学科分类
/ 25
500 个结果
  • 简介:摘要近年来,随着信息技术的不断发展,各类食品的安全问题也经常暴露在人们的视野中,应用PCR技术在食品检测方面能快速准确的检测出食品中蕴含的微生物,本文主要通过PCR技术在食品微生物检测中的优势和实际的应用情况,进行简要的分析,对于在食品安全检测方面引进PCR技术的重要性。

  • 标签: PCR技术 微生物 检测
  • 简介:【摘要】目的:主要了解荧光定量PCR技术应用到临床微生物检测所产生的具体价值。方法:随机选择进入到我院开展治疗的80例患者作为本次实验对象,通过应用荧光定量PCR技术来做好临床微生物检测,了解具体的临床微生物的实际情况。结果:荧光定量PCR技术临床检查效果非常好,数据准确性高,能够作为临床检测技术应用。结论:荧光定量PCR技术可以实现临床微生物检测,实际应用价值比较高。

  • 标签: PCR技术 临床微生物 检测 应用
  • 简介:为建立食品中副溶血性弧菌(VP)的PCR检测方法,选取tl基因作为靶序列设计一对引物,用该引物对14株从国内食品中分离的副溶血性弧菌(经传统方法验证)和30株非副溶血性弧菌进行PCR扩增,并用此方法对人工污染食品进行检测.扩增片段表现出极好的特异性,对人工污染的冷冻虾仁、沙丁鱼的检出限为10CFU/g,且与传统方法结果吻合.该方法适宜于食品中副溶血性孤菌的检测.

  • 标签: 食品 副溶血性弧菌 PCR技术 检测方法 分子生物学
  • 简介:为了提高抗病性分子标记检测的效率,为番茄病害检测及多抗品种选育提供技术依据,本研究通过改良CTAB法、96孔深孔板快速提取番茄微量叶片DNA;利用抗根结线虫病Mi标记,在L16(45)正交设计试验基础上,采用直观量化分析和方差分析两种方法,对番茄实用化PCR分子标记PCR反应的5个因素(引物,Mg2+,dNTPs,模板DNA和Taq酶)进行优化;随后分别筛选黄化曲叶病毒病、烟草花叶病毒病、根结线虫病、枯萎病、叶霉病和颈腐根腐病6种病害的8个实用化PCR分子标记PCR程序的退火温度;并对循环次数进行筛选;最后利用优化后的PCR体系与程序对供试的1442份番茄材料(包括番茄种质资源,群体材料,组合及品种)进行抗病性鉴定。结果表明番茄实用化PCR分子标记的PCR最佳反应体系(20μL)为引物0.5μmol/L、Mg2+1.5mmol/L、dNTPs0.3mmol/L、DNA480ngDNA、聚合酶1.0UTaq;PCR程序中8个分子标记共同最适退火温度为56℃,最佳循环次数为33次;筛选出585份多抗(含2种以上的抗病基因)番茄材料,可作为中间材料或亲本材料进行多抗品种选育。该实用化PCR分子标记的PCR体系的建立为番茄利用抗病基因分子标记检测与筛选多抗种质资源、品种或群体材料提供了标准化的程序。

  • 标签: 番茄 抗病基因 实用化PCR分子标记 正交设计 体系优化
  • 简介:Ahighlysensitiveelectrochemiluminescence-polymerasechainreaction(ECL-PCR)methodforK-raspointmutationdetectionisdeveloped.Briefly,K-rasoncogenewasamplifiedbyaRu(bpy)32+(TBR)-labeledforwardandabiotin-labeledreverseprimer,andfollowedbydigestionwithMvaIrestrictionenzyme,whichonlycutthewild-typeampliconcontainingitscuttingsite.Thedigestedproductwasthenadsorbedtothestreptavidin-coatedmicrobeadthroughthebiotinlabelanddetectedbyECLassay.TheexperimentresultsshowedthatthedifferentgenotypescanbeclearlydiscriminatedbyECL-PCRmethod.Itisusefulinpointmutationdetection,duetoitssensitivity,safety,andsimplicity.

  • 标签: Electrochemiluminescence-polymerase chain reaction K-RAS ONCOGENE Point
  • 简介:目的快速准确地检测副溶血性弧菌(VP)和伤寒沙门氏菌(ST).方法:根据VP的tdh基因和ST的H1-d基因顺序设计二对引物,通过聚合酶链反应检测食品或其它待检样品中的VP和ST,将扩增产物电泳.结果:分别出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的202和458bp的tdh和H1-d基因片断的条带,判定该样品中相应细菌为阳性.结论:本法特异性强、灵敏度高,能在24小时内出结果,可适用于食品或其它样品中VP和ST的快速检验.

