简介：

简介：摘要：目的 探究慢性丙肝患者其外周血之中HCV-RNA与HCV-Ab联合检测方式其实际的诊断价值。方法 搜集90例可疑慢性丙型肝炎患者血清，通过荧光定量逆转录聚合酶链反应开展对病毒的检测。结果 HCV RNA含量其高于5.0×102IU/mL血清病例之中，抗HCV阳性率是89.18%。结论 HCV RNA和抗－HCV为正相关，也具有符合与互补性。

简介：摘要目的探讨ELISA检测抗HCV影响因素。方法回顾性总结我院300例输血前、血透患者ELISA检测抗HCV的资料进行总结分析。结果298例为阴性，一例输血前感染过HCV病毒，另一例类凤湿因子（RF）的干扰造成假阳性反应。结论ELISA检测抗HCV是血站、医院的常规检测项目，虽然该方法操作简单，灵敏度高，但在实际操作中，ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见，该临床诊断给治疗带来很大困难，影响ELISA检测抗HCV因素众多［1］。现就比较常见的影响因素加以分析总结。

简介：摘要目的探讨HCV-RNA和抗-HCV联合检测诊断丙型肝炎的临床意义。方法选择本院收治的120例丙型肝炎患者为研究样本，对其临床资料进行回顾性分析，将其中60例急性丙型肝炎患者设为鉴别组，60例慢性丙型肝炎设为对照组，测定患者血清HCV-RNA、抗-HCV和ALT水平。结果观察组HCV-RNA和抗-HCV同时阳性率低于对照组，且HCV-RNA阳性、抗-HCV阴性率高于对照组，P<0.05。HCV-RNA阴性、抗-HCV阳性率在两组患者中的占比均较低，对比无显著差异，P>0.05。120例丙型肝炎患者中有78例ALT异常，且HCV-RNA定量水平越高，ALT异常率越高，二者呈正相关性，P<0.05。结论HCV-RNA可作为反映HCV复制的可靠指标，联合抗-HCV检测和ALT结果有助于准确诊断早期丙型肝炎，为临床后续治疗提供重要的参考数据。

简介：摘要：目的：研究在丙型肝炎确诊患者中采用HCV-RND和抗-HCV联合检测的临床意义。方法：回顾性分析2018年4月～2020年4月在我院治疗的丙型肝炎确诊患者228例，对所有患者的血清标本进行检测，抗-HCV采用化学发光微粒子免疫法；HCV-RNA采用实施荧光定量聚合酶联反应法，分析检测结果。结果：HCV-RNA的总检出率为88.16％（201/228）；抗-HCV总检测率为85.53％（195/228），两种联合检测结果为98.25％（224/228），HCR-RNA阳性与阴性患者的ALT阳性率相比较，P＜0.05。结论：采用HCV-RNA联合抗-HCV检测，可尽早的确诊HCV感染。

简介：摘要目的原核表达古尔图病毒(Guertu virus, GTV)糖蛋白截短片段(Gn、Gn1、Gn2、Gn3、Gc1和Gc2)，分别纯化Gn-His、Gc1-His和Gc2-His重组蛋白并制备其多克隆抗体。方法采用RT-PCR的方法分别扩增得到GTV DXM毒株截短糖蛋白Gn、Gn1、Gn2、Gn3、Gc1和Gc2基因片段，并将其构建到原核表达载体pET-32a(＋)中，继而转化到E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达，SDS-PAGE分析蛋白质大小。经镍柱亲和层析纯化Gn-His、Gc1-His和Gc2-His重组蛋白，用GTV阳性羊血清通过Western blot法检测重组蛋白的抗原性。用纯化的蛋白质分别免疫新西兰白兔制备抗血清，ELISA法检测血清效价。将构建的真核表达载体pcDNA3.1-Gn和pcDNA3.1-Gc1/Gc2转染至哺乳动物Vero细胞，并用间接免疫荧光法评估前述制备的兔多克隆抗体的结合活性。最后用Western blot法检测血清与重组蛋白的特异性反应能力。结果双酶切鉴定和测序结果表明pET-32a-Gn、pET-32a-Gn1/Gn2/Gn3、pET-32a-Gc1/Gc2、pcDNA3.1-Gn和pcDNA3.1-Gc1/Gc2重组表达载体构建正确，重组表达蛋白Gn-His、Gn1/Gn2/Gn3-His、Gc1/Gc2-His相对分子质量(Mr)大小分别约为63.4×103、37.1×103、31.9×103、30.8×103、40×103和54.4×103。重组表达蛋白能够被GTV阳性羊血清所识别；获得的抗GTV Gn、Gc1和Gc2兔多克隆抗体效价分别为1∶409 600、1∶204 800和1∶6 400。间接免疫荧光检测和Western blot结果表明制备的多克隆抗体能够与真核表达产物或重组蛋白发生特异性反应。结论重组GTV糖蛋白Gn-His、Gc1-His和Gc2-His得到了高效表达和纯化，具有较好的免疫性。制备的多克隆抗体效价高，特异性好。本研究结果为进一步开展GTV糖蛋白生物学功能及其检测方法和疫苗研究提供参考资料。

