简介：生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过CaCl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因luxAB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明：在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1mmol/L,装液量50mL/150mL,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明：当pH6,IPTG浓度0.08mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。

简介：温度是水生生物尤其是贝类生存环境的关键因素之一。为了探究温度对岩扇贝无水保活和抗氧化系统的影响，本试验进行了温度对不同干露条件下岩扇贝存活率、半致死时间（LTd的影响以及温度胁迫对岩扇贝幼贝抗氧化酶活力的影响两项不同的试验。为了探明温度对岩扇贝存活率和半致死时间的影响，在实验室条件下，进行了的岩扇贝（壳长为（397±50）mm）在不同温度（5℃、15℃）、湿度（保湿组、不保湿组）和氧气（充氧组、不充氧组）环境下的生存分析、影响半致死时间的因素效应分析。结果发现低温、保湿、充氧均可以显著提高岩扇叽存活率、半致死时间（P〈0.05），其中温度变化对岩扇贝的半致死时间影响最显著，其次时氧气，最后是湿度。在三个因素的交互作用中，温度和湿度、温度和氧气交互作用显著（P〉0.05），湿度和氧气交互作用不显著（P〈0.05）。这为确定岩扇贝苗种运输时间提供了重要依据。为探究温度变化对岩扇贝幼贝抗氧化系统的响应，试验从低温开始逐渐升温（5℃、10℃、15℃、20℃、25℃），检测岩扇贝幼贝抗氧化酶活力（超氧化物歧化酶活力SOD、过氧化氢酶活力CAT、总抗氧化能力T-AOC）的变化。结果显示，岩扇贝幼贝SOD活力在5℃时显著低于其余组SOD活力（P〈0.05），在10℃至25℃间，SOD活力不存在显著性差异（P〉0.05）；CAT活力在5℃至20℃间变化不显著（P〉0.05），在25℃时显著高于其余组CAT活力（P〈0.05）；T-AOC水平在15℃时显著高于其余组（P〈0.05），温度从15℃升高或降低T-AOC活力都会显著下降（P〈0.05），降温下降幅度显著高于升温（P〈0.05）。这表明高温对岩扇贝幼贝组织液中CAT活力有着明显的诱导作用、对T-AOC活力有着明显的抑制作用；低温对岩扇贝幼贝组织液中SOD、T-AOC活力有着明显的抑制

简介：遇见你之前,我是独立源;遇见你之后,我是受控源.

简介：一谭方一听说吃饭就开始发憷。前两天,他和一名同事跟随支队长刘成岭到青县公安局指导案件侦破。有刘成岭坐镇和统筹,案件很快就破了。县局摆宴庆功,抒发众将士心中高兴。当晚,县公安局马局长当仁不让在主陪落座,亲热地把刘成岭拉到身边,然后招呼谭方他们就位。马局长催促服务员赶快打开酒瓶,亲自为刘成岭倒上满满一玻璃杯。等马局长的酒瓶移过来,谭方忙用手虚掩酒杯,说马局我不会喝酒。

简介：摘要学生是学习的主人，教师是学习的组织者、引导者和合作者。教师应针对小学生的身心特点和发展规律，构建活力课堂，让学生积极主动地参与教学过程，激发其学习兴趣和热情，为学生提供思考和交流的空间，以提高小学数学课堂教学效率。

简介：目的：针对不同胚源的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）表现出的衰老差异，探讨组蛋白去甲基化酶Jmjd3对衰老的调控作用。方法：取大鼠下颌骨（M）和胫骨（T）后提取BMSCs原代培养并进行传代，通过β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）衰老染色检测细胞衰老特征，茜素红染色检测细胞成骨特征。通过实时定量RT-PCR、Westernblot检测Jmjd3及衰老因子在两种BMSCs中的表达。构建shJmjd3病毒敲减Jmjd3，转染T-BMSCs检测衰老指标。在大鼠颌骨区域建立骨缺损模型，移植shJmjd3修饰的T-BMSCs，通过Micro-CT、Masson染色检测Jmjd3被抑制的T-BMSCs对骨缺损区的修复作用。结果：经SA-β-gal衰老染色，T-BMSCs中衰老细胞数量明显多于M-BMSCs。Jmjd3及衰老因子在M-BMSCs低表达，在T-BMSCs高表达。转染shJmjd3病毒导致T-BMSCs中Jmjd3及衰老因子低表达。移植敲减Jmjd3的T-BMSCs，Micro-CT显示其骨平均密度，骨体积分数明显升高，Masson染色显示其骨小梁结构增多。结论：不同胚源大鼠BMSCs的衰老特征具有差异性，将T-BMSCs中Jmjd3抑制以后，可以增强细胞的抗衰老能力，有利于体内的骨修复的治疗。

简介：以糖化酶为研究对象,壳聚糖为固定化材料,采用戊二醛作为交联剂对糖化酶进行固定化,研究了戊二醛浓度、糖化酶浓度和固定化时间对固定化效果的影响,并对比了糖化酶固定化前后其酶学性质的变化。结果表明,当戊二醛浓度1%,酶添加浓度6.0g·L^-1,固定化时间12h时,糖化酶的固定化效果最好,其催化可溶性淀粉的酶活性为7125.3U’;糖化酶经过0.04g·mL^-1壳聚糖固定化后其酶学性质如催化最适温度、pH和米氏常数Km都发生了改变,分别为温度75℃、pH5.4和Km值8mg·mL^-1;固定化酶连续使用4次后,其酶活性仍保持有最初固定化时酶活性的49.82%,说明其具有一定的重复使用性。

