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  • 简介:摘要目的探讨基质蛋白22(NMP22)及E-钙黏蛋白(E-Cad)在膀胱癌早期诊断中的临床价值。方法收集本院自2018年1月至2021年1月收治的61例确诊为原发性膀胱癌患者的尿液样本,设为膀胱癌组,并选取同期60例健康者的尿液样本作为对照组,采用酶免疫分析法测定两组NMP22表达水平及定量夹心酶免疫测定技术测定E-Cad表达水平。结果与对照组相比,膀胱癌组的NMP22、E-Cad均升高,差异均有统计学意义(均P<0.001)。在膀胱癌组中,淋巴结转移阳性患者的E-Cad水平显著高于淋巴结转移阴性患者,差异有统计学意义(P=0.007)。受试者工作特征(ROC)曲线分析得出,NMP22诊断膀胱癌的灵敏度及特异度分别为84.4%和59.3%,E-Cad诊断膀胱癌的灵敏度及特异度分别为76.9%和50.0%。结论NMP22、E-Cad均可以作为检测膀胱癌的良好指标,联合NMP22及E-Cad检测可以弥补各指标检测的弊端,显著提高膀胱癌的早期诊断率。

  • 标签: 膀胱肿瘤 核蛋白质类 E-钙黏蛋白
  • 简介:摘要目的构建并鉴定表达新型冠状病毒衣壳(nucleocapsid,N)蛋白的基因重组BCG。方法利用PCR技术从质粒pUC57-N(Kan+抗性)中获得新型冠状病毒N蛋白全长基因。将N基因连接到大肠埃希菌-BCG穿梭表达质粒pMV261,进行酶切、PCR及测序鉴定。重组质粒经电转化导入感受态BCG,通过蛋白印迹法鉴定目的基因在重组BCG中的表达。结果经过PCR扩增获得1 260 bp的N基因,构建的重组表达质粒pMV261-N序列完整,插入的基因片段与美国国家分子生物学信息资源中心报道的新型冠状病毒N蛋白全长基因的大小及序列一致。重组质粒能够在BCG中表达相对分子质量约为46 000的目的蛋白蛋白印迹法显示该蛋白能被抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体识别。结论构建的重组BCG能稳定表达新型冠状病毒N蛋白,为开发新型冠状病毒N基因重组BCG疫苗奠定了基础。

  • 标签: 新型冠状病毒 卡介苗 核衣壳蛋白
  • 简介:摘要目的探讨转运蛋白α-2(KPNA2)在肝细胞癌中的表达与预后意义及其在肿瘤免疫中的重要作用。方法分别从多平台数据库中下载肝细胞癌数据,通过R语言进行数据整理和筛选,用Wilcoxon-test进行表达差异分析,Kruskal-test和Cox回归模型进行临床差异与预后分析,最后用ssGSEA和Cibersot算法进行免疫细胞浸润与免疫功能相关研究。结果KPNA2在11个肝细胞癌样本组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01),其高表达与肝细胞癌患者不良预后及肿瘤分期等密切相关[风险比(HR)>1,P<0.05)。KPNA2还可影响肝细胞癌中的抗原提呈与白细胞介素反应等免疫功能(P<0.01),并与包括B细胞,CD4+T细胞等在内的10种免疫细胞的浸润水平明显相关(P<0.05)。结论KPNA2可促进肝细胞癌发生发展,并能作为肝细胞癌的独立预后因子,同时其通过调节免疫细胞浸润可影响肿瘤微环境。

  • 标签: 核转运蛋白α-2 肝细胞癌 预后 免疫 生物信息学
  • 作者: 李强 李尧 宋京海
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华实验外科杂志》 2022年第10期
  • 机构:北京医院普通外科 国家老年医学中心 中国医学科学院老年医学研究院 100730 李强现在北京大学首钢医院肝胆胰外科,北京医院普通外科 国家老年医学中心 中国医学科学院老年医学研究院 100730
  • 简介:摘要目的探索原表达系统生产的T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白-1-Fc(Tim-1-Fc)融合蛋白能否为Tim-1蛋白模拟品。方法大肠杆菌合成Tim-1-Fc融合蛋白,以体外蛋白质结合实验测定其能否与Tim-4蛋白结合。通过荧光激活的细胞分选(FACS)检测磷脂酰丝氨酸(PS)与膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)间的结合情况,间接探明该蛋白与PS的结合。结果体外蛋白相互作用实验证实Tim-1-Fc融合蛋白可以结合Tim-4蛋白。FACS数据分析表明无论有无过氧化氢诱导,Tim-1-Fc组凋亡细胞FITC信号平均强度(231.16±8.27、263.45±7.91)均高于对照组(190.80±5.09、203.29±10.89,t=-7.200、7.739,P<0.01),差异有统计学意义。结论原表达版本的Tim-1-Fc融合蛋白可能具备在体外模拟Tim-1蛋白的作用。

