简介:摘要目的通过观察阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对小鼠失神经骨骼肌萎缩肌肉组织中自噬信号通路相关蛋白LC3、Beclin-1和P62表达的影响,探讨其治疗骨骼肌萎缩的分子生物学机制。方法使用随机数方法将30只雄性C57BL/6小鼠分为3组(每组10只):空白对照组,暴露坐骨神经不切除;模型组,暴露坐骨神经并切除;ALN组,切除坐骨神经+ALN干预。造模阶段采用坐骨神经切断术建立失神经骨骼肌萎缩小鼠模型;干预阶段给予小鼠1 mg/kg ALN灌胃治疗。采用湿重称量法称量小鼠腓肠肌质量;采用肌球蛋白ATP酶染色区分肌纤维类型;采用HE染色观察各组腓肠肌肌纤维排列和横截面积,并通过Image J进一步定量计算分析;行RT-qPCR、Western blotting和免疫组织化学染色检测各组腓肠肌组织中MHC、MuRF1表达以及LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin-1和P62表达情况。结果与空白对照组比较,模型组小鼠腓肠肌质量显著降低,证明小鼠失神经骨骼肌萎缩模型造模成功。与模型组比较,ALN组小鼠腓肠肌质量明显升高。HE染色示模型组肌纤维排列松散,肌纤维间出现较多蓝染,横截面积显著小于空白对照组;ATP酶染色示模型组Ⅱ型肌纤维分布较空白对照组增多,ALN组Ⅱ型肌纤维分布较模型组减少,但高于空白对照组。Image J定量计算肌纤维横截面积结果示模型组肌纤维横截面积较空白对照组显著减小,ALN处理后肌纤维横截面积有所恢复。RT-qPCR和Western blotting示与空白对照组比较,模型组小鼠腓肠肌组织中MHC、LC3、Beclin-1表达明显降低,差异有统计学意义(均P<0.05),而MuRF1、P62蛋白明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。ALN组MHC、LC3、Beclin-1明显高于模型组,而ALN组MuRF1、P62明显低于模型组。免疫组织化学染色表明,与空白对照组比较,模型组小鼠腓肠肌中MHC表达显著降低,ALN组较模型组腓肠肌中MHC表达升高(P<0.05)。结论ALN对骨骼肌萎缩具有治疗作用,其机制可能通过适度激活LC3/Beclin-1自噬信号通路实现。
简介:摘要目的研究miRNA-222在失神经骨骼肌萎缩中的作用及机制。方法取40只成年雄性SD大鼠,随机分为4组,假手术组、失神经骨骼肌萎缩组、失神经骨骼肌萎缩+miRNA-222注射组和失神经骨骼肌萎缩+anti-miRNA-222注射组。建立SD大鼠右下肢坐骨神经失神经骨骼肌萎缩动物模型。于术后4周行HE染色、腓肠肌肌湿重比和肌细胞直径检测,采用实时定量PCR检测各组miRNA-222的表达水平,采用实时定量PCR和Western blot法检测各组腓肠肌细胞中miRNA-222靶基因MyOD和Rbm24的mRNA及蛋白表达量。结果术后4周,失神经骨骼肌萎缩组miRNA-222表达量显著增高;与假手术组相比,失神经骨骼肌萎缩组出现明显肌萎缩,外源性注射miRNA-222可使肌萎缩进一步加重,外源性注射anti-miRNA-222可有效减轻肌萎缩。与假手术组相比,失神经骨骼肌萎缩组MyOD和Rbm24 mRNA含量显著减少,外源性注射miRNA-222后MyOD和Rbm24 mRNA含量进一步减少,相反外源性注射anti-miRNA-222后MyOD和Rbm24 mRNA含量虽较假手术组低,但与失神经骨骼肌萎缩组及miRNA-222注射组相比MyOD和Rbm24 mRNA含量均有显著增高。蛋白检测结果与mRNA结果一致。结论外源性miRNA-222可抑制MyOD和Rbm24的mRNA及蛋白表达水平,加重失神经骨骼肌的萎缩程度;相反,外源性anti-miRNA-222可有效对抗miRNA-222的作用,减轻失神经骨骼肌的萎缩程度。
