简介：目的观察DNA拓扑异构酶Ⅱ（TOPOⅡ）在食管癌的表达，初步探讨其临床生物学意义。方法应用S-P免疫组织化学方法检测原发性食管癌103例，其中鳞状细胞癌100例，腺癌3例，癌周正常粘膜组织32例TOPDⅡ的表达。结果TOPOⅡ在食管癌的表达明显高于癌周组织，癌周鳞状上皮基底细胞可见少数核阳性表达。鳞状细胞癌高于腺癌的表达。食管鳞状细胞癌的分化程度与TOPOⅡ的表达呈正相关。结论TOPOⅡ在食管腺癌的表达低，符合其比食管鳞状细胞癌预后差。对放疗，化疗不敏感的事实。TOPOⅡ在高，中分化食管鳞状细胞癌的表达高于低分化者，提示食管鳞状细胞癌高分化者对拓扑异构酶抑制剂化疗药敏感，预后好。

简介：目的检测颅咽管瘤组织中DNA拓扑异构酶Ⅱα（DNATopoⅡα）的表达情况，分析其表达与肿瘤复发的关系，探讨其是否可作为判定颅咽管瘤预后的一个有效指标。方法设计前瞻性队列研究方案，采用免疫组化方法和图像分析技术测定63例颅咽管瘤组织切片中DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平，评价颅咽管瘤釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理亚型、复发组与非复发组、原发组与复发组之间肿瘤细胞的增殖能力。结果32例釉质上皮瘤14例复发，31例鳞状乳头瘤6例复发；釉质上皮瘤与鳞状乳头瘤病理哑型之间以及复发组与非复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平有显著性差异（P〈0．05），而原发组与复发组肿瘤之间DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平无统计学差异（P〉0．05）。结论颅咽管瘤的病理亚型以及DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平与肿瘤的预后和复发有关，可作为预测肿瘤复发危险性的一个参考指标；DNA拓扑异构酶Ⅱα的表达水平在原发组和复发组肿瘤之间无显著性差异，提示肿瘤在复发过程中瘤细胞的增殖活性无明显变化。

简介：目的：探讨钒配合物LMc对拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ（Topo-Ⅰ、Topo-Ⅱ）的影响及其抗肿瘤活性。方法：采用DNA松弛实验观察LMC对Topo-Ⅰ、活性的影响并探讨其相关分子作用机制；采用MTT法、流式细胞术在细胞水平观察了IMC的抗肿瘤作用。结果：LMC可明显抑制Topo-Ⅰ活性，对Topo-Ⅱ无明显抑制作用，对多种肿瘤细胞株A549、Hela、BEL-7402具有明显抑制生长的作用，且可将细胞阻断在G2／M期，而对正常细胞株L-02生长无明显影响。结论：钒配合物LMC具有抑制Topo-Ⅰ活性而发挥抗肿瘤的作用。

简介：【目的】研究新型拓扑异构酶Ⅱ抑制剂PPO-1对多种肿瘤细胞株的抑制作用，并初步探讨其作用机制。[方法]MTY法检测PPO-1的体外抗肿瘤活性；光学显微镜观察PPO-1作用后肿瘤细胞形态结构的变化；琼脂糖凝胶电泳分析PPO-1对K562细胞染色体DNA断裂的影响；RT—PCR法检测不同浓度PPO-1（1．0，2．0，4．0μmol／L）对K562细胞caspase-3、topoⅡα／、topoⅡβmRNA表达的影响。【结果】MTT法检测发现PPO-1对多种肿瘤细胞均有较好的活性，IC50为1．41—5．96μmol／L，Giemsa染色发现其出现了典型的凋亡现象，提取总DNA进行琼脂糖凝胶电泳，呈现显著“DNA梯子”，RT—PCR结果显示PPO-1可上调caspase-3及topoⅡdmRNA的表达。【结论】与阳性对照药依托泊苷相比，PPO-1在体外能够抑制多种人源性肿瘤细胞，其抗肿瘤作用机制可能与（1）caspase途径：上调caspase-3基因表达；（2）上调topoⅡα基因表达，抑制topoⅡα催化活性有关。

简介：摘要目的探讨在乳腺癌中人类表皮生长因子受体HER－２/neu和拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)之间的关系,及其与临床病理因素之间的相关性.方法利用实时定量聚合酶链式反应(RQ－PCR)对９６例患者进行检测来评估基因扩增水平,采用免疫组织化学(IHC)微阵列(n＝７６)来检查基因扩增和蛋白质表达水平之间是否存在相互关系.结果根据RQ－PCR或IHC微阵列取得的HER－２/neu基因状态,TOP２A基因的扩增水平并不存在显著差异.结论我们的研究结果表明乳腺癌中TOP２A基因的扩增并不局限于带有HER－２/neu＋基因型的人,并且表明很大比例的HER－２/neu－基因型患者表现出具有高水平的TOP２A基因.关键词乳腺癌;拓扑异构酶;表皮生长因子;TOP２A;HER－２/neu中图分类号R７３７文献标识码B文章编号１００８－６３１５(２０１５)１２－１２５６－０１

