简介：海绵是我国南海蕴藏着的一种非常丰富的生物，其中含较多具有生物活性的核苷类化合物；通过有机溶剂提取、柱层析分离纯化从海绵（Clathriafasciculate）中获得一个核苷化合物，利用现代波谱等技术鉴定其为腺嘌呤核糖核苷。

简介：摘要腺嘌呤核苷酸转位酶(ANT)是线粒体上的一类转运蛋白。它与癌细胞的代谢和凋亡过程相关，在恶性肿瘤的新型治疗方面有一定潜能。ANT的四种异构体作用不同，本文将分别阐述它们与癌细胞凋亡的关系。

简介：摘要腺嘌呤核苷酸转位酶(ANT)是线粒体上的一类转运蛋白。它与癌细胞的代谢和凋亡过程相关，在恶性肿瘤的新型治疗方面有一定潜能。ANT的四种异构体作用不同，本文将分别阐述它们与癌细胞凋亡的关系。

简介：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（辅酶Ⅰ）（nicotinamideadeninedinucleotide，NAD）、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（还原型辅酶Ⅰ）（reducednicotinamideadeninedinucleotide，NADH）.

简介：摘要目的探讨正常和内毒素耐受的人单核细胞系THP-1细胞在脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）刺激下烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide, NAD+）消化酶CD38的表达变化情况。方法（1）LPS刺激正常THP-1细胞：实验组THP-1细胞采用100 ng/ml LPS处理不同时间（1、3、6、9、12和24 h），对照组以磷酸盐缓冲液处理24 h。分别采用定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）与蛋白质印迹技术检测白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6）和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）mRNA及CD38 mRNA与蛋白的表达变化。（2）LPS刺激已诱导内毒素耐受的THP-1细胞：①THP-1细胞加入100 ng/ml LPS处理24 h建立内毒素耐受THP-1细胞模型，以加入磷酸盐缓冲液处理24 h的THP-1细胞作为空白组。模型组和空白组加入LPS（100 ng/ml）刺激3 h，定量PCR检测IL-6和TNF mRNA水平以确定建模是否成功。②模型组和空白组细胞分别用LPS刺激12 h，采用定量PCR检测刺激前及刺激12 h时CD38 mRNA的表达；用LPS刺激1和6 h，采用蛋白质印迹技术检测刺激前及刺激后1、6 h时CD38蛋白的表达量。采用两独立样本t检验和重复测量的方差分析进行统计学分析。结果（1）LPS刺激正常THP-1细胞：实验组各LPS刺激时间点IL-6与TNF mRNA表达水平均高于对照组，实验组自LPS刺激3 h始，CD38 mRNA和蛋白水平均高于对照组（LPS刺激3 h时CD38 mRNA：2.27±0.03与1.00±0.18；CD38蛋白：1.47±0.14与1.00±0.16，P值均<0.05）。（2）LPS刺激已诱导内毒素耐受的THP-1细胞：①确定内毒素耐受THP-1细胞模型是否构建成功：模型组IL-6和TNF mRNA水平低于空白组（P值均<0.05），提示建模成功。②内毒素耐受THP-1细胞在LPS刺激下CD38 mRNA和蛋白表达变化：与空白组相应时间点相比，模型组CD38 mRNA在LPS刺激前（14.18±1.19与1.00±0.13，t=19.007）和LPS刺激12 h（28.33±3.98与7.61±0.88，t=8.803），CD38蛋白在LPS刺激前（1.54±0.06与1.00±0.10，t=7.796）、LPS刺激1 h（1.59±0.09与1.07±0.17，t=4.721）和6 h（2.48±0.09与1.43±0.12，t=12.233）升高；模型组CD38 mRNA在LPS刺激12 h、CD38蛋白在LPS刺激6 h时分别高于同组LPS刺激前（P值均<0.05）。结论正常与内毒素耐受的THP-1细胞在LPS刺激下CD38水平均升高，CD38是NAD+消化酶，间接反映免疫抑制期间单核细胞再感染时NAD+水平变化的现象，为进一步研究CD38能否作为新生儿脓毒症临床诊断生物标记物提供了实验基础。