简介:【摘要】目的: 对综合护理干预的护理流程进行分析,确定其在血液透析患者骨骼肌萎缩程度中的应用价值 。 方法: 选择 2018 年 9 月至 2019 年 9 月期间本院收治的 终末期肾病 患者 84 例患者作为研究对象,将基本资料录入计算机进行编号,之后随机抽取其中的 42 例,设为常规组,治疗中 使用基本护理,剩余 42 例患纳入护理组中,使用 综合护理措施。 对比指标: 肌力 、心理状态、护理满意率。 结果: 对比两组 MRC 等级,护理组肌力有效率指标更高, 对比两组心理状况,护理组心理状况评分更理想, 对比两组满意率,护理组护理满意率更高, P< 0.05。统计学具有意义。 结论: 综合护理各项措施的实施,可以对患者的各项心理状态进行调整,并且通过运动等方式,改善患者自身的肌肉、骨骼功能,而增加心理护理的措施,可改善心理状态,护理流程认可率也较高。
简介:目的了解七叶皂甙钠对肢体制动大鼠骨骼肌萎缩的作用。方法将60只健康、体重150—200g的雌性SD大鼠按体重配对原则随机分为对照组(CON)、大鼠右后肢石膏固定组(IB)、七叶皂甙钠+大鼠右后肢石膏固定(SA)三组,每组20只。将IB及SA组大鼠右后肢石膏固定,SA组每日腹腔注射β-七叶皂甙钠10mg/kg,cON及IB腹腔注射等体积生理盐水,共治疗3W。试验结束处死三组大鼠,取双后肢比目鱼肌,分别称重。于比目鱼肌中段切取部分肌肉组织,HE染色后用自动图像分析仪测定肌细胞直径及截面积。将部分比目鱼肌制成匀浆,取匀浆液上清液用于超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测。结果大鼠右后肢石膏固定3W后,IB组大鼠右后肢比目鱼肌湿重、肌细胞直径及肌纤维截面积明显低于CON及SA组。与IB组相比,SA组比目鱼肌SOD活性明显升高,MDA水平明显降低。结论七叶皂甙钠可提高大鼠骨骼肌的抗氧化能力,对肢体制动大鼠骨骼肌萎缩有预防作用。
简介:摘要目的探讨严重烫伤大鼠骨骼肌中腺苷一磷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达和磷酸化水平变化及其在严重烫伤大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用实验研究方法。将100只6周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假伤组和烫伤组,每组50只。测量2组大鼠体重后,烫伤组背部造成30%体表总面积Ⅲ度烫伤,假伤组模拟致烫伤。伤后6 h及1、3、5、7 d,每组各取10只大鼠,测量体重及趾长伸肌和比目鱼肌重量。伤后6 h及1、3、5、7 d,收集2组大鼠胫骨前肌,采用实时荧光定量反转录PCR法检测肌肉萎缩盒F蛋白(MAFbx)和肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)mRNA表达;采用高效液相色谱法检测腺苷一磷酸(AMP)、腺苷二磷酸和ATP含量,并计算AMP/ATP比值及能荷;采用蛋白质印迹法检测AMPK-α及磷酸化AMPK-α(p-AMPK-α)蛋白表达,并计算p-AMPK-α/AMPK-α比值;2组各时间点样本数均为4。对数据行析因设计方差分析及LSD检验。结果伤前及伤后各时间点,2组大鼠体重相近(P>0.05)。伤后6 h,烫伤组大鼠趾长伸肌重量为(0.107±0.007)g,明显重于假伤组的(0.086±0.007)g(P<0.01);伤后3 d,烫伤组大鼠趾长伸肌重量为(0.083±0.016)g,明显轻于假伤组的(0.102±0.005)g(P<0.01)。