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  • 简介:摘要利用在原核生物中观察到的规律成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)与相关的Cas(CRISPR- associated proteins)蛋白构成CRISPR-Cas系统作为真核细胞中的基因编辑工具为近年研究热点。效应蛋白由多个Cas蛋白组成,包括两个大类五型系统。Cas蛋白结合特定的核酸序列,具有核酸酶的功能用于可编程基因组编辑和表观遗传调控,同时在疾病诊断方面也有很好的发展前景。其中Cas6是一种独立于金属的单转位酶,依附在crRNA裂解产物上,可识别并在crRNA转录前的重复序列中裂解单个磷酸二酯键。核糖核酸内切酶Cas9为RNA引导的DNA裂解酶,是目前应用最广泛的基因编辑工具,同时在感染性疾病检测、癌性病毒感染的消除或灭活、肿瘤免疫治疗、肿瘤基因组和表观基因组的调控等方面显示出巨大的应用前景。RNA引导的核酸内切酶Cas12a具有两种不同的核酸酶活性,且该双重催化活性已被用于多重基因编辑。Cas12a的显著特性使其应用于目标DNA与RNA快速检测,成为CRISPR-Cas基因组编辑工具包的补充。RNA引导的RNA靶向核酸内切酶Cas13a是RNA引导、RNA激活的RNA酶,已被开发为RNA检测、RNA成像和RNA调控的强大工具,同时利用Cas13a构建高灵敏度及特异度的检测方法也可为感染性疾病在诊断过程中提供重要的理论依据。由此展开对CRISPR-Cas系统相关的Cas蛋白的深入研究,同时对上述系统在不同疾病中的重要应用等进行阐述,有助于为各项研究提供新思路,新方法。

  • 标签: 规律成簇的间隔短回文重复序列 Cas蛋白 检测 基因编辑
  • 简介:基因治疗是为网膜的退化疾病的潜在地有效的治疗。定期聚类interspaced短palindromic重复(CRISPR)/CRISPR-associated蛋白质9(Cas9)系统在眼的研究作为一个新编辑染色体的工具被开发了。在研究的最近的进展证明CRISPR/Cas9在在视网膜炎pigmentosa(RP)和leber的vivo产生动物模型以及基因治疗被使用了先天的黑(LCA)。它被与象联系adeno的病毒(AAV)那样的另外的技术结合也为诊所作为一次潜在的尝试显示出并且导致pluripotent干细胞(iPSCs)。在这评论,我们加亮在指向网膜的退化使用CRISPR/Cas9的进一步的前景的主要的点。我们也在治疗网膜的退化疾病强调这种技术的潜在的应用程序。

  • 标签: CRISPR/Cas9 基因治疗 编辑的染色体 网膜的退化 视网膜炎 pigmentosa leber 先天的黑
  • 简介:AbstractGenome editing serves as a powerful approach to interrogate the functions of both coding and noncoding sequences. In particular, clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/CRISPR associated protein 9 (Cas9) system-based editing tools have revolutionized the way we study genome function in mammalian cells, and are being widely used for interrogating critical genes and DNA elements essential for many biological processes. Here, we review CRISPR/Cas9-based genetic tools with an emphasis on CRISPR-mediated high throughput genetic screens in the mammalian genome.

  • 标签: CRISPR/Cas9 genetic tools genome function high-throughput screens mammalian cells
  • 简介:CRISPR/CAS系统,原核生物,尤其是细菌的免疫系统,在抵抗外源性遗传物质如噬菌体病毒和外源质粒的入侵中起着一定的作用。也为其提供了后天免疫的功能,类似于哺乳动物的二次免疫。当细菌被病毒或外源性质粒入侵时,它们产生"记忆",从而抵御反复入侵。本文就CRISPR/Cas免疫方面的功能与进展进行了大致的概括。

  • 标签: CRISPR/Cas 外源遗传物质 获得性免疫
  • 简介:摘要自CRISPR/Cas9问世以来,基因编辑技术愈发受到关注,尤其是核酸酶仅由单一蛋白组成的Ⅱ类系统,其功能蛋白包括Ⅱ型Cas9、Ⅴ型Cas12和Ⅵ型Cas13等,可以精准编辑基因组DNA或RNA。失活型CRISPR/Cas9突变体还能够将转录因子、表观遗传因子或碱基修饰酶等效应元件特异性地募集至目标基因位点发挥功能。此外,光遗传学技术能够从时间和空间水平精确地控制生物反应。结合CRISPR和光遗传学技术可实现细胞和动物体内的动态化时空特异性基因编辑,在生物学和医学领域发挥巨大的应用潜力。本文综述了光控CRISPR系统的研究进展,介绍其设计方法和应用策略,讨论其局限性,为这一新兴领域的发展提供参考。

  • 标签: CRISPR/Cas9 光遗传学 基因编辑
  • 简介:据BerteroA2016年12月1日[Development,2016,143(23):4405—4418.]报道,英国韦尔科姆基金会桑格研究所和剑桥大学的研究人员构建出一种更加高效的和可控的CRISPR基因组编辑平台——80蹦K0或sOPTiKD。该优化单步骤系统能了解基因如何在体内每个细胞和每个发育步骤中发挥作用。该新方法将有助科学家们开展发育生物学、组织再生和癌症研究。