  • 标签: T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白 T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域蛋白-1-Fc 原核表达
  • 简介:【摘要】文章主要详述了汽车用空滤器壳体模态的分析过程及参数设定要点,为产品的设计提供定值参考,以缩小CAE分析结果与产品实物间的误差值,提升CAE分析的准确度。

  • 标签: 汽车 空滤器 模态
  • 简介:【摘要】文章主要详述了汽车用空滤器壳体模态的分析过程及参数设定要点,为产品的设计提供定值参考,以缩小CAE分析结果与产品实物间的误差值,提升CAE分析的准确度。

  • 标签: 汽车 空滤器 模态
  • 简介:摘 要:圆柱形刚性壳体目前得到广泛应用,例如压力容器、UUV壳体、航行器、运载火箭、海基弹道导弹等。这些结构多数要运用在动态的环境中,本文在设计过程中研究它们的动力特性并做出振动分析显得尤为重要。UUV、鱼雷等水下装置,处于不同的作业环境而具有特殊的条件要求,因此使用有限元分析方法主要对此类水下装置进行振动分析,并应用Ansys软件对一些论文中所涉及到的模型进行自由振动分析。在软件分析结果得到证实的情况下,将此种方法扩展到假想的水下UUV耐压壳体分析中。

  • 标签: UUV耐压壳体 水下 自由振动 外部压力
  • 简介:摘要:弯杆是实现拖拉机力调节的主要传感部件,他通过自身的弯曲,通过摇臂及立杆将变形转化为位移,从而形成控制信号作用在拖拉机分配器上,使拖拉机在耕作时遇到阻力突然增大时能够控制提升器自动上升,阻力减小后控制提升器自动下降。从而实现了拖拉机的力调节作用,配合位控制,也可实现力、位综合控制。 在加工中出现如下问题:加工三层孔,在第二层孔出口为半壁切削,在第二层孔、第三层入口处为毛坯面,加工时孔易偏;同时有一个φ17孔和此第二层孔十字交叉,且其交叉轴线不重合,加工时刀具摆动大易产生偏移,且此转轴孔加工深度达到300mm,易造成该孔上下两部分尺寸精度及同轴度超差。2、加工过程中开档面的加工是在卧式加工中心上从侧面进刀加工,由于受夹具等影响,刀具悬伸较长造成尺寸加工时不稳定。3、弯杆壳体由于两端加长82.5mm, 轴承孔孔径为¢42,选用的刀杆细长,加工时刀具易振,两端面轴承孔同轴度易超差。因此,针对上述问题进行工艺分析及改进,显得尤为重要。

  • 标签: 弯杆 传感部件    力调节
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:摘要:随着我国汽车行业的快速发展,一方面,对汽车用压铸制品的需求不断增加;同时,为解决我国目前面临的环境问题和资源紧缺的问题,对汽车用压铸制品的质量和使用范围提出了更高的要求。从高压铸造的观点出发,对铝合金铸件中的一些关键技术进行了讨论。

  • 标签: 铝合金铸件 铸造工艺 开发分析
  • 简介:摘要目的获得纯化的GTV-rNP蛋白抗原,并建立快速准确检测GTV抗体的ELISA法。方法人工合成密码子优化的 GTV-NP 编码基因,克隆至 pET32a(+)载体,构建重组表达质粒,转化至 BL21(DE3)。将优化表达获得的蛋白经Ni柱纯化后用SDS-PAGE和Western blot鉴定。以纯化蛋白为抗原,建立并优化GTV IgG抗体间接ELISA检测方法,并对其进行评价和初步应用。结果成功构建原表达质粒pET32a-NP,重组蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达,大小约为44 kD,Western blot结果表明重组蛋白与GTV阳性血清具有良好的抗原性。建立的ELISA法特异性强、敏感性高、批内和批间的变异系数均小于10%具有较好的重复性;检测结果与IFA检测结果符合率达到92.77%。结论建立的GTV NP 抗体检测ELISA方法的敏感性、重复性和特异性均较好。