2组大鼠伤后各时间点比目鱼肌重量相近(P>0.05)。与假伤组比较,烫伤组大鼠伤后6 h胫骨前肌MAFbx mRNA及伤后6 h和1 d胫骨前肌MuRF1 mRNA表达明显上调(P<0.01)。与假伤组比较,烫伤组大鼠伤后6 h和7 d胫骨前肌AMP/ATP比值明显升高(P<0.05或P<0.01),能荷明显下降(P<0.01)。伤后各时间点,2组大鼠胫骨前肌AMPK-α蛋白表达相近(P>0.05)。伤后6 h和7 d,烫伤组大鼠胫骨前肌p-AMPK-α/AMPK-α比值明显高于假伤组(P<0.05或P<0.01)。结论严重烫伤后大鼠骨骼肌能荷下降,AMP/ATP比值升高,激活AMPK;伤后早期AMPK的活化与MAFbx和MuRF1表达上调和骨骼肌重量下降一致,可能是严重烫伤大鼠骨骼肌萎缩发生的分子机制之一。
简介:摘要目的研究血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在规律血液透析患者中的表达水平,并分析其与骨骼肌萎缩的关系。方法将眉山市彭山区人民医院2017年6月至2019年6月收治的113例慢性肾脏病(CKD)5期规律透析患者纳为研究对象,根据英国医学研究委员会肌力评定法评分(MRC)测量结果,将其分为无萎缩组(53例)、轻中度萎缩组(38例)与重度萎缩组(22例),同时将同期50例本院健康体检者纳为对照组,比较四组一般资料、血生化指标与血清IGF-1及IGFBP-3水平,分析其血清IGF-1及IGFBP-3与其他指标的相关性,探讨其与骨骼萎缩的关系。结果对照组、无萎缩组、轻中度萎缩组及重度萎缩组的三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及空腹血糖(Glu)水平呈依次上升趋势,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),肾小球滤过率(eGFR)水平呈依次下降趋势,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);四组血清IGF-1及IGFBP-3水平呈依次下降趋势,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析提示,血清IGF-1水平与CKD患者年龄呈负相关(r=-0.212),与eGFR、IGFBP-3及白蛋白水平呈正相关(r=0.351、0.032、0.241);血清IGFBP-3水平与CKD患者年龄、TC、TG呈负相关(r=-0.240、-0.271、-0.231),与eGFR水平呈正相关(r=0.331)。结论CKD 5期规律透析患者均存在不同程度的骨骼肌萎缩与肌力下降现象,随着CKD患者骨骼萎缩程度的加深,患者血清IGF-1及IGFBP-3水平均呈下降趋势,而CKD可能通过年龄、肾脏功能、营养状况、脂质代谢等因素导致骨骼肌IGF-1受体自体磷酸化障碍,诱导骨骼肌萎缩,但其中的具体机制还需进一步研究。
简介:目的:探讨易筋经对老年骨骼肌减少症者肌力的影响。方法:纳入72名受试者,按队列研究分为观察组和对照组,每组36名。观察组采用易筋经运动处方锻炼,对照组采取行走活动及健康宣教,周期均为8周。于锻炼前后采用Biodexsystem-3型等速测试训练系统评价两组受试者在等速运动(60°/s、180°/s)时膝关节屈伸肌群的峰力矩(PT)、平均功率(AP)、总功(TW)及屈伸肌比值(H/Q)等指标。结果:观察组通过易筋经训练,PT、TW、AP、H/Q等部分指标较试验前有显著提高(P〈0.01或P〈0.05),其中60°/s的PT、TW及AP均较对照组有显著提高(P〈0.05),60°/s的H/Q及180°/s的PT、TW及AP、H/Q较对照组均有升高趋势。结论:易筋经锻炼可明显提高老年骨骼肌减少症者的肌力,改善肌肉的协调性。
