简介：摘要目的探讨在大肠杆菌中HCV重组基因的表达条件及临床应用。方法采用不同培养方式对含有丙肝炎症病毒E基因、C基因和NS基因进行重组表达，并将表达蛋白抗原进行提取、纯化，并采取一定操作对表达产物进行检测。结果经检测，重组表达物中含有特异性HCV抗原，对100份血清样本进行试验，其中50份为参比血清，其阴性检测符合率为96.0%，50分血清阳性检出率为92.0%。

简介：什么是基因重组？回答有多种说法。笔者认为，基因重组就是在原有基因类型的基础上，任何造成细胞基因型变化或基因在DNA分子上重排的过程。因此，就发生的层次来说，基因重组有DNA分子水平和细胞水平两个层次。DNA分子水平的基因重组，就是在原有基因类型的基础上，基因在DNA分子上发生排列顺序上的变化。细胞水平的基因重组，就是由于细胞整体的行为变化而发生的基因在整个细胞中发生重新组合的过程。因此，基因重组的结果使特定细胞中的基因种类、数量或在DNA分子上的排列顺序发生可遗传的改变，都可能会导致细胞代谢发生变化而影响生物性状的表现。

简介：自从1989年choo等首先建立了血清抗-HCV特异性检测方法以来,仅短短几年,HCV分子生物学的研究已有了长足的进展。经基因序列分析,根据毒株核苷酸序列的差异,可区分HCV的不同基因型。为了解哈尔滨地区的HCV基因型,我们对115份HCVRNA阳性血清聚合酶链反应产物进行酶切分析,兹将检测结果报告如下。

简介：目的调查分析273例HCV感染患者基因亚型构成，为临床HCV患者的抗病毒治疗方案选择提供依据，为HCV流行病学提供资料。方法收集武汉大学人民医院检验科自2011年3月至2014年5月273例HCV患者标本一代测序的HCVNS58基因测序结果，并将所测的HCVNS5B基因核苷酸序列在线比对．确定其基因亚型。结果经在线比对后发现273例HCV患者共有4种基因型，分别是1型，2型，3型和6型：6种基因亚型分别是la亚型3例（1．10％）、lb亚型208例（76．19％）、2a亚型41例（15．02％）、3a亚型3例（1．10％）、3b亚型12例（4．40％）和6a亚型6例（2．20％）。结论所收集的273例HCV分布情况和我国整体流行情况较一致，以lb亚型为主，其次为2a亚型，其他亚型少见。该分析为本地区HCV患者选择有效的个体化抗病毒治疗提供数据支持，为HCV的流行病学提供相关资料。

简介：目的比较HBVS基因与HCVC基因真核表达质粒融合基因免疫与联合基因免疫的效果，为HBV和HCV融合基因疫苗研究奠定基础。方法将同时含HBVS基因与HCVC基因的真核表达质粒SCpcDNA3.1、含HBVS基因真核表达质粒SpcDNA3.1、含HCVC基因真核表达质粒CpcDNA3．1分别免疫小鼠；将SpcDNA3.1+CpcDNA3.1联合免疫小鼠。ELISA法检测血清抗HBs和抗HCV。结果无论是抗HBs和抗HCV阳转出现的时间、阳转率和体液免疫应答强度，融合基因免疫都优于联合基因免疫：融合基因免疫的抗HBs的应答强度低于SpcDNA3．1质粒的免疫，抗HBc的应答强度高于CpcDNA3.1质粒的免疫。结论HCVC基因或其表达产物对HBVS基因或抗原的表达和提呈有抑制作用；HCVC基因与HBVS基因相融合，更有利于HCV核心蛋白的提呈。

简介：复习“基因突变和基因重组”这节内容时主要是通过基于常态下的教学教材,实现学生对基因突变的基本概念的掌握,从而加深对基因突变的内涵和外延的理解.基因重组内容涉及减数分裂过程,这一直是教学的难点,因此在复习过程中教师要注重对学生实际理解能力和图形分析能力的培养,通过实践提高学生的认知能力.

