简介:摘要目的探索顺铂致肾间质纤维化的分子机制,为肾间质纤维化防治提供新思路。方法使用8周龄C57BL/6雄性无特定病原体级小鼠建模,将小鼠分为顺铂组和生理盐水组,每组6只,分别于第0、7、21天腹腔注射顺铂溶液(10 mg/kg)或生理盐水,第28天时处死小鼠,取肾组织行RNA Illumina高通量测序、实时定量PCR、Western印迹、Masson染色及生物信息学分析。结果通过实时定量PCR、Western印迹及Masson染色等验证,顺铂诱导的小鼠肾间质纤维化模型成功建立。RNA Illumina高通量测序结果显示,与生理盐水组相比,顺铂组差异表达长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)有387个,通过实时定量PCR验证排名前两位差异表达lncRNA的表达,趋势均与测序结果一致;差异表达mRNA 2 427个,其中补体C3在差异表达mRNA中排位第一。对测序结果行生物信息学分析,通过基因本体(GO)富集分析发现,与免疫相关的多个条目排位前20内;通过京都基因和基因组数据库(KEGG)富集分析发现,系统性红斑狼疮通路排位第一(ko05322,Q=3.4E-17),其中包含了补体级联反应通路。通过实时定量PCR验证发现,与生理盐水组比较,顺铂组补体C1q、C2、C3和C4 mRNA表达均升高(均P<0.05),与测序结果一致。结论小鼠周期性腹腔注射顺铂可诱导肾间质纤维化模型,该模型中肾脏补体通路活化。
简介:摘要目的研究补体旁路途径(alternative complement pathway)过度活化在恶性高血压肾硬化中的作用。方法(1)选取本院经肾穿刺活检证实为恶性高血压肾硬化患者50例为病例组,零点行肾穿刺活检的供肾者25例为正常对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆及尿液中的补体旁路途径活化起始B因子、正向调节P因子、负向调节H因子及补体活化终末产物C3a、C5a水平。(2)免疫组化法检测补体活化终末产物C5b-9、C4d及凝集素途径活化产物甘露糖结合凝集素(MBL)在肾活检组织的沉积;免疫荧光双染检测C5b-9与CD34(内皮细胞标志物)在小动脉内皮及肾小球毛细血管内皮的沉积。结果(1)恶性高血压肾硬化患者血浆及尿液中补体B因子、P因子、C3a及C5a均高于正常对照组(均P<0.05),而H因子则低于正常对照组(P<0.05)。(2)恶性高血压肾硬化患者血浆中补体P因子与24 h尿蛋白量呈正相关(rs=0.465,P=0.001),而补体B因子、H因子、C3a、C5a与血肌酐及24 h尿蛋白量无明显相关性。恶性高血压肾硬化患者尿B因子/尿肌酐、尿P因子/尿肌酐、尿C3a/尿肌酐与血肌酐均呈正相关(rs=0.483,P<0.001;rs=0.352,P=0.012;rs=0.319,P=0.024),尿H因子/尿肌酐与血肌酐及24 h尿蛋白量均呈负相关(rs=-0.299,P=0.035;rs=-0.342,P=0.015),尿C5a/尿肌酐与血肌酐及24 h尿蛋白量均呈正相关(rs=0.525,P<0.001;rs=0.496,P<0.001)。(3)免疫组化显示,恶性高血压肾硬化患者C5b-9沉积于小动脉壁及肾小球毛细血管壁,而正常对照组肾组织中未见沉积。恶性高血压肾硬化患者肾脏C5b-9沉积强度评分与血肌酐及24 h尿蛋白量呈正相关(rs=0.791,P<0.001;rs=0.345,P=0.014)。双重免疫荧光标记法可见C5b-9、CD34沉积于小动脉内皮及肾小球毛细血管内皮。(4)恶性高血压肾硬化患者血浆中B因子与C3a(r=0.331,P=0.022)、P因子与C5b-9评分(rs=0.300,P=0.034)均呈正相关;尿液中补体旁路途径活化B因子与C3a、C5a及C5b-9均呈正相关(rs=0.311,P=0.028;rs=0.465,P=0.001;rs=0.428,P=0.002),P因子与C3a、C5a也均呈正相关(rs=0.307,P=0.030;rs=0.442,P=0.001)。恶性高血压肾硬化患者免疫组化可见C4d沉积于小动脉及肾小球,而未见凝集素途径活化产物MBL沉积。结论补体旁路途径过度活化可能参与恶性高血压肾硬化的发生。恶性高血压肾硬化严重程度与补体旁路途径的活化水平相关。