简介：摘要将腺苷通过乙酰化反应制备得到乙酰腺嘌呤，然后再于氢氧化钠溶液中水解直接制备得到腺嘌呤，工艺简便易行，收率高，是适用工业化生产的

简介：摘要N6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物信使RNA和长非编码RNA最主要的修饰，该修饰过程由m6A甲基转移酶及去甲基化酶动态调控，主要通过m6A识别蛋白发挥作用。m6A修饰可影响转录、剪接、定位、核转运、翻译及降解等RNA代谢的各个方面，其失调可导致RNA功能紊乱，基因表达异常。m6A修饰调节因子在多种肿瘤中表达失衡，与肿瘤的形成、增殖、分化、侵袭和转移相关。

简介：摘要获得性感音神经性听力损失发病率高，严重影响患者生活质量，目前尚无有效治疗药物。近年来的大量研究已揭示烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD+）和依赖NAD+的去乙酰化酶SIRT1在获得性感音神经性听力损失的防治中发挥重要作用，并被视为极具潜力的干预靶点。本文将总结NAD+和SIRT1在防治获得性感音神经性听力损失中的作用及机制。

简介：摘要目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4(Nox4)在草酸钙结石患者肾乳头中的表达及其作用机制。方法通过GEO数据库检索Randall钙斑芯片，按照GSE73680的样本描述，将样本分为无结石对照组(6例)和草酸钙结石组(24例)。采用GEO2R分析正常人肾乳头和草酸钙肾结石患者肾乳头组织中Nox4及成骨相关蛋白基因的表达差异变化。采用高钙处理大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)，免疫荧光技术(IF)检测Nox4的表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测Nox4和骨形态发生蛋白(BMP-2)的表达，化学发光法测定氧化应激标志物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。组间比较采用t检验。结果GEO2R分析结果显示Nox4在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.726倍(t＝2.040，P<0.05)，基质Gla蛋白(MGP)在草酸钙结石组表达下降，差异表达倍数为-1.228倍(t＝-1.230，P>0.05)，骨钙素(OCN)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.439倍(t＝1.241，P>0.05)，骨保护素(OPG)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为0.639倍(t＝0.888，P>0.05)，骨桥蛋白(OPN)在草酸钙结石组表达升高，差异表达倍数为1.664倍(t＝1.171，P>0.05)。免疫荧光结果显示高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的平均荧光吸光度明显高于对照组(0.651、1.446、1.480，t＝8.023、6.477，P<0.05)。Western blot显示相对于未处理的正常对照组，高钙处理的NRK-52E细胞中Nox4的表达明显增加(0.426、0.594、0.734，t＝28.954、53.082，P<0.01)，BMP-2表达也呈增高趋势(0.242、0.472、0.676，t＝12.765、14.257，P<0.01)。此外，高钙处理NRK-52E细胞后，MDA含量增加(0.188、0.390、0.650，t＝2.679、6.686，P<0.05)，SOD活性下降(40.630、38.060、36.230，t＝4.079、10.390，P<0.05)。结论Nox4在肾结石患者肾乳头中表达明显增加，Nox4介导的氧化应激可能在肾结石形成过程中发挥重要作用。

简介：摘要氧化应激(OS)是导致血管性认知障碍(VCI)的因素之一。尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)产生的活性氧(ROS)是VCI重要的致病分子。VCI的危险因素如高血糖及缺血/再灌注等在上游增加NOX的活化；其他危险因素如高龄、高血压及卒中是NOX依赖ROS产生的下游损伤。VCI的成因包括与NOX相关的危险因素及NOX依赖的ROS导致的细胞损伤。研究表明，抑制NOX活性可减轻认知障碍、降低其发生的危险因素。本文对NOX在VCI中的作用及其机制的研究进展进行综述。