  • 标签: 副溶血性弧菌 伤寒沙门氏菌 聚合酶链反应
  • 简介:【摘要】目的:研究在 临床细菌分析PCR检验法的应用 准确性。方法: 选取 2018 年 9 月至 2019 年 9 月收治并确诊的 70例细菌性阴道炎患者为研究对象,对所有患者阴道分泌物分别进行细菌培养法检验(参考组) 、 PCR检验(观察组) ,对比分析两组患者的检验结果。结果 观察组 的检出率显著高于参考组 ( P< 0.05)。观察组 中的链球菌、肠球菌以及戛纳杆菌检的检出率均高于参考组 的检出率( P< 0.05)。结论: PCR检验法检出率明显高于细菌培养法,临床意义更高,值得在临床上推广使用。

  • 标签: 细菌检验 PCR 准确性 检出率
  • 简介:随着现代分子生物学技术的发展,反转录聚合酶链式反应技术在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛。采用该技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒RNA,具有灵敏度高、特异性强等优点。在本研究中根据NCBIGenBank中收录的SPCSV病毒外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了3对特异性引物,使用天根生化科技(北京)有限公司生产的QuantOneStepRT-PCRkit试剂盒,针对影响扩增产物的影响因素退火温度进行优化,建立了甘薯退绿矮化病毒的RT-PCR检测方法。该方法使RT-PCR在一管内完成,大大降低了外源物质的污染及RNA降解的几率,可作为甘薯SPCSV病毒的快速检测方法。

  • 标签: 甘薯 退绿矮化病毒 RT-PCR检测技术
  • 简介:近年手足口病(hand-foot-mouthdisease)在儿童中流行情况较为严重,由肠道病毒感染引起,可经消化道、呼吸道传播,易造成流行[1]。主要表现为口腔黏膜溃疡性疱疹及四肢末端水疱样皮疹,主要病原为柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)[2]。1资料与方法1.1研究对象2009年南京儿童医院确诊为手足口病,持续发热并出现嗜睡、易惊、烦躁不安、抽搐等神经、呼吸系统症状,住院隔离治疗的患儿161例。男95例,女66例。年龄最小7个月,最大11岁。手足口病诊断标准参照卫生部办公厅《手足口病诊疗指南(2008年版)》[3]。1.2研究方法1.2.1标本采集征得患

  • 标签: 肠道病毒感染 手足口病 实时荧光定量 检测 柯萨奇病毒 咽拭子
  • 简介:Abstract:TheP24antigentest,HIVRNAPCRtest,HIVisolation/cultureandfourth-generationHIVuniformAg/AbassayarebeingutilizedindiagnosingacuteHIVinfectionindifferentlabs.ManyfactorslimittheuseofscreeningforacuteHIVinhigh-riskpopulations,inblooddonorsandduringvoluntaryHIVtesting,including,cost,technique,sensitivityandspecificity.InthisreviewweexploreanewNAATmethodwhichinvolvesHIVRNART-PCRonpooledsamples.Thistechniqueisabletoscreenforacuteinfectionsinalargetestingvolumeandmayheusedasascreeningmethodinhigh-riskpopulationsandblooddonors.

  • 标签: 公用池 RNA RT-PCR化验 诊断 急性HIV传染病 灵敏性
  • 简介:摘要:PCR温度控制系统的软件设计是PCR仪设计中非常重要的部分之一,其控温效果的好坏直接影响PCR仪基因扩增的成功与否。因而本文主要针对芯片级PCR中温度控制系统软件进行研究。关键词:聚合酶链式反应温度控制SOPC模糊自整定PID一、软件系统工作原理PCR仪中,最重要的部分是对反应温度的控制。PCR仪系统根据用户预先设定的参数来控制变温系统的反应温度。系统首先采集变温系统的当前温度,将当前温度和用户设定的变性温度进行对比,通过控制控制器的运算得到一个输出,将此输出加到被控对象上,使其温度上升至变性温度,达到变性温度后,根据输入的变性温度持续时间,控制变温系统温度持续时间。当此时间到达之后,进入下个反应的温度控制即退火温度的控制。执行完退火阶段温度控制后进入延伸阶段的温度控制。当执行完三个反应的温度控制后,一个循环周期结束,进入下一个循环周期。系统不断的重复控制三个温区的温度,当达到用户给定的循环次数后,反应结束……