简介：摘要目的探讨拓扑异构酶I抑制剂喜树碱对AP小鼠胰腺腺泡细胞和肺组织的保护机制。方法18只Balb/C雄性小鼠按照数字表法随机分为对照组、AP组和喜树碱干预组(喜树碱组)。AP组采用腹腔注射雨蛙肽和脂多糖的方法制备AP模型，喜树碱组于制模前腹腔注射50 mg/kg喜树碱，对照组腹腔注射等体积生理盐水。常规行胰腺和肺组织病理学检查。分别采用ELISA法检测血清淀粉酶和脂肪酶水平；荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰腺组织炎症因子IL-1、IL-6 mRNA表达量；免疫组织化学法检测胰腺和肺组织CD45+炎症细胞浸润以及胰腺组织程序性坏死标志蛋白混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)磷酸化水平；TUNEL法检测胰腺组织细胞凋亡指数。结果喜树碱组的胰腺组织病理评分、肺组织病理评分、血清淀粉酶和脂肪酶含量分别为(2.30±0.31)分、(2.29±0.34)分、(1742.33±183.51)U/L和(46.90±2.17)U/L，均显著低于AP组的(5.06±0.88)分、(3.40±0.09)分、(2385.33±383.10)U/L和(69.13±9.76)U/L；胰腺组织IL-1、IL-6 mRNA表达量分别为95.79±48.11、255.50±213.32，均显著低于AP组的212.35±80.61、1006.80±509.06；胰腺和肺组织CD45+细胞数分别为(14.25±5.32)、(29.20±4.44)个/高倍视野，均显著低于AP组的(59.83±13.67)、(58.25±5.91)个/高倍视野。与AP组比较，喜树碱组胰腺组织细胞凋亡指数显著升高[(3.64±1.16)%比(1.92±0.29)%]，磷酸化MLKL蛋白免疫组织化学评分显著降低[(1.75±0.20)分比(4.53±1.28)分]，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论拓扑异构酶I抑制剂喜树碱可能通过诱导胰腺腺泡细胞凋亡并抑制腺泡细胞坏死重塑AP小鼠腺泡细胞死亡方式，进而减轻胰腺局部损伤及急性胰腺炎相关肺损伤。

简介：摘要拓扑异构酶Ⅱα(TOP2A)是DNA复制和转录中的关键酶，是肿瘤细胞的增殖标志和蒽环类药物的作用靶点，在生物学过程中发挥着重要作用。虽然目前大量研究表明TOP2A基因扩增与蒽环类药物化疗疗效密切相关，但是TOP2A蛋白表达对蒽环类药物化疗疗效的预测作用和对乳腺癌的预后价值尚存在争议，因此，笔者对TOP2A蛋白的上述预测及预后价值进行介绍。

简介：目的研究拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对耐阿霉素淋巴瘤细胞株（L1210/ADM）的杀伤和诱导凋亡的作用.方法采用噻唑蓝（MTT法）、钙依赖性磷脂结合蛋白（AnnexinV）染色、梯状DNA电泳与细胞形态学观察等方法分析不同浓度（0.05、0.10、0.20、0.40μmol/L）拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞的杀伤和凋亡作用,采用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）8、Caspase-3抑制剂IETD-fmk、DEVD-CHO分析拓扑异构酶Ⅰ抑制剂介导的靶细胞杀伤和凋亡作用与Caspase的关系.结果0.10μmol/L拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对靶细胞株的杀伤作用,与对照组和0.05μmol/L组之间差异均有统计学意义（均P＜0.05）.加用Caspase酶特异性抑制剂3组各时间点的靶细胞存活率均高于单用拓扑异构酶Ⅰ抑制剂组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.靶细胞株经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理后,部分靶细胞株出现了细胞凋亡;加用Caspase酶特异性抑制剂组中,有部分细胞死亡,但无凋亡小体形成,死亡细胞均为锥虫蓝染色.经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理的靶细胞株大部分细胞出现胞体解离,并彼此黏附成簇状的、锥虫蓝拒染的凋亡小体,靶细胞株DNA电泳表现为特征性梯状图谱;加入Caspase酶特异性抑制剂的各组可以看到阻断了梯状DNA的产生.结论拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞株具有较强的杀伤和诱导凋亡作用,其机制可能涉及Caspase-8、Caspase-3的有序性活化.

