简介:目的获得东方田鼠的特异DNA序列.方法Aβ基因使用PCR,基因克隆,斑点杂交,DNA序列分析,生物信息学技术.结果根据小鼠MHCⅡ外显子2及其两侧序列,合成引物并扩增东方田鼠基因组DNA,将PCR产物回收、测序后,分别设计内引物扩增东方田鼠基因组DNA,其中一对引物可得到特异性扩增带,将得到的DNA片段插入PGEM-Teasy载体,进行序列分析.用这对引物扩增人、昆明小鼠、BALB/c小鼠及C57BL/6J小鼠基因组DNA,均无扩增产物.以东方田鼠特异性扩增产物为探针进行斑点杂交,除东方田鼠基因组DNA外,其他几种动物基因组DNA均为阴性结果.进一步对该DNA片段进行了BLAST同源性搜索和外显子预测,在Genbank中没有发现高度同源序列,并且找到一个可能的外显子,该外显子由69个氨基酸组成.结论获得的DNA片段为东方田鼠的特异片段,这将为从分子水平深入研究东方田鼠的遗传背景、生物进化规律以及东方田鼠抗日本血吸虫的机理奠定基础.
简介:目的对我国登革2型病毒1998年广东省南海市流行株GD08/98结构蛋白基因进行序列测定及分析,为追踪其地域来源、基因组结构与致病性的关系及研究开发登革病毒新型疫苗奠定基础.方法根据登革2型国际标准株NGC序列,设计2对重叠引物,RT-PCR扩增,分别克隆到pMD18-T载体,转化受体菌DH5α,挑取阳性克隆进行PCR、酶切鉴定及序列测定.结果此登革病毒株结构蛋白基因序列长度为2325bp,编码775个氨基酸.与其它登革2型病毒株ThNH81/93、NGC、44、TSV01、04及S1进行比较,其核酸序列同源性分别为98%、94%、94%、92%、92%、90%.结论GD08/98病毒株的结构基因序列基本类似于已发表的其它登革2型病毒株.GD08/98株与ThNH81/93株同源性最高,推测其可能来源于泰国.
简介:目的探讨DNA修复基因MGMT和hMLT1在乳腺癌组织中的表达与病人年龄,肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、癌组织分级、ER和PR受体及5年生存率的关系。方法应用免疫组织化学法,检测40例乳腺癌组织中MGMT和hMLT1蛋白表达。结果40例乳腺癌组织中MGMT表达阴性9例(22.5%),hMLT1表达阴性12例(30%)。对照组良性乳腺疾病组织均表达MGMT和hMLT1。癌组织同时不表达MGMT和hMLT1的乳腺癌病人有7例(17.5%),其5年生存率明显低于同时表达MGMT和hMLT126例乳腺癌病人(69.0%)(P<0.05)。MGMT和hMLT1在乳腺癌组织的表达与病人年龄、肿瘤大小、淋巴结转移,TNM分期、癌组织分级和激素受体状态等临床指标均无关(P均>0.05)。结论MGMT和hML腺疾病组织均有表达,在乳腺癌组织中有22.5%和30.0%不表达。二种DNA修复基因表达阴性的乳腺癌病人预后较差,提示联合检测MGMT和hMLT1两种DNA修复基因可作为判断乳癌预后的指标.
简介:CleavageofchromosomalDNAintooligonucleosomalsizefragmentsisanintegralpartofapoptosis.ElegantbiochemicalworkidentifiedtheDNAfragmentationfactor(DFF)asamajorapoptoticendonucleaseforDNAfragmentationinvitroGeneticstudiesinmicesupporttheimportenceofDFFinDNAfragmentationandpossiblyinapoptosisinvivo.RecentworkalsosuggeststheexistenceofadditionalendonucleasesforDNAdegradation.Understandingtherolesofindividualendonucleasesinapoptosis,andhowtheymightcoordinatetodegradeDNAindifferenttissuesduringnormaldevelopmentandhomeostasis,aswellasinvariousdiseasedstates,willbeamajorresearchfocusinthenearfuture.
简介:<正>Apoptosisisahighlyregulatedphysiologicalprocesscriticalindevelopmentandtissuehomeostasis.Abnormalapoptosiscanleadtodiseaseconditionsincludingneurodegeneration,autoimmunityandcancer.DNAfragmentationisanintegralpartofapoptosisandhaslongbeensuspectedtobeofcriticalimportanceincleaninguppotentiallyantigenicDNAandgeneticmaterialcapableofinducingneoplasmictransformationinneighboringcells.DirectevidenceforthisfunctionofDNAfragmentationhowever,isstilllacking.TheidentificationofaheterodimericDNAfragmentationfactor45and40(DFF45andDFF40,alsocalledICADforInhibitorofCaspaseActivatedDNaseandCADforCaspaseActivatedDNaserespectively)aswellas