胶囊无明显毒性。

简介：据2012年6月1日CastelloA[Cell，2012，149（6）：1393—1406]报道，欧洲分子生物学实验室（EMBL）的科学家打算着手去寻找一些可以结合在RNA上的酶，结果他们发现的东西远远多于他们所期望的，研究者们发现了300种蛋白质都可以结合到RNA上，而且其中超过150种蛋白质都是已知的，但是并没有人知道这些已知的蛋白质可以结合RNA。这项研究将可以帮助理解基因和类似糖尿病或青光眼疾病之间的关系。

简介：LFA-1andMac-1,twoβ2integrinmembersconstitutivelyexpressedonneutrophils,mediateleukocyterecruitmentcascadebybindingtothesameligandofICAM-1.TheslowrollingandfirmadhesionofleukocytesrelyonLFA-1whilethecellcrawlingisdependentonMac-1.Wehypothesizedthattheirdistinctroleswerelikelyattributedtothedifferencesinthebindingkineticsorinthediverseresponsesofoutside-inandinside-outsignaling.Inthisstudy,wecomparedtheICAM-1bindingfeaturesbetweensolubleormembrane-expressedLFA-1andMac-1withdifferentaffinityconformationsusingopticaltraptechnique.Ourdataindicatethattheaffinityup-regulationfromwidetype(WT)tohighaffinity(HA)isoff-ratedependentforLFA-1buton-ratedependentforMac-1.Thestructuralbasesofthisnewfindingwerefoundtobeconsistentwithourprevioussimulations.Theseresultsfurtheredourunderstandingontheirfunctiondifferencesundershearflow.

简介：目的针对目前体外培养成骨细胞方法的不足,建立一种理想的原代培养成骨细胞的方法,为骨替代材料的研究提供成骨细胞.方法本实验用新生1～2天大鼠颅盖骨,采用多次酶消化法进行细胞体外培养.倒置显微镜观察细胞形态,并对其碱性磷酸酶(ALP)活性及矿化能力进行鉴定.结果所培养细胞具有成骨细胞的形态学特征及体内成骨细胞的生物学行为.结论本实验体外培养成骨细胞的方法切实可行,可为骨替代材料的研究提供种子细胞,也可为骨细胞生物学和骨组织工程的研究提供一种客观而有效的实验手段.

简介：Objective:Toachieveanoptimizedmethodforsolubleexpressionofhumancarboxylesterase1(hCE-1)inescherichiacoilandpurificationbyNi2+-NTAagaroseaffinitychromatography,togetimprovedproteinyieldandpurityforfurtherdevelopmentofhepatocellularcarcinoma(HCC)diagnosisELISAkits.Methods:ThebestantigenepitopesofhCE1werepredictedbycomparingsecondarystructure,flexibleregions,hydrophilicity,antigenicindexsurfaceprobabilityofresidues.Afterwards,pET-42a(+)withaHis-tagandaGST-tagwasappliedtoformrecombinantplasmidpET-42a(+)/hCE1,whichfacilitatedpurificationwhenusingNi2+-NTAagaroseaffinitychromatography.ProteinqualitywasmeasuredbySDS-PAGEandBCAproteinassay.Western-blotidentificationwasalsoperformedtoensurethecorrectexpressionofhCE1protein.Results:Theresiduesfrom500to567nearC-terminalofhCE1proteinwereconsideredthebestepitopeswhichexhibitedhighhydrophilicityandhighsurfaceprobabilityandrelativelyflexiblesecondarystructureandlowhomologycomparedwithhCE2andhCE3.His-hCE1500-567fusionproteinwasachievedbyIPTG-inductedexpressionwithanexpectedmassof42kDa.Afterpurification,thefinalproductwasspeciallyidentified,whichreachedover95%purityandmorethan10mg/Lofmicrobialculture.InWesternblot,thepurifiedfusionproteinwasrecognizedbyanti-hCE1monoclonalantibody,alongwithprevioussequencingvalidation,whichdemonstratedthecorrectpreparationofsolublehCE1protein.Conclusion:ThisisanefficaciousandaffordablestrategytogeneratefusionhCE1ofhighqualityinEcoli,whichfacilitatespreparationofhCE1monoclonalantibodyandfurtherHCCdiagnosisresearch.