  • 标签: 发育生物学 PR基因 编辑 人类 研究人员 组织再生
  • 简介:Precisebaseeditingishighlydesiredinplantfunctionalgenomicresearchandcropmolecularbreeding.Inthisstudy,weconstructedarice-codonoptimizedadeninebaseeditor(ABE)-nCas9toolthatinducedtargetedA·TtoG·Cpointmutationofakeysinglenucleotidepolymorphismsiteinanimportantagriculturalgene.Combinedwiththemodifiedsingle-guideRNAvariant,ourplantABEtoolcanefficientlyachieveadeninebaseeditinginthericegenome.

  • 标签: PRECISE optimized ADENINE AGRICULTURAL GENE
  • 简介:设计习俗的核酸酶技术例如定期聚类短palindromic重复(CRISPR)联系了的interspaced(Cas)系统提供为昆虫编辑工具的吸引人的染色体功能的遗传。指向的基因mutagenesis由CRISPR/Cas9系统调停了在包括的几份昆虫订单被完成了双翅目,鳞翅目和翘目。然而,小成功都没在这些由于genomic信息和胚胎的microinjection技术的缺乏在农业害虫被报导昆虫种类。这里,我们报导CRISPR/Cas9系统在重要鳞翅类的害虫Spodopteralitura导致了有效基因mutagenesis。我们指向了S。litura腹A(Slabd--一)是重要胚胎的发展基因并且在决定昆虫的腹的片断的身份起一个重要作用的基因。指导Cas9送信人RNA和Slabd-A-specific单人赛领队RNA(sgRNA)的注射进S。成功地导致的litura胚胎典型abd--缺乏的显型,它在幼虫的阶段期间显示出异常分割和宫外的色素沉着。聚合酶链基于反应的分析表明Cas9/sgRNA建筑群有效地在S导致了指向的mutagenesis。litura。这些结果证明CRISPR/Cas9系统是为在象S那样的鳞翅类的害虫的染色体操作的一个强大的工具。litura。

  • 标签: 斜纹夜蛾 基因突变 介导 基因组信息 鳞翅目害虫 信使RNA
  • 简介:摘要:习总书记强调:“牢固树立改革创新意识,踊跃投身教育创新实践。”我国著名学前教育家陈鹤琴先生曾说:“小孩子是生来好动的,是以游戏为生命的。”通过最新的基因编辑技术,打造《基因编辑探索者》,一个以基因编辑为主题的模拟游戏。游戏通过简单操作和引人入胜的剧情,科普基因编辑知识。玩家扮演年轻科学家,在虚拟世界中进行基因编辑实验和探索,解决挑战和任务,培养科学思维和创新能力。游戏提供科学资讯和最新研究进展,引导玩家做出明智选择。以娱乐方式普及基因编辑知识,激发年轻人对科学的兴趣,提高科学素养。

  • 标签: 养成模拟类游戏 基因编辑大师
  • 简介:摘要  利用植物分子生物学基因编辑技术可以有效地靶向DNA病毒和RNA病毒序列,提高寄主植物对病毒的抵抗力。此外,利用植物分子生物学基因编辑技术(CRISPR/Cas)靶向病毒侵染或复制所需的植物内源基因可研制新的抗病毒种质资源。本文论证了基因编辑技术(CRISPR/Cas)和利用其开展抗病毒研究的进展和实例,同时讨论了病毒诱导的基因编辑系统的应用前景,并对CRISPR/Cas基因编辑技术在植物病毒研究中的优势与挑战进行了展望,为利用基因编辑技术进行抗病毒种质创新提供了指导。

  • 标签:   CRISPR/Cas基因编辑技术 病毒诱导的基因编辑系统 抗病毒工程 DNA病毒 RNA病毒
  • 简介:摘要鉴于目前核酸分子检测技术逐步从临床实验室向现场检测转移的发展趋势,急需建立一种高灵敏、高特异、高效和便捷的新型核酸诊断工具来满足临床即时检测(POCT)的需要。基于规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)的检测方法是一种有前景的新型核酸检测方法。该方法中Cas效应蛋白能够识别高度特异的核酸序列,通过联合高灵敏小型生物传感器运用于POCT,在满足高灵敏性和高特异性的同时具备了检测的高效、便捷的特点。本文综述了近几年基于CRISPR/Cas技术集成小型现场分析传感器相关领域的进展,并讨论了POCT相关检测的研究前景及挑战。

  • 标签: 即时检测 规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白 核酸检测 分子诊断技术
  • 简介:摘要规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)和CRISPR相关蛋白9(CRISPR associated protein,Cas9)组成的CRISPR/Cas9系统是大多数细菌和古细菌的一种免疫系统。该系统在动物模型构建、基因治疗和基因表达调控等众多领域发挥着强大的作用。但该系统的脱靶效应等原因所导致的效率低下和安全性问题一直是人们研究的重点。本文主要对CRISPR/Cas9系统从sgRNA、Cas9蛋白、递送系统、DSB修复通路、脱靶检测手段以及碱基编辑技术六个方面提高其编辑效率的改进方法进行综述。