简介:摘要 目的:检测 CD55在胃癌及癌旁组织中的表达,分析 CD55与临床病理参数之间的关系。方法:收集 109对胃癌及癌旁组织,进行免疫组织化学染色,观察 CD55在组织中的分布情况,利用非参数检验等统计学方法,分析 CD55与性别、年龄、分化程度及 TNM分期等临床病理参数之间的关系。结果:免疫组化结果显示 CD55在胃癌组织中的阳性率为 35.78%,在癌旁组织中的阳性率为 98.17%( P<0.05);统计分析结果提示 CD55在胃癌组织的表达与患者的性别、年龄、胃癌的分化程度和 TNM分期均无显著相关( P值均 >0.05)。结论: CD55在癌旁组织中的表达显著高于胃癌组织,且表达水平与病人的临床病理参数无关。
简介:【摘要】目的:探讨分析羊水栓塞患者补体活性、凝血功能及炎症细胞因子的检验价值。方法:研究伊始时间与终止时间分别为2021年2月和2022年3月,通过电脑相关程序作用下在该段时间内选择我院接受治疗的羊水栓塞患者共计45例作为观察组,以及同时间段内我院体检健康的产妇共计45例作为对照组,对患者均实施补体活性凝血功能以及炎症细胞因子的检测工作,并对最终的结果进行分析。结果:补体活性水平更低的一个群组为观察组,各项凝血功能指标以及炎性因子水平均更高的一个群组为观察组(P<0.05)。结论:对于出现羊水栓塞现象的患者而言,其所拥有的补体活性以及凝血功能均出现了一定程度的降低,体内所含有的炎症细胞因子水平有所升高,可以通过对上述提及指标进行检测,从而判断产妇是否出现羊水栓塞。
简介:摘要目的检测子宫肌瘤组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达率,探讨临床意义。方法应用免疫组织法(SP)测定40例子宫平滑肌瘤和相应子宫肌层组织的ER、PR、PCNA的表达。结果子宫肌瘤组织中ER、PR阳性率分别为62.5%、70%;相应子宫肌层组织中ER、PR阳性率分别为40%、42.5%,两组ER和PR阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫肌瘤中PCNA表达水平,无论在增殖期或分泌期,高于相应肌层组织,两组间比较有显著性差异(P<0.05)。结论ER、PR、PCNA均是反映子宫肌瘤的生物学行为的指标,研制ER、PR、PCNA的拮抗剂,使子宫肌瘤萎缩或凋亡,有望成为治疗子宫肌瘤的新途径。
简介:目的探讨肝硬化及肝硬化合并肝癌患者不同Child—Pugh分级时补体C,的表达意义。方法选取肝硬化患者68例(肝硬化组),肝硬化合并肝癌患者56例(肝硬化合并肝癌组),健康体检者35例(对照组),均测定补体C3含量。并比较肝硬化组及肝硬化合并肝癌组同等Child—Pugh分级状态时补体C3水平的差异。应用ROC曲线测定Child-Pugh分级时补体C3的界值。结果肝硬化组和肝硬化合并肝癌组血清补体C3水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05),随着Child—Pugh分级由A级至c级变化血清补体C3水平逐渐降低,差异有统计学意义(P〈0.05),不同Child—Pugh分级时肝硬化组血清补体C3水平均低于肝硬化合并肝癌组,差异有统计学意义(P〈0.05)。应用ROC曲线可测出两组间不同Child—Pugh分级时补体C3的界值分别为A级679.5mg/L,B级535.5mg/L,C级323.0mg/L。结论血清补体C3与肝功能损伤严重程度相关,对肝硬化患者是否合并肝癌有临床提示意义。