简介:摘要目的在大鼠骨骼肌缺损模型上,探讨骨骼肌去细胞外基质(ECM)水凝胶联合骨骼肌干细胞对骨骼肌缺损的修复作用。方法2018年5月至2020年1月,采用5种方法将大鼠骨骼肌脱细胞,使用苏木精-伊红(HE)染色、DAPI染色评估骨骼肌脱细胞情况,选出最优策略制成水凝胶。采用HE染色、Masson染色、扫描电镜(SEM)等对水凝胶的结构、成分进行分析。将骨骼肌干细胞植入包被有水凝胶的培养皿,MTT法检测细胞生长情况;构建大鼠骨骼肌缺损动物模型,用HE染色检测骨骼肌生长,免疫荧光检测Pax7和MyoD的表达情况,电刺激对各组大鼠骨骼肌组织修复后功能进行评估;使用t检验和单因素方差分析进行数据分析。结果本研究发现了一种对骨骼肌结构损伤小并且彻底的脱细胞的方法,然后将其制备成水凝胶;Masson染色、SEM表明水凝胶保留了骨骼肌的基本结构和部分生物因子;MTT检测表明该水凝胶能够促进骨骼肌干细胞的增殖。大鼠骨骼肌缺损实验表明大鼠骨骼肌干细胞联合水凝胶治疗组比力为(9.00±2.10)N/cm2,分别与未修复组和水凝胶组[分别为(4.06±1.12)N/cm2和(5.00±1.60)N/cm2]比较,差异有统计学意义(P<0.05),联合组有更好的效果。结论骨骼肌ECM水凝胶有较好的生物学性能,该水凝胶联合干细胞有望能成为一种修复骨骼肌缺损的有效方法。
简介:摘要目的观察慢性低氧高二氧化碳模型大鼠骨骼肌中PTEN/Akt/FoxO1信号通路变化及神经肌肉电刺激(NMES)对该通路的影响,探讨该通路在慢性低氧高二氧化碳诱发骨骼肌萎缩中的作用及NMES治疗肌萎缩的可能机制。方法采用随机数字表法将32只雄性SD大鼠分为对照组、模型组、假刺激组及电刺激组,每组8只大鼠。将模型组、假刺激组及电刺激组大鼠置于常压低氧高二氧化碳实验舱内,维持舱内O2浓度为9%~11%,CO2浓度为5.5%~6.5%,对照组大鼠则置于对照舱内吸入常压空气,其他条件相同,每天造模8 h,每周造模7 d,持续4周。于第3,4周每日舱内造模结束后,将电刺激组大鼠固定后予以30 min、100 Hz电刺激双后肢治疗,假刺激组大鼠仅固定30 min,未给予电刺激干预。于造模4周后取各组大鼠腓肠肌组织,经苏木素-伊红染色观察并计算各组大鼠腓肠肌纤维横截面积,采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组大鼠腓肠肌中PTEN、p-Akt、Akt及FoxO1蛋白表达。结果与对照组比较,模型组肌纤维横截面积明显减小(P<0.05),Akt和p-Akt蛋白表达明显减少(P<0.05),PTEN和FoxO1蛋白表达明显增多(P<0.05)。与模型组比较,电刺激组肌纤维横截面积明显增大(P<0.05),Akt和p-Akt蛋白表达明显增多(P<0.05),PTEN和FoxO1蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论NMES能通过调节PTEN/Akt/FoxO1信号通路诱导骨骼肌肌纤维蛋白合成,从而改善慢性低氧高二氧化碳模型大鼠骨骼肌萎缩。
简介:伴随着新千年的到来,河北省中医肌萎缩治疗中心(河北以岭医药研究院附属医院)的科研又竖起了新的里程碑,经实验证实,该中心研制的肌萎灵注射液对免疫性损伤的小鼠脊髓前角运动神经元具有改善和保护作用。这标志着运动神经元病所导致的肌萎缩这类世界性疑难病将产生疗效可靠的药物,为在痛苦中挣扎的肌萎缩患者带来了喜讯。传统观点认为,坏死的神经末梢不可修复,也无法再生。因此肌萎缩是现代医学领域至今没有破译的一类疑难病。为了攻克这一难关,吴以岭、陈金亮等医学专家率领留日医学博士及一批研究生为主的科研人员,挖掘传统中医药,应用现代高新技术手段进行专题性研究。肌萎缩属于中医的痿证,传统治疗痿证都