简介：患者，男，22岁，因“右髋疼痛2年，关节活动受限半年”入院。2006年2月因翻墙时着地，右臀部碰到硬物后，致皮肤裂伤约3CM，当时予以清创缝合，半月后出现右髋部疼痛，站立及行走时为重，当时行局部理疗，但症状不见好转，拍骨盆平片发现患有石骨症，但未见股骨头异常病变，后在多家医院间断就诊，症状稍有缓解，近半年来感觉明显加重，出现活动明显受限，

简介：目的观察骨髓间充质干细胞（BMSC）移植治疗杜氏型肌营养不良（DMD）治疗前后血清酶学变化及临床效果。方法选择2007年6月至2009年6月解放军第四六三医院515例DMD患者,其中男性502例,女性13例;年龄1～20岁,平均年龄13.3岁。阳性家族史121例。经解放军第四六三医院伦理委员会同意,并征求患者本人及家人签字同意后,进行自体BMSC移植治疗,设自身治疗前后血清酶学变化对照方法进行疗效观察,入组患者均皮下注射粒细胞集落刺激因子,动员4d后采集骨髓,Percoll梯度离心,提取的单个核细胞总量为2.0×109,培养骨髓单个核细胞7-10d,最终得到BMSC总数4.0×108-1.5×109/mL。应用四肢肌内注射的方式进行BMSC移植。结果BMSC移植治疗12个月肌力增加者占患者总数的79.2%。临床升级人数占27.5%。血清肌酸激酶（CK）降低率81.0%,血清乳酸脱氢酶（LDH）降低率52.8%。结论BMSC移植治疗DMD,对肌肉组织有一定的修复作用,使DMD患者的运动功能得到改善,肌力有所提高,血清酶学较移植前下降。BMSC移植无不良反应,患者依从性好,是治疗DMD的新手段。

简介：1临床资料患者,男性,55岁。1998年3月5日主因腹痛、腹泻、便血3年入院。有急性阑尾炎行阑尾切除术史。体检：除外右下腹部麦氏点手术切口,无病理体征。X射线钡灌肠造影：降结肠近端肠腔轻度狭窄,不能充盈,肠管形态消失,肠壁增厚,黏膜乱,

简介：目的探讨12/15-脂氧合酶抑制剂黄芩素（Baicalein）对硝普钠（SNP）诱导的软骨细胞凋亡的抑制作用及可能机制。方法取8周雄性SD大鼠膝关节软骨，采用Ⅱ型胶原酶消化法提取软骨细胞并体外培养。设置对照组、SNP凋亡组和Baicalein给药组，以0.5mMSNP作用24小时诱导软骨细胞凋亡，以5μM,25μM,50μM,100μM不同浓度的Baicalein作用细胞，确定最适浓度，对照组仅加入同体积溶剂（蒸馏水）。CCK8法检测药物对细胞毒性；AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡；免疫荧光观测凋亡诱导因子（AIF）在软骨细胞中的定位。结果Baicalein在各浓度下对软骨细胞无明显毒性，与对照组相比，凋亡组软骨细胞活性明显下降（P＜0.01），与凋亡组相比，给药组细胞活性浓度依赖性地升高（P＜0.01）；流式检测显示对照组软骨细胞早期凋亡率3.16%，凋亡组27.8%，100μMBaicalein给药组14.1%；免疫荧光检测显示，凋亡组AIF出现核内移位，100μMBaicalein给药组AIF核移位受到抑制。结论Baicalein通过抑制12/15-脂氧合酶活性，进而抑制AIF从线粒体中的释放及核转位，发挥抗软骨细胞凋亡作用。