简介：摘要目的探讨肝细胞中线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸依赖性异柠檬酸脱氢酶（IDH2）对葡萄糖代谢机制的影响。方法分别用高糖或低糖处理小鼠正常肝细胞AML12细胞株，于24、48、72 h后检测IDH2 mRNA及蛋白表达。慢病毒转染法构建IDH2敲低（KD-IDH2组）、IDH2敲低对照（KD-Ctrl组）、IDH2过表达（OE-IDH2组）以及IDH2过表达对照（OE-Ctrl组）细胞株，分别用正常糖、高糖、低糖处理细胞，每组设置3个复孔。流式细胞学检测细胞内活性氧簇（ROS）生成及细胞凋亡。实时定量聚合酶链反应和Western blot法检测糖异生、糖摄取、糖酵解相关基因［己糖激酶1（HK1）、丙酮酸激酶（PKLR）］以及胰岛素、胰高糖素通路相关蛋白［磷酸肌醇 3-激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT（p-AKT）、蛋白激酶A（PKA）、磷酸化PKA（p-PKA）］的表达。在胰岛素、胰高糖素刺激下，检测低糖条件下肝细胞葡萄糖输出能力。通过多功能酶标仪检测2-NBDG摄取用于评估肝细胞糖摄取能力。两组间比较采用t检验。结果AML12细胞在高糖处理48 h后，IDH2 mRNA表达明显下降（P<0.01）。KD-IDH2组细胞IDH2 mRNA表达量为KD-Ctrl组的（35.67±10.60）%（P<0.01），OE-IDH2组 IDH2 mRNA表达上调为OE-Ctrl的（4.59±0.77）倍（P<0.01）。KD-IDH2细胞在低糖条件下，葡萄糖输出能力明显减弱（P<0.01），糖摄取能力为KD-Ctrl组的（1.23±0.06）倍（P<0.01），AKT、PI3K蛋白活化程度（p-AKT/AKT、p-PI3K/PI3K）显著增加，PKA活化程度（p-PKA/PKA）降低（P<0.01），OE-IDH2组细胞则有相反表现。高糖处理使KD-IDH2细胞中糖酵解途径相关基因HK1、PKLR表达上调（P<0.05），细胞内ROS水平较高（P<0.05），同时细胞凋亡增加（P<0.01）。结论肝脏IDH2表达调控影响肝细胞内葡萄糖代谢，IDH2表达降低使细胞内胰岛素信号通路活化增加，且低糖条件下糖异生途径下调；而过表达IDH2通过增加肝细胞对胰高糖素的响应并降低对胰岛素的敏感性上调肝糖生成。

简介：摘要目的探讨结直肠癌组织中，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖的组蛋白去乙酰化酶6(SIRT6)表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集浙江大学附属邵逸夫医院德清院区肛肠外科2010年1月至2017年12月124例结直肠癌根治性切除术后石蜡标本，采用免疫组织化学方法检测标本中SIRT6的表达水平，分为高表达(++)、低表达(+)及阴性(-)3组。采用χ2检验分析SIRT6表达水平与患者临床病理特征的相关性；采用Log-rank检验分析SIRT6蛋白表达水平与肠癌患者预后的相关性；采用单因素及多因素COX回归分析方法分析影响结直肠癌患者预后的独立危险因素。结果124例患者标本中SIRT6高表达(++)54例(43.5%)、低表达(+)50例(40.3%)、阴性(-)20例(16.1%)。组间比较显示，SIRT6表达水平越低，其临床病理特征更偏晚期；生存分析显示，高表达组5年总体生存率(OS)为91.3%，低表达组5年OS为70.5%，阴性组5年OS为57.0%，随着SIRT6表达水平降低，患者OS及无复发生存率(RFS)呈显著降低趋势(P<0.05)，差异有统计学意义；多因素COX回归分析表明，SIRT6低或阴性表达是影响结直肠癌患者OS及RFS独立危险因素[OS：风险比(HR)＝2.764，95%可信区间(CI)：1.223～6.244，P<0.05；HR＝4.015，95%CI：1.250～12.893，P<0.05；RFS：HR＝1.558，95%CI：1.942～10.700，P<0.05；HR：2.647，95%CI：1.400～5.004，P<0.01]，差异均有统计学意义；亚组分析TNM Ⅱ/Ⅲ期患者显示，术后辅助化疗可显著提高SIRT6高及低表达患者OS及RFS (P<0.05)，差异有统计学意义，而对阴性表达患者无显著改善作用(P>0.05)。结论SIRT6在结直肠癌组织中表达水平可作为预后的判断依据之一，SIRT6蛋白表达水平具有指导术后辅助治疗价值。