简介：目的:促红素在慢性肾功能不全(CRF)患者中的有效性已经证实,但对华北制药集团生产的促红素的有效性尚未见评价,本文旨在作相应的观察.方法:采用自身前后对照观察41例CRF患者,分别予促红素100～150U/kg·周,皮下注射,观察用药前、用药后第2、4、6、8、12周的血常规及血生化改变.,结果:用药后2周血红蛋白、红细胞压积、网织红细胞计数均开始增高,第4、8、12周血红蛋白分别增高(8.5±12.4)g/L,(16.2±11.3)g/L,(21.9±14.1)g/L,红细胞压积增高2.4%±4.4%,4.7%±4.4%,7.1%±5.4%.除第2周白细胞轻度降低外,其它指标无明显改变.结论:华北制药集团生产的促红素在慢性肾功能不全患者中疗效显著.

简介：幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)是上消化道疾病的主要致病菌,它的感染不但与B型胃炎和消化性溃疡的发生有密切关系,而且与非溃疡性消化不良,MALT淋巴瘤和胃癌也有重要关系,并已被世界卫生组织列为胃癌等肿瘤的相关致病菌[1,2,3].Hp在我国普通人群的感染率较为高50%～80%[4].随着分子生物学技术的发展,幽门螺杆菌致病机理研究的进一步深入,有效抗原的筛选,以及基因工程菌株构建的运用,将预防和根治Hp的感染成为了可能.因此,本实验以Hp特快特异性基因--18kDa外膜蛋白基因,经PCR扩增,构建重组载体,为在原核生物表达创造条件,同时为疫苗的研究以及快速诊断试剂盒的开发奠定基础.

简介：摘要目的探讨慢性丙型肝炎患者的外周血HCV病毒载量及HVC抗体水平变化相关性的临床研究。方法回顾性选取在2016年1月-2017年1月于医院诊治的慢性丙型肝炎患者68作为研究对象，采用实时荧光定量PCR法对患者HCV-RNA病毒载量进行测定，同时采用ELISA法检测HVC抗体水平，分析其相关性。结果①研究中的慢性丙型肝炎患者，其中HCV-RNA阳性37例，阳性率54.41%；②随着患者的HCV抗体S/CO值越高，HCV-RNA的阳性率越高，分别为11.76%、45.45%、86.21%（P<0.05）。结论慢性丙型肝炎患者的HCV-RNA阳性检出率与其HVC抗体水呈正相关，随着患者的HCV抗体S/CO值的升高患者的HCV-RNA阳性率升高。