  • 标签: 核蛋白类 酶联免疫吸附测定 血清学试验 表达纯化 古尔图病毒
  • 简介:【摘要】目的:采用回顾分析的方法,比较间接免疫荧光法和蛋白印迹法对于抗抗体的检测准确性。方法:从我院2020年10月至2021年10月收治的疑似自身免疫性疾病的患者共计1000例,经过实验条件筛选之后,选择800例患者作为本次研究的主要对象。对800例患者均采用间接免疫荧光法和蛋白印迹法进行抗抗体的检测,对比两种方法的检测结果。结果:采用蛋白印迹法诊断的正确率高于间接免疫荧光法,采用蛋白印迹法的敏感度、特异度、漏诊率、误诊率都优于间接免疫荧光法。结论:针对自身免疫性疾病疑似患者,采用蛋白印迹法准确率更高,更能够帮助患者确定治疗方案,因此该方案值得临床推广。

  • 标签: 间接免疫荧光法 蛋白印迹法 抗核 抗体 检测
  • 作者: 朱云 张林琳 段亚丽 谢正德
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2022-12-13
  • 出处:《中华预防医学杂志》 2022年第02期
  • 机构:国家儿童医学中心 国家呼吸系统临床医学研究中心 首都医科大学附属北京儿童医院 儿科重大疾病研究教育部重点实验室 中国医学科学院儿童危重感染诊治创新单元 儿童呼吸道感染性疾病研究北京市重点实验室 北京市儿科研究所感染与病毒研究室,北京 100045,国家儿童医学中心 首都医科大学附属北京儿童医院感染与病毒研究室,北京 100045
  • 简介:摘要目的原表达人腺病毒(HAdV)7型DNA结合蛋白(DBP),制备DBP蛋白多克隆抗体。方法合成HAdV-7 DBP基因并克隆至pET30a载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导进行原表达。经镍离子金属螯合层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,使用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定该抗体效价;使用Western blotting方法与间接免疫荧光方法(IFA)检测抗体特异性。以rDBP包被ELISA反应板使用间接ELISA对HAdV感染儿童急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体进行检测。结果成功构建HAdV-7 DBP原表达载体,表达的重组DBP蛋白经镍柱亲和层析纯化后纯度>95%,间接ELISA方法测得制备的多克隆抗血清的抗体效价为1∶1 024 000,Western blotting方法和IFA方法显示该抗体具有较高的特异性,间接ELISA方法检测HAdV感染儿童 急性期血清中抗DBP蛋白IgM和IgG抗体的阳性率分别为50.0%(19/38)和63.2%(24/38)。结论成功构建HAdV-7 DBP蛋白的原达表达载体,获得了HAdV-7型DBP重组蛋白和高效价的兔多克隆抗体。

  • 标签: 人腺病毒7型 DNA结合蛋白 原核表达 多克隆抗体
  • 简介:摘要目的探讨小体装配蛋白1样1(NAP1L1)对鼻咽癌细胞增殖能力的影响及其机制。方法选取2017年1月到2021年1月新乡市中心医院收集的60例鼻咽癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用免疫组织化学分析癌旁组织和鼻咽癌组织NAP1L1蛋白表达水平。采用NAP1L1短发卡RNA(shRNA)慢病毒感染低分化鼻咽癌细胞SUNE-1,建立对照组和NAP1L1 KD组细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析NAP1L1对鼻咽癌细胞增殖的影响。采用流式细胞术分析两组细胞周期水平;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析肿瘤组织和癌旁组织中周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)和细胞周期素D1(CCND1) mRNA和蛋白表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果NAP1L1蛋白主要表达于细胞中。定量结果显示,癌旁组织NAP1L1蛋白表达强度(31.64±7.01)明显低于鼻咽癌组织NAP1L1蛋白表达强度(91.80±15.18),差异有统计学意义(t=27.87,P<0.05)。对照组细胞48 h和72 h吸光度(A)值(1.08±0.08、1.89±0.11)明显高于NAP1L1 KD组细胞48 h和72 h A值(0.79±0.08、1.31±0.05),差异有统计学意义(t=6.328、11.570,P<0.05)。克隆形成实验结果显示,对照组细胞克隆形成数量(109.50±14.45)明显高于NAP1L1 KD组细胞克隆形成数量(66.33±7.69),差异有统计学意义(t=6.462,P<0.05)。接种30 d后对照组细胞在裸鼠成瘤体积和重量[(1 072.90±114.87) mm3、(4.96±0.52) g]显著高于NAP1L1 KD组细胞[(855.90±55.54) mm3、(3.27±0.23) g],差异有统计学意义(t=5.387、9.425,P<0.05)对照组细胞G0/G1期比例[(55.03±3.09)%]明显低于NAP1L1 KD组细胞[(74.88±2.16)%],差异有统计学意义(t=12.890,P<0.05)。对照组细胞G2/M期比例[(5.61±0.63)%]明显低于NAP1L1 KD组细胞[(14.01±1.03)%],差异有统计学意义(t=17.080,P<0.05)。对照组细胞S期比例[(30.27±1.79)%]明显高于NAP1L1 KD组细胞[(11.44±2.34)%],差异有统计学意义(t=15.650,P<0.05)。对照组细胞CDK4、CDK6和CCND1蛋白表达水平(1.23±0.06、1.03±0.09、0.88±0.05)明显高于NAP1L1 KD组细胞(0.41±0.07、0.60±0.05、0.30±0.05),差异有统计学意义(t=21.330、10.560、19.980,P<0.05)。结论NAP1L1在鼻咽癌组织中呈高表达,通过调节与肿瘤细胞周期相关蛋白的表达水平,调节细胞周期变化,进而影响肿瘤细胞恶性增殖的能力。