简介：近年来,我国相关监管部门、专业人士及社会舆论对豆芽中6-苄基腺嘌呤（6-BA）残留是否会给消费者带来膳食健康风险出现了很大争议,但一直未见有系统的风险评估研究报告。为明确豆芽中6-BA残留的膳食暴露风险,在充分收集市场豆芽残留监测数据和中国裁判文书中豆芽残留数据的基础上,采用点评估方法评估了我国不同人群的6-BA膳食暴露风险。评估结果显示：近年我国各类人群的6-BA膳食暴露（情景Ⅰ）风险商（RQ）平均值为0.001,97.5百分位点值为0.001~0.003;在豆芽制发中普遍使用6-BA的情况下（情景Ⅱ）,其风险商平均值为0.001~0.003,97.5百分位点值为0.003~0.006;在极端高残留假设下（情景Ⅲ）的风险商平均值为0.011~0.025,97.5百分位点值为0.025~0.055;在果蔬中普遍残留假设下（情景Ⅳ）的风险商平均值为0.007~0.020,97.5百分位点值为0.012~0.031。可见,豆芽中6-BA的膳食暴露风险非常低,远未达到健康关注水平。6-BA在豆芽生产中规范使用具有技术必要性和高安全性,建议重新允许使用,同时制定其使用规范和残留限量要求,建议其残留限量（MRL）值可设为0.2mg/kg。

简介：摘要目的探讨胰腺癌组织中鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2(RhoGDI2)的表达与临床病理的关系及可能机制。方法选择2004年6月至2014年6月期间60例胰腺癌患者为研究对象；取相邻的胰腺癌癌旁组织为对照组。检测RhoGDI2的表达，并对RhoGDI2的表达与胰腺癌临床病理进行统计学分析。结果胰腺癌组织中RhoGDI2的表达水平高于癌旁组织，差异有统计学意义（P<0.05）；胰腺癌组织中RhoGDI2表达的阳性率(76.67%)显著高于癌旁组织(45.00%)，差异有统计学意义（χ2=2.4918,P=0.0127）；胰腺癌组织中RhoGDI2的表达与病理分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤大小有显著相关性（P<0.05）。结论RhoGDI2在胰腺癌中呈高表达；胰腺癌中RhoGDI2的表达参与了胰腺癌的发病、转移和进展。

简介：摘要目的探讨糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠坐骨神经烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(Nox4)表达改变及Nox4阻断剂VAS2870对DPN大鼠坐骨神经凋亡的影响。方法40只8周龄雄性SD大鼠，平均体重( 203.5±6.4)g，30只大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)，其中20只患糖尿病，余10只大鼠淘汰；其余大鼠腹腔注射等体积柠檬酸溶液作为对照组(n＝10)。8周后糖尿病大鼠建立DPN模型，采用随机数字表法将DPN大鼠分为2组，VAS2870组(n＝10，尾静脉注射VAS2870 1 mg/kg，每日1次，共7 d)和DPN组(n＝10，尾静脉注射等体积0.9%无菌NaCl溶液，每日1次，共7 d)。用PowerLab数据记录分析系统检测坐骨神经运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV)，用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测坐骨神经Nox4、半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达，用蛋白印迹检测坐骨神经Nox4、caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达水平，采用单因素方差分析比较各组间的差异，用Tukey检验进行两两比较。结果DPN大鼠坐骨神经MNCV[(41.21±7.36)m/s]及SNCV[(30.39±7.66)m/s]均低于VAS2870组[(49.14±8.67)m/s，(38.95±6.24)m/s]，VAS2870对MNCV及SNCV的下降具有减轻作用(q＝3.58，4.53；均P<0.05)。DPN大鼠坐骨神经Nox4(4.72±0.42)、caspase-3(5.02±0.43)、Bax(5.63±0.82) mRNA(q＝7.02，6.40，7.65；均P<0.05)及蛋白水平(0.86±0.10，0.78±0.17，0.95±0.13，q＝7.83，9.15，6.87；均P<0.05)较对照组mRNA(5.79±0.53，6.90±0.79，7.39±0.67)及蛋白水平(0.59±0.13，0.45±0.14，0.64±0.14)表达上调，Bcl-2 mRNA(6.81±0.60，q＝6.31，P<0.05)及蛋白水平(0.44±0.12，q＝6.20，P<0.05)表达下调。VAS2870组Nox4、caspase-3、Bax mRNA(5.31±0.44，5.71±0.60，6.41±0.95)(q＝3.66，2.98，4.02，3.38；均P<0.05)及蛋白水平(0.72±0.13，0.60±0.18，0.79±0.15)(q＝4.24，5.78，3.83；均P<0.05)均低于DPN组，Bcl-2 mRNA(6.29±0.47)的及蛋白水平(0.56±0.12)表达均高于DPN组(q＝3.38，2.81；均P<0.05)，VAS2870部分逆转了Nox4、caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白的表达水平。结论DPN大鼠坐骨神经Nox4表达水平增高，通过调节凋亡相关蛋白caspase-3、Bax及Bcl-2表达促进坐骨神经凋亡；Nox4阻断剂通过减轻坐骨神经凋亡发挥恢复DPN大鼠坐骨神经传导速度的作用。