  • 标签: 温度控制系统软件 系统软件设计 芯片级温度控制
  • 简介:犬细小病毒病感染是由犬细小病毒(cPv)引起犬只死亡的最重要传染病之一,目前诊断该病的方法主要是胶体金快速检测试板法,虽然检测方法较简便快速,但其敏感性较差。通过对NCBI网站GenBank发表的CPV-2基因组序列的分析,选择该病毒VP2基因保守序列设计引物,通过对阳性病料扩增及扩增产物测序,与NCBI发表的相关基因对比,同源性在99.8%-100%,成功建立了特异性、灵敏度高的PCR方法,最低只需2.5PgDNA模板。在对28例可疑CPV病例检测中,本方法检出25例阳性、3例阴性,阳性率为89.28%;胶体金检测板检测出20例阳性、8例阴性,阳性率为71.42%,证实PCR方法比胶体金检测更敏感。

  • 标签: 犬细小病毒 PCR 检测方法
  • 简介:摘要:本文从一工程项目实例着手,某三级甲等医院与外实验机构合作对医院原有PCR(Polymerase Chain Reaction)实验室进行了重新装修改造。在此项目施工过程中的一些经验总结出一些要点,以期为其他类似项目建设提供些许指导意义。

  • 标签: BA系统 一动力三循环 “3T”方法
  • 简介:摘要:近年来,随着信息技术的不断发展,网络上经常爆出食品安全问题。在食品微生物检测内,PCR技术(聚合酶链反应技术,polymerase chain reaction, 简称PCR)具有显著应用价值,可实现快速、精准检测食品内的微生物。本文探寻PCR技术在食物微生物检测内的应用,探寻PCR技术的潜在价值。

  • 标签: PCR技术 食品 微生物检测
  • 简介:摘要:手足口病是儿科的多发病和常见病,具有较高的传染性和流行性,通常发生在夏秋季节,以5岁以下的婴幼儿最为常见。其中,以手、足部出疹,口腔黏膜疱疹或溃疡等为特征性表现。一般情况下患儿在发病的5~7天自行缓解,也有少部分患儿会发展至重症,即出现脑膜炎、脑炎、脊髓炎、脑脊髓炎等中枢神经系统受累并发症,甚至伴有肺水肿、肺出血及循环衰竭等症状。危重症患儿与轻症患儿不同,因其病情进展较快,若不及时接受有效治疗,可危及生命安全。目前临床上诊断手足口病的金标准为病毒分离培养,虽然准确率高,但检测时间长,在现实应用过程中存在比较明显的缺陷,因此寻求一种操作简单、方便、费用低、准确率高、灵敏度高的检查方法十分必要。以PCR为基础的分子检测,具有准确率高、灵敏度高,适合临床的需求。

  • 标签: 荧光PCR 测序 手足口病 病毒
  • 简介:为建立暴马丁香ISSR-PCR最佳反应体系,本研究以暴马丁香基因组DNA为模板,首先通过单因子试验设计筛选出各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验,对暴马丁香ISSR-PCR反应有影响的模板DNA、dNTPs、Mg2+、TaqDNA聚合酶和引物浓度等5种因素4个水平进行了优化试验。暴马丁香的ISSR-PCR最佳反应体系最终确定为:在25μL的反应体系中,DNA模板是40ng,Mg2+浓度为2.0mmol/L,引物浓度为0.4μmol/L,TaqDNA聚合酶用量为1.5U,dNTPs浓度为0.2mmol/L。利用该体系从60条ISSR引物中筛选出了扩增条带清晰、多态性好的10条引物。这一体系的建立及多态性引物的筛选为以后利用ISSR分子标记技术进行暴马丁香的有关研究提供了科学依据。

  • 标签: 暴马丁香 ISSR-PCR 单因子试验 正交设计 引物筛选
  • 简介:摘要:食品和药品的检验工作是食品药品安全性的关键部分。聚合酶链式反应(PCR)技术的优点有:快捷、灵敏以及操作便捷等,因此它能够被广泛的应用于食品和药品的检测中。本文目的为探究PCR技术在食品药品检测中的应用价值。

  • 标签: PCR技术 食品 药品
  • 简介:摘要:目的:研究在乙型肝炎病毒临床检验中应用PCR技术的效果。方法:此次研究开展起止时间在2021年11月到2022年11月,随机抽选该时段我院诊治的66例乙型肝炎患者作为观察对象,以计算机抽签法作为分组方法,将其分成研讨组(33例)和参考组(33例)。在对乙肝病毒进行检测时,研讨组接受PCR技术检测,参考组接受酶联免疫吸附法检测,比较两组检测准确性、乙肝5项检测阳性率及不同浓度乙肝表面抗原检测重复率。结果:研讨组检出率、HBeAb阳性率、HBeAg阳性率、HBsAg阳性率均较参考组明显更高,且研讨组对低、中浓度HBsAg检验的批内和批间重复率均高于参考组,组间对比P<0.05,有统计分析意义。结论:PCR技术在乙型肝炎临床试验中的应用产生了显着的诊断效果,值得推广到乙型肝炎临床试验。

  • 标签: PCR技术 乙型肝炎 检验