  • 标签: CRISPR/Cas9 基因编辑 脱靶效应 改进 编辑效率
  • 简介:CRISPR/CAS,即有规律的重复的间隔短回文重复/有关蛋白核酸酶,是最近几年研究发现的一种新型基因编辑技术,通过脱氧核糖核酸的剪切,可以治疗人体罹患的多种病症,这种新兴技术的操作较为便捷,突变效率较高,且成本较低,现已普遍运用于各类生物医学等相关领域,获得了革命性的改变。本文针对新型的基因编辑技术应用于生物医学相关领域的研究进行探讨,对有规律的重复的间隔短回文重复/有关蛋白核酸酶系统的作用原理和技术流程以及相关研究进程和应用前景进行介绍,希望可以为有关领域的科研员提供借鉴和相关参考。

  • 标签: 有规律的重复的间隔短回文重复/有关蛋白核酸酶技术 生物医学研究 应用
  • 简介:摘要目前核酸检测技术已被广泛应用于临床实验室诊断,常规检测技术如实时荧光定量PCR技术耗时长且依赖特定的仪器设备。成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白(Cas)系统是细菌和古细菌在与病毒斗争过程中获得的适应性免疫防御机制,已被发展成强大的基因组编辑技术。最近CRISPR领域的先驱团队基于Cas13a、Cas12a和新发现的Cas14蛋白开发出SHERLOCK、DETECTR等新型核酸检测工具,在传染性疾病的快速诊断、癌症中基因突变的检测和基因分型等方面意义重大,其灵敏度高、特异性强且快速经济,在临床分子诊断领域具有巨大潜力。本文综述了CRISPR/Cas系统的作用机制及新型诊断平台的原理和应用进展,总结了新型检测技术的优缺点并对其发展前景进行展望。

  • 标签: CRISPR-Cas系统 CRISPR相关蛋白质类 内切核酸酶类 敏感性与特异性
  • 作者:
  • 学科: 医药卫生 > 免疫学
  • 创建时间:2015-07-17
  • 出处:《医药前沿》 2015年第7期
  • 机构:来自军事医学科学院放射与辐射医学院研究所、第四军医大学西京医院、日本京都大学和华中农业大学兽医学院等处的研究人员,在《自然》旗下子刊《基因治疗》上发表了一项最新研究成果,题为“利用集群定期间隔短回文重复CRISPR相关cas9系统破坏乙型肝炎病毒”。在这项研究中,研究人员探讨了靶定HBV抗原(HBsAg)编码区的CRISPR/CRISPR相关Cas9系统,在细胞培养系统和活体动物体内的效果。结果表明,CRISPR/Cas9可在体内和体外抑制HBV复制和表达,可能是HBV感染一种新的治疗策略。
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  • 简介:摘要  利用植物分子生物学基因编辑技术可以有效地靶向DNA病毒和RNA病毒序列,提高寄主植物对病毒的抵抗力。此外,利用植物分子生物学基因编辑技术(CRISPR/Cas)靶向病毒侵染或复制所需的植物内源基因可研制新的抗病毒种质资源。本文论证了基因编辑技术(CRISPR/Cas)和利用其开展抗病毒研究的进展和实例,同时讨论了病毒诱导的基因编辑系统的应用前景,并对CRISPR/Cas基因编辑技术在植物病毒研究中的优势与挑战进行了展望,为利用基因编辑技术进行抗病毒种质创新提供了指导。

  • 标签:   CRISPR/Cas基因编辑技术 病毒诱导的基因编辑系统 抗病毒工程 DNA病毒 RNA病毒
  • 简介:AbstractDespite multiple virus outbreaks over the past decade, including the devastating coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic, the lack of accurate and timely diagnosis and treatment technologies has wreaked havoc on global biosecurity. The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated proteins (Cas) system has the potential to address these critical needs for tackling infectious diseases to detect viral nucleic acids and inhibit viral replication. This review summarizes how the CRISPR/Cas system is being utilized for the treatment and diagnosis of infectious diseases with the help of biosafety materials and highlights the design principle and in vivo and in vitro efficacy of advanced biosafety materials used to deal with virus attacks.

  • 标签: Biosafety materials CRISPR/Cas SARS-CoV-2 Diagnosis Infectious disease
  • 简介:摘要CRISPR/Cas9是近年来发展起来的一种非常高效的基因组定点编辑技术。然而,很多研究表明设计的单一向导RNA(SingleguideRNA,sgRNA)通常会与基因组DNA发生一定概率的序列错配,从而引起非预期的基因组编辑,即所谓的脱靶效应(Off-targeteffects)。脱靶效应是制约CRISPR/Cas9基因编辑技术得以迅速发展的重要掣肘,CRISPR/Cas9脱靶检测则成为降低脱靶率的重要前提,引起了很多科学工作者的关注。本文将重点介绍现行的几种脱靶检测方法,并对其原理进行分析与对比研究。

  • 标签: CRISPR/Cas9 脱靶检测 基因组编辑