简介：摘要目的以壳聚糖为载体，腺嘌呤为模型药物，制备纳米粒，分析其理化性质及其对癌细胞增殖的影响。方法通过离子凝集法制备壳聚糖空白纳米粒，测定其粒径分布及zeta电位。制备壳聚糖载腺嘌呤纳米粒，用紫外可见光光度法测定腺嘌呤的偶联率，并计算载药纳米粒的包封率和载药量。MTT法检测载药纳米粒对肝癌细胞HepG2增殖的影响。结果在壳聚糖空白纳米粒制作过程中，壳聚糖和TPP的浓度、温度、搅拌速率等对粒径大小产生一定的影响，经过实验得出在Ade=5mg/ml，TPP=8mg/ml，反应体系PH=5.5，温度为25℃，转速500r/min时，制备的壳聚糖载腺嘌呤纳米粒最佳，纳米粒粒径约为177.6nm，粒径较小，分散均一，Zeta电位为27.4mV，载药纳米粒稳定。在药物浓度达到10mg/ml时对肿瘤细胞HepG2的增殖具有一定的抑制作用。结论以腺嘌呤作为药物模型，壳聚糖作为载体，三聚磷酸钠为阴离子，利用阴阳离子间的静电相互作用，可成功制备壳聚糖载腺嘌呤纳米粒。MTT实验结果表明，腺嘌呤壳聚糖纳米粒对肿瘤细胞增殖有一定的抑制作用。

简介：摘要目的探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)抑制剂对脊髓损伤大鼠的保护作用及其机制。方法将购自北京中国科学院的SD大鼠随机分为假手术组、对照组和观察组，观察组和对照组大鼠均接受脊髓采用脊髓打击器损伤脊髓，观察组大鼠采用NOX2抑制剂(gp91ds-tat)处理，术后检测各组大鼠肢体运动功能，5周后取脊髓组织，检测其中NOX2、炎性因子及微小RNA(miRNA，miR)-155含量和小胶质细胞/巨噬细胞浸润情况，组间比较采用方差检验和t检验。结果在术后第2～5周，与对照组脊髓损伤运动功能(BBB)评分比较(5.54±1.10、6.24±1.96、9.56±1.02、10.58±1.77)，观察组的BBB评分均显著升高(12.12±1.98、15.14±2.25、16.77±2.14、17.05±1.87)，差异有统计学意义(t＝8.941, 9.252, 9.115, 7.035, P<0.05)。观察组大鼠脊髓组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、NOX2相对表达量显著少于对照组(t＝9.024、11.247、12.846、13.237，P<0.05)，白介素-10(IL-10)、精氨酸酶1(Arg1)、类几丁质酶3样分子3(Ym1)相对表达量显著多于对照组(t＝13.294、8.356、15.389，P<0.05)。观察组脊柱组织中miR-155含量均显著高于对照组(t＝7.363，P<0.05)。而观察组大鼠在损伤处和未损伤处M1、M2型细胞比例与假手术组差异均无统计学意义(F＝1.035，P>0.05)。结论NOX2抑制剂可以通过调节miR-155/IL-10信号通路调节炎性反应保护受损脊髓。

简介：根据Ｇｅｎｂａｎｋ中大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）基因的核苷酸序列，设计并合成了一对引物，以大肠杆菌基因组ＤＮＡ为模板，进行ＰＣＲ扩增，并将扩增产物定向连接到克隆、测序及真核表达载体ＰＣＤＮＡ３中，进行酶切鉴定、测序及序列分析。结果表明ＰＣＲ扩增出７４１ｂｐ大小的片段，通过酶切和序列分析证明含完整的ＰＮＰ基因序列且基因插入方向正确，此序列与文献报道的ＰＮＰ基因的同源性为９９．７％。说明克隆的ＰＮＰ基因与文献报道的基本一致，ｐｃＤＮＡ３－ＰＮＰ的构建成功为今后用其进行基因转染来研究ＰＮＰ／Ｍｅｐ－ｄＲ自杀基因系统在肿瘤基因治疗中的应用打下了基础。