简介：目的比较三种含HBVS基因与HCVC基因嵌合真核表达质粒的免疫效果；为HBV和HCV嵌合基因疫苗研究奠定基础。方法将同时含HBVpreS1+preS2+S、preS2+S或S基因与HCVC区基因的真核表达质粒S1S2SCpcDNA3．1、S2SCpcDNA3、1、SCpcDNA3．1分别免疫小鼠，ELISA法检测血清抗HBs和抗HCV。结果两次免疫后，全部小鼠均产生了抗HBs和抗HCV，且抗HCV的产生水平高于抗HBs；S1S2SCpcDNA3．1和S2SCpcDNA3．1质粒免疫小鼠，产生抗HBs的水平低于SCpcDNA3．1，S2SCpcDNA3．1和SCpcDNA3．1质粒免疫的小鼠，产生的抗HCV水平高于S1S2SCpcDNA3．1。结论preS基因对抗HBs的产生、preS1基因对抗HCV的产生有负调控作用，说明不同长度的HBV表面抗原基因可以影响抗HBs和抗HCV的产生。

简介：目的构建针对人抑凋亡基因Livin的小干扰RNA（siRNA）重组表达质粒载体。方法通过分子克隆技术,设计并合成具有基因特异性的3组寡核苷酸片段,克隆到pmU6质粒载体,并经菌落PCR鉴定及测序鉴定,Livin的siRNA序列成功克隆到重组表达质粒载体中。结果经菌落PCR鉴定及测序鉴定证实,人Livin的siRNA序列成功克隆到表达载体中,插入序列正确。结论成功构建了LivinsiRNA质粒表达载体,为后续研究降低或沉默Livin基因表达后能否有效抑制膀胱癌细胞增殖和促进细胞凋亡奠定了基础。

简介：目的:利用Adeasy-1系统,构建并鉴定CARP基因重组腺病毒载体.方法:PCR扩增含有CARP全长cDNA的片段,经测序验证无误后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒.经过抗性筛选以及酶切鉴定得到阳性的重组质粒,再在293细胞中进行包装扩增,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:测序证实PCR产物为CARP全长cDNA;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;转染293细胞3天后可见绿色荧光,回收病毒可以重复感染293细胞,证明病毒包装成功.

简介：全程免疫后的时间与抗-HBs有效阳性率之间存在线性关系,　　2.2 接种后不同时间的HBsAg、抗-HBc、HBV感染情况 ,将各组之间有效阳性率回归分析发现全程免疫后的时间与抗-HBs有效阳性率之间存在线性关系(P＜0.01)

简介：对晚期胰腺癌这一“回天乏术”的恶性疾病，上海瑞金医院研究出一种新的治疗方法。在超声内镜引导下植入基因重组的人5型腺病毒治疗一例晚期胰腺癌患者，疗效观察发现具有缩小肿瘤体积、破坏肿瘤新生血管的作用，有望为晚期胰腺癌患者提供一种新的治疗手段。

简介：摘要肠道病毒（enterovirus，EV）可引起多种感染性疾病，临床表现复杂多样。作为RNA病毒，EV的RNA依赖的RNA聚合酶缺乏校对功能，导致其基因发生高频率的突变和重组，从而使EV获得进化优势，进而发生对宿主的免疫逃逸、对抗病毒药物的抗性，也可使病毒的传播力和致病性增强或组织嗜性发生改变。本文综述了EV的重组机制，并对部分重要型别和新型别EV的重组情况以及重组对病毒流行、致病性的影响进行了概述。

简介：摘要目的建立HCV基因分型方法，研究HCV基因型与肝病程度的关系，为丙肝诊断和治疗提供理论依据。方法HCV基因组NS5区PCR扩增产物酶切分型。结果酶切分型证实，53例为HCVⅡ型（1b），37例为HCVⅢ型（2a）。未发现Ⅰ型（1a）、Ⅳ型（2b）以及其他基因型。根据诊断标准，确诊为慢性丙肝46例，丙肝后肝硬化44例，未发现急性肝炎。HCV基因型与不同肝病程度的，按预定治疗方案对所确定的病例进行治疗，疗程期满，其治疗效果为CR34例，PR24例，NR32例。结论HCV基因型同肝病严重程度关系密切，并对抗病毒治疗影响重大。HCV基因分型对于患者的诊断及治疗具有重要指导意义。

简介：摘要目的探讨HCV基因分型在丙肝诊断及医学检验中的作用。方法将我院70例HCV基因分型阳性患者的血液样本进行基因检验。结果通过对两组患者的血液样本进行基因检验，得到HCV的基因型同患者患有丙肝疾病的时间及严重程度有着直接的联系，而且II型HCV患者发生肝硬化疾病的概率要远远高于其他类型；HCV基因型疾病的发生率与患者的性别及年龄没有直接的联系。结论HCV基因型与丙肝的患病程度有着密切的联系，对于其抗病毒治疗有着重要的意义。HCV基因分型在丙肝诊断及医学检验中有着重要的意义。