简介：

简介：目的：筛选ATP结合盒E1（ABCE1）基因的相关调节miRNA，为诊治肺癌提供新思路。方法选取20例非小细胞肺癌患者，其中男性13例，女性7例；年龄45～73岁，平均年龄62.9岁。鳞癌11例，腺癌9例。应用生物信息学预测ABCE1基因上游的miRNA，通过实时定量聚合酶链反应（RT-Q-PCR）及免疫组织化学方法，对标本非小细胞癌组织和癌旁组织进行检测，并进行统计学分析，从中筛选出目的miRNA。结果生物信息软件预测7个最有可能调节ABCE1基因的miRNA，分别为miR-29a/b/c、miR-135a/b、miR-203及miR-141；其中miR-29a/b/c、miR-135a、miR-203的表达在癌组织内较癌旁组织都有不同程度的降低，以miR-135a、miR-29c差异最为明显，与之对应ABCE1在相同的肺癌组织内表达上调（P〈0.05）；仅miR-135a与ABCE1在上述肺癌患者内表达呈现负性相关（r=-0.665，P=0.001）。结论在非小细胞肺癌内，很有可能是miR-135a负性调节ABCE1基因，两者结合可能成为诊治肺癌的新靶点。

简介：Objective:ThispaperistoexploreamethodoftransferringhumanSDF-1anditsmutantSDF-1/54intrakinegeneintoCOS-7cellsfordeterminingtheirexpressionandsubcelluarlocalizationofthefusionprotein.Thiscouldofferfeasibilityforinhibitingthemetastasisofmalignanttumorsbyphonotypicknockoutforblockingfunctionalexpressionofreceptoronthecell-surface.Methods:AmplifythetargetgenewithPCRfromtheconstructedplasimidSDF-WT-Gly×4-Dec/PET-30a(+)withaC-terminalretentionsignalfragmentKDEL.AfterthepcDNA3.1/SDF-1/KDEL,pcDNA3.1/SDF-1/54/KDEL,pEGFP/SDF-1/KDELandpEGFP/SDF-1/54/KDELeukaryoticexpressionvectorswereconstructedandtheDNAsequencewasaccurate,theyweretransferredintoCOS-7cellswithliposome.Theexogenousexpressionswereobserved,fusionproteinSDF-1/HisandSDF-1/54/HiswereconfirmedbyWesternblot,andtheSDF-1/EGFPandSDF-1/54/EGFPweredeterminedbyLaserScanningConfocalMicroscopy.Results:Fourexpressionvectorswereconstructedsuccessfully,thefusionproteinSDF-1/KDEL/HisandSDF-1/54KDEL/HisexpressedinCOS-7cells.SubcelluarlocalizationanalysisshowedthatSDF-1/KDEL/EGFPandSDF-1/54/KDEL/EGFPwerelocatedmainlyinendoplasmicreticulum.Conclusion:FourexpressionvectorspcDNA3.1/SDF-1/KDEL,pcDNA3.1/SDF-1/54/KDEL,pEGFP/SDF-1/KDELandpEGFP/SDF-1/54/KDELwereconstructedsuccessfully,whichcouldexpressineukaryoticcellandlocatemainlyintheendoplasmicreticulum.

简介：ＣＨＡＮＧＥＳＯＦ６－Ｋ－ＰＧＦ１ａＲＥＬＥＡＳＥＦＲＯＭＴＨＥＬＵＭＩＮＡＬＳＵＲＦＡＣＥＯＦＤＡＣＲＯＮＳＥＥＤＥＤＷＩＴＨＡＵＴＯＬＯＯＵＳＶＥＮＯＵＳＴＩＳＳＵＥＦＲＡＧＭＥＮＴＳＣＨＡＮＧＥＳＯＦ６－Ｋ－ＰＧＦ１ａＲＥＬＥＡＳＥＦＲＯＭＴＨ...

简介：为了探讨束缚+温水(36±1)℃应激是否能引起大鼠胃粘膜损伤、是否对延髓和下丘脑Fos蛋白表达有影响,本研究将雄性Wistar大鼠随机分两组:实验组,束缚+温水(36±1)℃应激1h;对照组,室温下单纯束缚应激1h。应激后处死,测直肠温度;取胃,观察胃粘膜损伤程度;取脑,应用免疫组化染色方法观察两组动物延髓、下丘脑神经元的Fos蛋白表达。结果显示:两组动物胃粘膜损伤程度均较轻或基本无胃粘膜损伤,延髓和下丘脑各核团Fos蛋白表达均无显著性差异,直肠温度也无显著性差异。这些结果提示,由于束缚+温水(36±1)℃应激不改变动物的体温,因而不引起延髓和下丘脑控制胃机能的核团神经元活动加强,从而也不诱发急性胃粘膜损伤。