简介：摘要目的观察黄芪甲苷（astragaloside IV，AS-IV）联合糖皮质激素干预治疗嘌呤霉素氨基核苷（puromycin aminonucleoside，PAN）肾病大鼠的疗效，并探讨其相关机制。方法40只150~180 g无特定病原体级健康雄性Wistar大鼠被随机分为对照组、模型组（PAN组）、黄芪甲苷干预组（PAN+AS-IV组）、甲泼尼龙（MP）干预组（PAN+MP组）和AS-IV+MP干预组（PAN+AS-IV+MP组）。采用单次尾静脉注射50 mg/kg PAN的方法建立PAN肾病模型。药物干预组于造模同时分别给予40 mg·kg-1·d-1 AS-IV灌胃和15 mg·kg-1·d-1 MP腹腔注射，连续治疗10 d，实验第11天收集各组大鼠血液、24 h尿液和肾组织标本。用全自动生化仪检测尿蛋白量、尿肌酐、血清白蛋白（Alb）水平；Western印迹法检测足细胞标志蛋白nephrin、Rho家族蛋白RhoA、Rac/Cdc42的相对表达量；免疫荧光法检测各组大鼠肾组织nephrin、synaptopodin蛋白的表达。结果与对照组比较，PAN组大鼠尿蛋白/肌酐比值（uPCR）显著升高，Alb水平显著降低，足细胞标志蛋白nephrin相对表达量明显下调，RhoA、Rac/Cdc42蛋白相对表达量显著上调（均P<0.01）。与PAN组比较，PAN+AS-IV组和PAN+AS-IV+MP组血清Alb水平显著升高（均P<0.01），PAN+MP组（P<0.05）和PAN+AS-IV+MP组（P<0.01）uPCR显著降低。Western印迹结果显示，与PAN组比较，各药物干预组（PAN+AS-IV组、PAN+MP组和PAN+AS-IV+MP组）肾组织nephrin相对表达量显著升高，RhoA、Rac/Cdc42相对表达量显著降低（均P<0.01）。免疫荧光结果显示，PAN组足细胞标志蛋白nephrin、synaptopodin表达较对照组明显减少，各药物干预组肾组织nephrin、synaptopodin表达较PAN组均升高，其中PAN+AS-IV+MP组改善最显著。结论AS-IV及糖皮质激素均可改善PAN诱导的肾足细胞损伤，且两者联合使用有协同增强的保护作用，可能与抑制Rho家族信号的激活有关。

简介：摘要目的研究还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)在肝癌细胞诱导巨噬细胞M2型极化中的作用和机制。方法单核巨噬细胞系THP-1和肝癌细胞系HepG2共培养模拟巨噬细胞的M2型极化，采用靶向NOX4的小干扰RNA(si-NOX4)和NOX4特异性抑制剂GLX351322抑制THP-1中NOX4的表达。将细胞分为对照组、si-NOX4组和GLX351322组。CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术检测CD206＋F4/80＋M2型巨噬细胞比例，试剂盒检测M1型相关分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α的表达，蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测M2型标志物精氨酸酶1(Arg1)、CCL22的表达以及TGF-β信号关键蛋白TGF-β1、Smad1的表达，试剂盒检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达，免疫荧光染色检测CD206的表达。构建肝癌荷瘤小鼠模型，GLX351322干预后检测CD206的表达，Western blot法检测M2型标志物以及TGF-β信号关键蛋白的表达。结果si-NOX4和GLX351322抑制了NOX4的表达，THP-1和HepG2共培养后可显著抑制THP-1细胞活力，si-NOX4组和GLX351322组细胞活力显著低于对照组(P<0.05)。此外，si-NOX4组和GLX351322组CD206＋F4/80＋M2细胞比例也显著低于对照组(P<0.05)。M1型标志物iNOS和TNF-α的组间比较差异无统计学意义(P>0.05)，而对照组中M2型标志物Arg1、CCL22以及TGF-β1、Smad1的表达显著高于si-NOX4组和GLX351322组(P<0.05)。免疫荧光染色结果也显示M2型标志物CD206在si-NOX4组和GLX351322组中表达下调，荧光强度低于对照组(P<0.05)。肝癌荷瘤小鼠模型中，GLX351322干预后肿瘤组织中CD206的表达水平下调，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)；M2型标志物Arg1、CCL22以及TGF-β1、Smad1的表达也显著低于对照组(P<0.05)。结论抑制NOX4表达可显著抑制肝癌细胞诱导的巨噬细胞M2型极化，提示NOX4在肿瘤相关巨噬细胞的转化中具有重要作用。