简介:摘要目的探讨补体活化在原发性恶性高血压(malignant hypertension,MHT)肾硬化症患者合并严重心肾损伤中的作用。方法回顾性收集2010年1月至2020年12月经首都医科大学附属北京安贞医院肾活检确诊为MHT肾硬化症患者的临床病理资料。免疫组化检测肾组织补体相关成分C4d、C1q、补体因子H相关蛋白5(CFHR-5)、C3c和C5b-9的表达。按照入选者是否合并急性心力衰竭和/或急性肾损伤分为严重心肾损伤组和非严重心肾损伤组,比较两组患者临床病理资料的差异。依据患者肾组织中补体活化指标C4d沉积情况分为C4d弥漫沉积组和非C4d弥漫沉积组,比较两组患者心、肾损伤程度及肾组织血栓性微血管病病变程度。结果33例MHT肾硬化症患者入选本研究,其中17例(51.5%)患者合并严重心肾损伤;16例(48.5%)患者发生急性心力衰竭,8例(26.7%)患者发生急性肾损伤,7例(21.2%)同时合并急性心力衰竭和急性肾损伤。与非严重心肾损伤组比较,严重心肾损伤组患者基线乳酸脱氢酶[326.0(217.0,366.0)IU/L比197.0(165.0,220.0)IU/L,Z=37.000,P=0.002]及血红蛋白[(143.6±24.0)g/L比(106.4±24.7)g/L,t=38.500,P<0.001]水平较高,禁水12 h尿渗透浓度[400.0(342.5,504.0)mmol/L比476.0(432.3,616.5)mmol/L,Z=72.000,P=0.021]和血清白蛋白[(36.2±9.4)g/L比(43.2±6.2)g/L,t=6.423,P=0.017]水平均较低,左心室后壁较厚[(14.0±2.1)mm比(12.1±1.1)mm,t=6.552,P=0.018]。肾组织免疫组化结果显示,严重心肾损伤组补体活化相关成分C4d及C5b-9弥漫沉积比例均高于非严重心肾损伤组(5/16比0/15,P=0.043;12/16比5/15,P=0.032)。与非C4d弥漫沉积组比较,C4d弥漫沉积组患者急性心力衰竭发生比例较高(5/5比10/26,P=0.018),心脏功能较差,心室重构较重,而高血压病史较短[2.0(0,12.0)个月比48.0(9.5,84.0)个月,Z=22.500,P=0.022]。结论MHT肾硬化症患者中严重心肾损伤的发生率约为51.5%,合并严重心肾损伤MHT患者肾组织补体活化成分弥漫沉积比例高于非严重心肾损伤患者。补体过度活化可能参与了MHT所致严重心肾损伤的致病过程。
简介:摘要常染色体显性遗传多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是最常见的单基因遗传性肾病,约50%的患者在60岁时进入终末期肾衰竭,给家庭和社会带来巨大负担。ADPKD缺乏安全有效的治疗药物,主要原因是该病发病机制复杂,目前尚未完全阐明。补体旁路途径的异常激活可能通过促进囊肿上皮细胞增殖和肾间质炎性细胞浸润加速ADPKD进展,旁路途径有望成为治疗的新靶点。本文主要针对补体系统在ADPKD发病中的相关研究进展作一综述,以期为临床干预和治疗ADPKD提供新思路。
简介:摘要目的探讨肝硬化合并肝癌及单纯肝癌患者不同child分级时补体C3、C4的表达意义。方法选取肝癌患者121例,健康对照组37例,均测定补体C3、C4含量。将肝癌患者分为肝硬化合并肝癌组及单纯肝癌组,并根据Child评分分级分组,比较两组间C3、C4水平的差异。结果1肝癌两组中随着Child分级由A级至C级变化血清补体C3水平逐渐降低,而补体C4水平则逐渐升高。2组间比较A级、B级时单纯肝癌组补体C3、C4水平均高于肝硬化合并肝癌组。单纯肝癌组与对照组比较差异同样有显著性。结论血清补体C3、C4与肝功能损伤严重程度相关,结合Child分级可更好地反映肝癌及肝硬化合并肝癌时肝脏储备功能及体液免疫水平,对临床诊治有重要意义。