简介：

简介：目的p27Kip1是一种细胞周期素依赖激酶抑制物,它抑制G1期的进程并对其进行调节。方法采用乳化-溶剂挥发法制备含p27kip1的纳米粒子,粒度集中分布在243～343nm,平均粒度为288．9nm,粒径呈窄分布,粒度分布指数为0．192。p27Kip1纳米粒子的载基因率为3％。包封效率为86％。p27Kip1基因纳米粒子的体外释放,开始的5d累积释放曲线接近直线,约1周后释放量开始变慢,释放曲线缓慢上升,可平稳维持释放2周以上。用p27kip1基因纳米粒子转染大鼠动脉平滑肌细胞,分为p27Kip1基因纳米粒子组、空白纳米粒子组、对照组,培养48h后收集细胞,流式细胞仪测定p27kip1纳米粒子对细胞周期调控的结果显示转染前细胞G1／G0期比例为92．4％,转染后48h,对照组及空白纳米粒子组G1／G0期比例为64．5％、68．3％,S期为12．4％、10．3％,表明G0／G1→S的过程非常迅速,细胞增殖活跃。而基因组G1／G0期比例为88．3％,S期为7．2％,说明细胞发生G1期阻滞,细胞增殖受到抑制。建立大鼠自体静脉移植模型,随机分成转基因治疗组、空白纳米粒子组、单纯静脉移植组,应用显微...

简介：胰岛移植是治疗1型糖尿病的有效方法,但是胰岛供体短缺、微环境破坏、免疫排斥、营养供应等是胰岛移植中的难题和挑战。组织工程方法是用支架材料或细胞与胰岛共移植,改善胰岛的存活和功能。而分子影像技术为移植后胰岛的生物学过程提供了有效的检测手段。文章对近年来组织工程技术改善胰岛移植的生存微环境干细胞治疗,以及分子影像方法进行胰岛移植后活体、实时、动态观测的研究进行了综述,对目前胰岛移植存在的问题和未来的发展方向进行了讨论。

简介：Objective:Tostudytheeffectofthreedifferentmethodssuchasmedicine,acupunctureandlaseracupunctureonthelevelsofinterleukin2(IL-2),interleukin6(IL-6)andtransforminggrowthfactor-β1(TGF-β1)inrat’sserumwithchronicatrophicgastritis.Methods:9ratswererandomlyselectedfrom60ratsasnormalcontrolgroup,andtheotherratswereusedtoreplicatetheanimalmodelofchronicatrophicgastritiswithcomprehensivemethod,5ratswererandomlyinspectedatthe8thweekintheprocessofcreatingmodelforgastricmucosapathologicalexamination;whengastricmucosashowsCAGsymptomssuchasvariousdegreeofcongestion,bleeding,atrophy,metaplasia,themodelratswererandomlydividedintomodelgroup,medicinegroup,acupuncturegroupandlaseracupuncturegroup.TheratsofmedicinegroupwerechronicallyadministeredwithyanshenjianweicapsuleandKangfuxinLiquid;thegroupsofacupunctureandlaseracupunctureselectedZusanliacupunctureasacupuncturepoints,afterthetreatmentfor14d,bloodwasremoved,doubleantibodysandwichenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)wasusedtodetectthelevelsofIL-2,IL-6andTGF-β1inserum.Results:Comparedwithnormalgroup,thecontentsofIL-2,IL-6andTGF-β1inserumofmodelratsincreased(P<0.05orP<0.01).Medicine,acupunctureandlaseracupuncturecouldreducethecontentsofIL-2,IL-6andTGF-β1,IL-2inserumofthemedicinegroupandlaseracupuncturegroupwassignificantlydecreased(P<0.05);IL-6inacupuncturegroupandlaseracupuncturegroupweresignificantlydecreased(P<0.05orP<0.01);andthemostsignificantislaseracupuncturegroup(P<0.01).Medicine,acupunctureandlaseracupuncturecouldsignificantlyreduceTGF-β1contentinserum(P<0.05orP<0.01),andtheparticularlysignificantwaslaseracupuncture(P<0.01).Conclusion:Laseracupuncturehasthefunctionofreducingtheinflammatoryresponseandadjustingimmunefunction.ItcaneffectivelyreducetheexpressionlevelofIL-2,IL-6andTGF-β1inserumofratswithchronicat