简介：摘要目的通过对HIV合并HCV感染者进行规范抗HCV治疗，了解在高效抗逆转录病毒治疗（HAART）基础上进行抗HCV治疗的疗效。方法经国家抗HIV确认实验室确诊为HIV感染同时HCV-RNA阳性患者30名，随机分为A、B两组，A组在进行HAART治疗的同时给予重组人干扰素α-2b注射液及利巴韦林胶囊进行抗HCV治疗，B组单纯给予HAART治疗，对治疗前后相关指标进行分析。结果A、B组HAART治疗疗效稳定，A组患者抗HCV早期病毒应答（EVR）率为60%，持续病毒学应答（SVR）率为33%。结论在HAART治疗基础上进行抗HCV治疗并不影响HAART疗效；HIV合并HCV感染者进行抗HCV治疗的疗效可；在未获得SVR的患者中，抗HCV治疗能使患者的临床症状改善。

简介：一、背景据WHO估计,全球HIV感染者已超过4000万.由于HIV与丙型肝炎病毒(HCV)有共同的传播途径,因而有大量的HIV感染者合并感染HCV.目前的研究显示,约有1/4～1/3的HIV感染者合并HCV感染[1],据此估计,全球约有近1000万的HIV/HCV合并感染者.

简介：目的了解2007—2012年广东省内HIV-1感染的静脉吸毒者（IDUs）中HCV基因型的种类和亚型分布情况。方法对2007—2012年HIV-1抗体阳性IDUs样本进行HCV抗体检测,对HCV抗体阳性样本提取RNA,用反转录巢式聚合酶链反应方法扩增HCV核心基因Core片段和非结构基因NS5B片段,目的片段测序后通过分子系统发育树进行基因型分析。结果209份样本分别来自惠州、东莞、阳江、云浮、清远、佛山、中山和江门,以阳江和东莞为主,占36.84%（77/209）,以男性为主,占93.78%（196/209）,年龄在18-49岁之间。HCV抗体阳性166份,阳性率为79.4%。进化树显示样本序列分别与标准株1a、1b、2a、3a、3b和6a等6种亚型聚集在一起,la、lb、2a、3a、3b、6a基因亚型构成比分别为10.6%、9.9%、1.4%、22.7%、11.3%、44.0%。结论6a是广东省内被检测HIV-1感染IDUs中HCV主要流行亚型,其次为3a亚型。

简介：目的：对比嗜酒与非嗜酒的慢性丙型肝炎（chronichepatitisC,CHC）患者HCVRNA基因型及分布,以明确嗜酒的CHC患者病情发展是否与某种特定基因型有关。检测CHC患者IFN-γ及TNF-α水平,了解嗜酒的HCV感染者肝损害的机制。方法：收集CHC患者114名,分为嗜酒组和非嗜酒组,以基因芯片技术对2组患者进行HCVRNA基因分型。采用Ficoll梯度离心法提取所有患者外周血单个核细胞（PBMC）并培养,ELISA法检测IFN-γ及TNF-α的水平。结果：嗜酒组和非嗜酒组HCVRNA的基因型均以1b型为主（嗜酒组的比例为60%,非嗜酒组为43.75%）,二者之间无统计学意义（P=0.22）。嗜酒组和非嗜酒组的HCVRNA定量测定分别为（11100±14174.3）×10^3mL^-1和（3927.8±4549.6）×10^3mL^-1,二者比较差异有统计学意义（P=0.025）。嗜酒组和非嗜酒组TNF-α水平分别为（4528±3587）ng/L和（3262±3131）ng/L,二者相比差异有统计学意义（P=0.048）,但2组IFN-γ水平差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：乙醇促CHC肝患者HCVRNA复制,导致肝损伤加重,但并不能增加慢性HCV感染者对某种HCVRNA基因型的易感性。TNF-α在嗜酒的CHC患者中起重要作用,是导致肝损害的重要细胞因子之一。

简介：目的构建ITIH4基因重组慢病毒干扰系统。方法选取干扰效果最佳的siRNA片段，设计shRNA结构，退火反应形成双链后采用T4DNA连结酶与线性化慢病毒载体Psico连接，转化大肠杆菌后提取质粒，并经质粒DNA测序和PCR鉴定重组质粒构建是否成功，转染293T细胞并测定培养上液的病毒滴度。结果测序结果显示，重组慢病毒干扰载体Psico／ITIH4测序结果与设计的shRNA序列完全一致，转染293T细胞后，其病毒滴度为9．5×10^3IU／mL。结论成功地构建了ITIH4基因的重组慢病毒系统，为今后深入研究ITIH4奠定了基础。

简介：摘要目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原与HCV抗体联合检测在筛查丙型肝炎的应用价值。方法统计HCV-Ag阳性标本的HCV逆转录PCR检测结果.结果HCV-Ag阳性标本经PCR测定HCVRNA阳性37例.结论HCV-Ag的检出时间早于抗体.HCV-Ag和HCV抗体联合检测,缩短了检测窗口期(PWP),有助于丙型肝炎的早期诊断。