简介：目的：讨论无偿献血人群丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）、HCVRNA、丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测结果之间的相关性。方法采用ELISA法检测抗-HCV阳性标本235份，荧光定量PCR法检测病毒RNA，速率法测定ALT，并对抗-HCV（＋）/HCVRNA（–）标本进行追踪回访。结果235份抗-HCV阳性标本中，HCVRNA阳性140例（阳性率59.57%）；抗-HCVS/CO值1～5实验组和5.01～9.99实验组，HCVRNA阳性率分别为34.29%、26.47%；S/CO≥10时，HCVRNA阳性率为81.68%，与其他2组的差异有统计学意义（χ^2=45.15，P〈0.05；χ^2=39.41，P〈0.05）。抗-HCV（＋）/HCVRNA（＋）与抗-HCV（＋）/HCVRNA（–）组的ALT异常率分别为2.86%、1.05%，两组的差异无统计学意义（χ2=0.88，P＆gt;0.05）。抗-HCV（＋）/HCVRNA（＋）与抗-HCV（＋）/HCVRNA（–）组献血者的年龄分别是38.05±11.35岁和33.81±11.50岁，两组的差异有统计学意义（t=2.79，P〈0.05）。95份抗-HCV（＋）/HCVRNA（–）标本成功回访23例，其中1份标本回访检测抗-HCV转阴。结论HCVRNA阳性率与抗-HCV的S/CO值有一定相关性，抗-HCV阳性的无偿献血人群中，ALT异常率与HCVRNA无相关性，感染者年龄与HCVRNA有一定相关性。

简介：重组雌激素受体基因酵母筛选南山茶子抗骨质疏松有效部位的实验的结果显示醋酸乙酯部位对雌激素受体表现出双向调节的作用,南山茶重组人基因酵母孕激素受体拮抗作用,南山茶的抗孕激素活性测定分别称取南山茶子醇提物

简介：摘要目的构建人降钙素原（hPCT）原核表达载体，低成本、快速、高浓度、高纯度获取hPCT纯化蛋白，为临床实验室检测制备质控品和参考物质奠定基础。方法将GenBank提供的hPCT编码序列经大肠杆菌密码子优化后，人工合成DNA片段克隆至pET-28a(+)原核表达载体以构建重组hPCT表达质粒。转化至大肠杆菌E. coli BL21感受态中，优化诱导表达条件、诱导质粒表达并对重组蛋白进行His融合标签纯化。结果成功构建重组hPCT原核表达质粒，优化异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导重组蛋白表达浓度及诱导温度，最适IPTG浓度为0.2 mmol/L，最佳诱导温度为37 ℃。纯化后hPCT蛋白可通过临床检测，且稀释倍数与检测浓度间呈现良好线性关系，回归方程为y=-0.0085x+112.63，R2值为0.9975。结论成功构建重组hPCT的高效表达系统，重组hPCT蛋白纯度大、浓度高、生产周期短，有成为候选室间质量评价参考物质的潜力。

简介：脑缺血的基因治疗是颇具前景的治疗手段，以病毒为载体的基因治疗的有效性和安全性关系到最终治疗的成败。重组腺相关病毒（recombinantadeno-associatedvirus，rAAV）载体作为目前安全性最好的病毒载体系统，在动物中枢神经系统（centralnervoussysterm，CNS）中已进行了有效转导。随着国内外研究的日趋深入，rAAV在脑缺血基因治疗中的应用也越来越倍受瞩目。现就其进展予以综述。

简介：目的构建超抗原SEA和喉癌来源的MAGE-A3基因共表达的真核表达载体,检测、鉴定其在293T细胞中的表达.方法分别用RT-PCR方法及人工化学合成法获得MAGE-A3和SEA基因片段,然后依次将MAGE-A3和SEA基因克隆至含内部核糖体进入位点的真核表达载体IRES序列的上、下游,构建成重组质粒pMAGEA3-IRES-SEA.经脂质体转染至293T细胞以后,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别鉴定SEA、MAGE-A3基因的表达.结果限制性内切酶酶切分析证实MAGE-A3基因和SEA基因均正确地克隆在pMAGEA3-IRES-SEA中,基因测序结果与GenBank公布的MAGE-A3、SEA序列完全一致,实现了双基因的正确重组.重组质粒转染293T细胞后能检测到MAGE-A3、SEA基因的高水平表达.结论成功地构建了pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE-A3和SEA蛋白,由此奠定了其作为抗喉癌DNA疫苗应用的基础.

