简介：目的报道一种新的雪旺细胞提纯方法一改良冷喷注法，并与其他2种方法进行对比，评价其优缺点。方法分离新生6d的Wistar大鼠双侧坐骨神经，双酶消化法分离雪旺细胞，用S-100免疫细胞化学染色方法对雪旺细胞进行鉴定。将收集到的细胞分为3组，分别应用冷喷注法、改良冷喷注法和酶消化法对细胞进行纯化，计算纯化后的细胞纯度，流式细胞仪测定细胞活性。结果改良冷喷注法提纯出的雪旺细胞，纯度和细胞活性与冷喷注法比较差异无统计学意义（P〉0．05），但二者均高于酶消化组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论改良冷喷注法提纯雪旺细胞的优点是操作简便，获得雪旺细胞纯度高且不影响细胞活性，缺点是对操作者实验操作技术和经验要求相对较高，初学者不易掌握。

简介：近年研究表明,热休克蛋白70(hsp70)与神经系统疾病密切相关,正常脑组织中hsp70mRNA及蛋白质含量极少,当脑组织受到损伤后,受损细胞内的变性蛋白即可诱导hsp70mRNA的表达.hsp70表达根据损伤程度和细胞耐受损伤程度不同,在各细胞间的转录和翻译水平也不同.因此在许多肿瘤组织中,热休克蛋白都呈高表达[1].

简介：目的建立简便易行的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞体外提取并纯化方法，以获取能够满足实验需求的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞，提高原代培养成功率。方法采集6例Ⅱ型神经纤维瘤病患者肿瘤组织标本作为实验材料，Ⅰ型胶原酶消化培养法提取肿瘤性许旺细胞，低浓度酶快速消化法、差数贴壁法和克隆筛选技术纯化肿瘤性许旺细胞。倒置相差显微镜观察细胞形态变化，免疫细胞化学染色榆测纯化细胞S-100蛋白表达水平，结合细胞形态鉴定经体外培养并纯化的细胞为肿瘤性许旺细胞。结果自3例肿瘤组织标本培养液中成功获得肿瘤性许旺细胞。肿瘤细胞原代培养至第3天，可见大量双极梭形或三角彤细胞，以低浓度酶快速消化法和差数贴壁法纯化细胞；培养至第3代，倒置相差显微镜观察可见4～5个克隆细胞，免疫细胞化学染色S-100蛋白表达阳性，肿瘤性许旺细胞纯度〉95％，活力良好，可以稳定传代培养。结论应用体外原代培养方法结合低浓度酶快速消化法、差数贴壁法和克隆筛选技术能够有效剔除纤维母细胞，获得纯度高、活力良好的肿瘤性许旺细胞，可用于Ⅱ型神经纤维瘤病发病机制及治疗研究。