简介：目的探讨P53蛋白、Ⅱ型拓扑异构酶（TopoⅡ）及多重耐药相关蛋白（MRP）在合并慢性血吸虫病与非血吸虫病结直肠癌患者中的表达。方法采用回顾性病例对照研究方法。收集2008年1月至2010年12月浙江省肿瘤医院收治的338例结直肠癌患者的临床病理资料。收集患者手术切除的结直肠癌组织。338例患者中，80例合并慢性血吸虫病，258例不合并慢性血吸虫病。采用免疫组织化学染色检测结直肠癌组织中P53、TopoⅡ、MRP蛋白表达。等级资料以百分比表示，采用非参数检验。结果P53蛋白阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达率在合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为5．00％（4／80）、87．50％（70／80）、3．75％（3／80）、3．75％（3／80），在不合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为28．68％（74／258）、19．38％（50／258）、16．67％（43／258）、35．27％（91／258），两者比较，差异有统计学意义（Z=-2．962，P〈0．05）。TopoⅡ蛋白阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达率在合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为8．75％（7／80）、51．25％（41／80）、22．50％（18／80）、17．50％（14／80），在不合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为12．01％（31／258）、55．43％（143／258）、22．48％（58／258）、10．08％（26／258），两者比较，差异无统计学意义（Z=-1．551，P〉0．05）。MRP蛋白阴性、弱阳性、阳性、强阳性表达率在合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为7．50％（6／80）、40．00％（32／80）、28．75％（23／80）、23．75％（19／80），在不合并慢性血吸虫病的结直肠癌组织中分别为24．42％（63／258）、38．37％（99／258）、24．03％（62／258）、13．18％（34／258），两者比较，差异有统计学意义（Z=-3．408，P〈0．05）。结论P53蛋白和MRP蛋白在合并慢性血�

简介：拓扑关系是一种非常重要的空间关系，在地理信息系统(GIS)中，被广泛地应用于空间查询、空间分析和空间推理。目前，已经提出了多种模型来对空间对象间的拓扑关系进行描述。在GIS中，空间对象包括单一(简单或复杂)的空间对象、同构的几何集合对象和异构的几何集合对象。目前国际上

简介：目的探讨原发性乳腺癌谷胱甘肽-s-转移酶-π（GST-π）、P-糖蛋白（P—gP）和拓扑异构酶-Ⅱ（TOPO-Ⅱ）的表达及其与化疗的关系。方法通过免疫组织化学方法检测了84例原发性乳腺癌中56例术前未经任何抗肿瘤治疗组和28例术前辅助化疗组的肿瘤组织中GST-π、P—gP和TOPO—Ⅱ的表达情况。同时比较了28例术前辅助化疗组化疗前后乳腺癌组织中三者的表达阳性率。成组设计和配对设计的计数资料采用X^2检验。结果乳腺癌组织中GST-π、P-gP和TOPO—Ⅱ表达与各病理因素无关（P〉0．050）；28例术前化疗组化疗前组织中的GST-π、P-gP和TOPO-Ⅱ的阳性表达率与56例未化疗组标本的阳性率差异无统计学意义（X^2值和P值分别为0．45，0．504；0．41，0．532；1．20，0．273），但与化疗后组织中蛋白表达阳性率的差异有统计意义（X^2值和P值分别为4．57，0．033；3．90，0．048；4．98，0．026），GST-π和P-gP的表达较化疗前明显增多，但TOPO-Ⅱ的表达呈下降趋势。结论化疗影响了原发性乳腺癌组织中GST-π、P—gP、TOPO-Ⅱ的蛋白表达。监测其表达对乳腺癌化疗有一定的指导意义。

简介：聚合酶链式反应（PCR）技术的问世和发展是分子生物学研究领域中最重要的进步之一.在PCR技术中,DNA聚合酶起着至关重要的作用,从某种意义上说,DNA聚合酶的研究进展决定着PCR技术的发展趋势和应用范围,研究者们一直在努力探寻着酶学性能好、保真度高的PCR用DNA聚合酶.高中生物人教版选修1和选修3都对PCR技术的原理和过程作了详尽的介绍,但对热稳定DNA聚合酶的描述极少,仅仅提及Taq酶.因此,有必要对PCR用DNA聚合酶的基本类型和特点进行分析归纳.