简介：目的探讨pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒在大鼠骨髓间充质干细胞（bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSC）中表达的情况,为下一步的动物实验奠定基础.方法构建插入人血管生成素-1（angiopoietin,Ang-1）和人血管内皮细胞生长因子165（vascularendothelialgrowthfactor165,VEGF165）双顺反子的pIRES重组质粒,经脂质体转染大鼠MSC,以实时荧光定量PCR技术分析各基因人源、鼠源以及总mRNA的动态变化.结果所构建的pVEGF165-IRES-Ang-1双顺反子重组质粒在大鼠MSC中成功表达了相应蛋白.人VEGF165得以高丰度表达,且在转染1d后mRNA检出的拷贝数最高;人Ang-1在4个检测时间点中的mRNA拷贝数比较稳定,但转录本的拷贝数较VEGF165显著降低;转入人Ang-1和人VEGF165后,各对应同源蛋白的总mRNA有显著增加,但大鼠MSC自身Ang-1与VEGF164的编码mRNA明显有下调趋势.结论pVEGF165-IRES-Ang-1重组双顺反子质粒双基因表达量明显不一致,表现为受插入的位置关系影响,且可能受转染细胞内同源蛋白的总量调控.

简介：目的:研究腺病毒介导的小鼠Mig基因对BALB/c裸鼠肾细胞癌的抗肿瘤效果,探讨肾细胞癌治疗的新途径。方法:利用786-O肾癌细胞皮下注射BALB/c裸鼠建立肾细胞癌模型,应用携带Mig基因的重组腺病毒(Ad-Mig)直接进行瘤内注射治疗,观察裸鼠皮下肿瘤生长情况和荷瘤裸鼠的生存期;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CTL和NK的杀伤活性。结果:Mig基因能显著抑制荷瘤裸鼠皮下肿瘤的生长,并使鼠生存期明显延长,还能显著增强鼠脾细胞NK和CTL杀伤活性。结论:重组腺病毒Ad-Mig基因对鼠肾细胞癌有显著治疗效果。

简介：过去的几年中建立了一些非侵入性检测幽门螺杆菌(Hp)感染的方法,其中临床应用较多的是培养的Hp菌体抽提物作为抗原检测血清总抗体或尿素酶抗体。近年国外应用基因工程表达的多克隆或单克隆基因蛋白作为抗原,并结合到固相载体上,同时应用酶标记抗人IgG(或IgA)可以检测相应的血清—

简介：“无名高热”的发生是由多种病原微生物的协同致病作用或称混合感染导致。至少在笔者接诊试验治疗的猪场和查阅相关资料是如此，既有Pmc肺炎、SS、附红细胞体病、APP和蓝耳和猪流感病等，如果剖检病死猪或病后期猪，还可见到Hc、HPS、PCVD、沙门氏菌病等等。病程稍长，这些病原会形成极复杂的病原谱组合，这种组合无疑起到了协同致病的作用。此病传染快，死亡率高，采用抗生素、疫苗处理等常规治疗方法疗效不明显，死亡率未见控制，使许多猪场猪只死亡，损失惨重。

简介：为了解献血人群中丙型肝炎感染率与丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）的关系，我们对荷泽地区红十字会血站职业献血员进行了抗－ＨＣＶ和ＡＬＴ检测，现将检测结果报告如下。１材料和方法检测对象为临床健康献血员，年龄为１８—５５岁，计５８６３人。检测抗－ＨＣＶ采用ＥＬＩ...

简介：摘要目的探讨ELISA法检测抗HCV的影响因素及相应对策。方法利用ELISA法，分别对无偿献血者血液标本进行抗HCV初检、复检两次检测；两次检测结果不符时，取相应标本，分别使用两家试剂进行双孔复试。结果11293份血液标本检测过程中，共有85份初复检结果不符，经双孔复试79份为阴性，6份为阳性。结论加强对血液标本、仪器设备、检测试剂的质量管理，建立标准操作规程以规范实验操作，可显著提高检测结果的准确性。