简介：摘要苏霍姆林斯基曾说“如果教师不想方设法使学生产生情绪高昂和智力振奋的内心状态，就急于传授知识，那么这种知识只能使人产生冷漠的态度，而不动情感的脑力劳动，就会带来疲倦。”所以，如何调动学生的积极性和主动性是课堂教学成败的关键。兴趣是学习的动力，是学生最好的老师。有了浓厚的学习兴趣才能激起学生饱满的学习热情，焕发课堂活力。

简介：郑先生常年在外地奔波，心中时常惦念家中的老父亲。为了让父亲生活得更轻松，郑先生专门雇了一个保姆，负责父亲的日常饮食起居。保姆很尽责，包办了所有家务活，可老人身体却大不如前，而且总爱忘事。后来，郑先生想起父亲常说：“别人都帮我把所有的事干了，我不等于混吃等死吗？”受父亲这句话的启发，郑先生把保姆改成了钟点工，定期给父亲家做清洁，其他一些力所能及的家务活还是让父亲做，老先生的身体渐渐硬朗起来了。

简介：笔者有幸参加了《挑战压轴题公益行》大连站的活动,聆听了马学斌老师的精彩讲座.其中大连2012年一道中考压轴题引起了我的兴趣.题目：如图1,在梯形ABCD中,已知AD//BC,∠ABC=2∠BCD=2α,点E在边AD上,点F在边DC上,且∠BEF=∠A.

简介：科学的课堂注重的是学生的“探究体验”而不是为了完成“探究程序”。课堂上要充分发挥学生的自主性,激发学生的求知和探究兴趣,老师适当引导即可。如何有效地引导学生进行自主探究,进一步培养学生的创新和动手能力就是教学中的一大难题。本文认为只有从学生的已有知识水平和情感体验出发,构建开放的课堂,才能发挥学生的自主探究能力。因此,在科学课堂上,教师需要通过创设合理的情境,为学生营造开放的氛围,用激励性的语言恰如其分的表扬,捕捉课堂中精彩的成果,才能进一步激发学生的探究兴趣,同时,还可以设立一些竞争机制,加强团队的协作,从而迸发出魅力四射的火花。

简介：摘要新课程改革背景下，我国小学素质教育要重视学生身心健康的全面发展，体育教学要具备科学性与合理性，唯有如此才能提高学生的身体素质和课堂参与积极性。小学生天性爱玩、好动，在体育课程设计中融入游戏化的教学模式便能够有效地激发学生的兴趣。为此，小学体育课堂进行体育游戏的创设十分重要。

简介：新课标强调学生学习要从以获取知识为首要目标转到首先关注人的情感、态度、价值观和一般能力的培养。信息技术教学中必须调动各方面资源，为学生创设快乐的学习情境，以兴趣促进学生乐学，从而提高课堂教学效率，达到预想的学习目的。本文从情景教学在信息技术课中运用的必要性出发，重点分析信息技术课程中情境创设的原则及方法。

简介：摘要本文概述了语文的学习应该是在这生生的动态的语言环境中进行的。新课标呼唤人文精神的教育，呼唤充满生命的温暖课堂，呼唤充满与崇高人性的对话。

简介：摘要著名的音乐教育家卡巴列夫斯基说过“音乐教学的超级任务是培养学生对音乐的兴趣。”兴趣是学习音乐的基本动力，是学生与音乐保持密切联系、享受音乐、用音乐美化人生的前提。对于小学阶段的学生而言，音乐是满足学生对真善美的需求、提升学生的艺术涵养、促进学生综合素质不断提升的有效手段。因此，在小学音乐的教学中，音乐教师应当紧密结合新课程改革的思想，不断激发学生的音乐学习兴趣，让学生积极地学习音乐，为促进小学音乐教学效率的提升奠定基础。

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简介：摘要随着新课程改革的不断深入，初中数学的教育目标发生了改变，对我国初中数学教育工作者的教学方法和教学理念的要求越来越高。在信息技术的不断发展中，教师应改变教学模式，充分借助信息技术的优势，有效提高我国初中数学教学效率。对此，本文主要对初中数学教学和信息技术的整合进行了探讨，以供参考。

简介：进入新时代以来,江苏民生建设持续发力,民生投入不断加大,民生政策也同样给力。为了满足人民对美好生活的需要,国家不断出台举措、加大力度改善民生。根据中央精神,结合江苏实际,我省也密集出台各种民生举措,加快富民步伐,着力保障和改善民生

简介：摘要游戏是进行体育活动的手段之一，是初中体育教学与训练的重要内容，它对全面发展学生的身体素质、增强体质、提高基本活动能力和掌握知识技能等有积极的作用。因此，在现代初中体育教学的过程中，教师应该积极地利用游戏教学模式进行教学。本文作者结合体育游戏特点，提出合理利用体育游戏的策略，以飨读者。