简介：

简介：1题目人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图2所示。

简介：摘要葡萄糖磷酸异构酶（glucose phosphate isomerase，GPI）缺乏症是一种常染色体隐性遗传病，可引起遗传性非球形红细胞性溶血性贫血，严重可致胎儿宫内死亡。本文报道1例以皮肤黄染起病的新生儿GPI缺乏症，基因检测发现两个新发位点，予及时干预后，随访至16个月，智力运动发育正常。

简介：单细胞淡水绿藻-雨生红球藻能够在一定条件积累一种次生类胡萝卜素-虾青素，因而在生长后期藻体变为深红色。其中，IPP异构酶在雨生红球藻中的虾青素合成过程中发挥了重要作用。在本研究中，我们首次通过基因组上游步移克隆到了雨生红球藻中IPP异构酶基因的两个不同5’上游侧翼序列，大小分别是1．8kb和2．5kb。利用生物信息学方法分别对这两个不同5’上游侧翼序列进行了序列分析，结果发现，二者具有某些相同的顺式作用元件，如可能的脱落酸反应元件（ABRE）、干燥或低温反应元件（DRE／C-repeat）、几种光反应元件（G-box，GAG-motif，I-boxandATC-motif）、热激反应元件（HSE）、机械伤害反应元件（WUN-motif）、水杨酸反应元件（TCA-element）、生长素反应元件（TGA-element）、茉莉酸甲酯反应元件（TGACG-element）、缺氧特异反应中的增强子类似元件（GC-motif）和反式作用因子MYB蛋白的结合位点（MBSandMRE），但是二者并不具有典型的TATA框和CCAAT框。上述研究预示了雨生红球藻虾青素合成中IPP异构酶基因转录调控方式的多样化。

简介：摘要目的研究乙肝标志物与HBV-DNA定量和肝酶的相关性。方法选取我院收治乙肝患者187例，将其空腹血清送检，分析乙肝标志物与HBV-DNA定量和肝酶的相关性。结果本组A组和C组阳性率最高，A组的AKP，B组的ALT、GGT、AKP均有相关性。结论乙肝血清标志物、肝脏酶检测、HBV-DNA均可作用于了解乙肝患者情况，是具有临床价值的检测指标。

简介：单细胞淡水绿藻—雨生红球藻能够在一定条件积累一种次生类胡萝卜素—虾青素,因而在生长后期藻体变为深红色。其中,IPP异构酶在雨生红球藻中的虾青素合成过程中发挥了重要作用。在本研究中,我们首次通过基因组上游步移克隆到了雨生红球藻中IPP异构酶基因的两个不同5’上游侧翼序列,大小分别是1.8kb和2.5kb。利用生物信息学方法分别对这两个不同5′上游侧翼序列进行了序列分析,结果发现,二者具有某些相同的顺式作用元件,如可能的脱落酸反应元件(ABRE)、干燥或低温反应元件(DRE/C-repeat)、几种光反应元件(G-box,GAG-motif,I-boxandATC-motif)、热激反应元件(HSE)、机械伤害反应元件(WUN-motif)、水杨酸反应元件(TCA-element)、生长素反应元件(TGA-element)、茉莉酸甲酯反应元件(TGACG-element)、缺氧特异反应中的增强子类似元件(GC-motif)和反式作用因子MYB蛋白的结合位点(MBSandMRE),但是二者并不具有典型的TATA框和CCAAT框。上述研究预示了雨生红球藻虾青素合成中IPP异构酶基因转录调控方式的多样化。更多还原

简介：在模拟人体生理条件下，采用紫外光谱法、荧光光谱法、DNA热变性及黏度法研究欧前胡素及同分异构体异欧前胡素与DNA的作用机制，并探讨其构效关系．紫外光谱表明，加入DNA后，欧前胡素和异欧前胡素的紫外光谱均呈现减色效应；荧光光谱显示，随着欧前胡素或异欧前胡素浓度的增大，DNA—BR的荧光被猝灭，表明欧前胡素和异欧前胡素对BR与DNA的结合存在竞争性抑制；盐效应、DNA热变性温度、黏度法等实验进一步证明欧前胡素和异欧前胡素与DNA的作用模式均为嵌插与静电混合作用模式．研究表明，欧前胡素和异欧前胡素均与DNA发生作用，且欧前胡素与DNA作用强于异欧前胡素．

简介：摘要目的分析聚合酶链对肝硬化患者腹水细菌DNA的检测效果。方法选择细菌通用引物，引入到16SrRNA基因保守区，本次研究中，选择48例腹水样本，对样本行PCR扩增处理和阳性阴性对照实验。分析实验结果。结果在分析48例标本时，在15例标本中获得了370bpDNA片段，进过检测，阳性率为31.25%。而阴性和空白对照标本则并未体现出特异性。在PCR扩增后，可以检测出10pgDNA。结论在肝硬化腹水患者的检测中，采用聚合酶链技术，可以达到特异性和敏感性的需求，便于检测患者的细菌情况，具有较高的临床诊断价值。