简介:摘要目的基于妊娠期高血压和蛋白尿发生的报道寻找预测妊娠期高血压疾病(HDP)的循环补体相关蛋白,探讨补体系统在HDP发生发展中的作用。方法采用巢式病例对照研究,收集2014年11月至2017年3月于广州市妇女儿童医疗中心产检并分娩的孕妇孕20周前血清,共纳入60例HDP和60例正常孕妇,按年龄和孕周1∶1配对。采用非标记蛋白质谱方法筛选12对血清标本中差异表达的补体蛋白,余48对用于初步验证。当差异倍数(FC)>1.2或<0.8,且P<0.05时入选。用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价相应因子的预测价值。结果高血压孕妇血清补体C1亚单位(C1s)、C8 beta链(C8β)、C1抑制剂(C1-INH)的FC分别为1.19、1.23、0.73(t=2.07,2.06,-3.40;P均<0.05);子痫前期(PE)孕妇C1s、C8β、C1-INH、H因子相关蛋白5(CFHR5)、丛生蛋白(CLU)、C反应蛋白(CRP)的FC分别为1.39、1.50、0.72、2.49、4.38和1.82(t=4.36,5.61,-3.70,6.82,8.70,7.27;P均<0.05)。C1s、C8β和C1-INH联合对HDP的AUC值为0.89。CFHR5、CLU和CRP对PE的AUC值分别为0.88、0.92和0.91。结论HDP发生前,孕妇体内已出现补体经典途径和旁路途径的激活及调节紊乱。补体C1s、C8β、C1-INH联合检测有望用于HDP的预测,CFHR5、CLU、CRP可能是肾脏损伤性HDP的潜在预测分子标志。
简介:摘要目的探讨狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)患者中血清补体C3与肾小球微血栓(glomerular microthrombosis,GMT)的关系。方法回顾性分析2010年1月至2019年2月于深圳市第二人民医院肾内科住院确诊的LN患者资料,据是否有GMT形成分为GMT组与无GMT组,并分别对两组患者的人口学资料、临床特点、病理及预后指标进行比较;采用Logistic回归分析及广义相加混合模型平滑曲线拟合等方式探讨血清补体C3与GMT的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线比较两组患者的肾脏预后。结果本研究共纳入116例LN患者,年龄(32.79±11.43)岁,女性108例(93.10%);共37例(31.90%)合并GMT(GMT组),79例未合并GMT(非GMT组)。与非GMT组相比,GMT组患者年龄相对更大(t=-2.876,P=0.002),高血压比例更高(χ2=7.492,P=0.006),24 h尿蛋白量更多(Z=-2.115,P=0.003),eGFR及血清C3水平更低(Z=3.469,P<0.001;t=1.744,P<0.001),系统性红斑狼疮疾病活动度评分更高(t=-2.758,P=0.007)。病理方面以IV型LN占多数(72.97%),总新月体更多(Z=-1.866,P=0.002),活动性指数更高(t=-5.005,P<0.001),核碎裂、内皮增生和肾小管萎缩更严重(χ2=14.987,P<0.001;χ2=15.695,P<0.001;χ2=4.130,P=0.042)。多因素Logistic回归分析提示血清补体C3是LN患者GMT形成的相关因素(OR=0.966,95% CI 0.938~0.995,P=0.023)。广义相加混合模型平滑曲线拟合结果表明补体C3水平与GMT形成的变化趋势呈线性关系。Kaplan-Meier生存曲线表明两组患者在尿蛋白完全缓解(Log-rank χ2=5.858,P=0.016)及血肌酐翻倍或进展至终末期肾病(Log-rank χ2=3.945,P=0.047)方面的差异存在统计学意义。结论LN患者血清C3水平与GMT形成密切相关,GMT组与非GMT组患者的肾脏预后差异存在统计学意义。