  • 标签: 核小体装配蛋白1样1 鼻咽癌 增殖 周期
  • 简介:摘要目的探索原表达新型冠状病毒受体结合蛋白(RBD)的制备方法,并对其在小鼠体内的免疫原性进行评价。方法用大肠埃希菌表达重组新型冠状病毒RBD,进行纯化、透析复性,比较了RBD复性前后的结构表征和抗原活性变化,最后将制备所得重组RBD免疫Babl/c小鼠,检测免疫小鼠体内的体液免疫和细胞免疫变化情况。结果完成了大肠埃希菌表达的新型冠状病毒重组RBD的制备。复性前后,RBD的自发荧光波长发生蓝移现象,从(363.33±0.47)nm蓝移至(333.00±0.82)nm,蛋白形状从无序状态折叠为(9.55±0.39)nm的颗粒,复性后RBD与ACE-2的结合活性是复性前的128倍。活病毒中和抗体检测结果显示:血清对原型株的滴度几何平均数为136.70,对贝塔株为101.59,两者无统计学差异(t=0.41,P=0.700)。试验组小鼠脾淋巴细胞产生的分泌特异性IFN-γ的效应T细胞为(308.50±144.11)个斑点形成细胞/5×105个细胞,低于对照组[(3.75±3.11)个斑点形成细胞/5×105个细胞],差异有统计学差异(t=4.72,P=0.010)。结论成功制备原表达的新型冠状病毒重组RBD,通过体外复性折叠,能够产生良好、全面的免疫原性。

  • 标签: 新型冠状病毒 受体结合蛋白 原核表达 免疫原性 复性折叠 免疫应答
  • 简介:摘要:壳体类零件大多为薄壁零件,内部结构复杂,受目前铸造工艺水平的限制,在壳体类零件铸造过程中易产生砂眼和夹渣等缺陷。壳体类零件的加工工序繁琐多样化,涉及到冷热工艺中的多种加工方式,在众多工序流转过程中,容易产生磕打碰伤,划伤等外观质量问题。另外,壳体类零件尺寸特征多至上千项,因此,在尺寸检验过程存在一定的难度和错漏检的风险,容易产生低层次质量问题。

  • 标签: 尺寸检验 过程检验 工艺过程 外观控制
  • 简介:摘要:汽车变速器主要是实现汽车的变速,改变汽车的运动速度。其最基础的部件就是变速器壳体。变速器壳体的主要作用是支承主轴、中间轴和倒挡轴,保证各轴之间的中心距和轴之间的平行度,并保证变速器壳体外部与其他部件的连接,比如:外部换挡机构、各种支架以及与整车的安装连接。变速器壳体是一个薄壁存腔型、精度高、易变形的零件。因此,变速器壳体的加工质量直接影响到了变速器总成的装配精度、变速器的运动性能、换挡的灵活性、以及变速器的使用性能和寿命。

  • 标签: 汽车变速器壳体 数控加工
  • 简介:摘要:聚合物软包装锂离子电池铝塑复合膜在电池的制造过程中起着至关重要的作用,不但保证电池内部系统的稳定,也防止外界水分的介入,是电池质量安全的保障,壳体的明显的缺陷通过外观的目测进行识别,而一些微观的破损,则需要一定探伤检测技术来完成,本文对锂电池壳体探伤检测技术进行简要总结与分析,对壳体探伤检测有应用意义。

  • 标签: 铝塑膜,壳体,尼龙层,铝层,CPP层, VOC测试,正压吸附,壳电压检测
  • 简介: 摘要 本文依据某壳体零件的结构特点,充分考虑夹紧力、切削力等因素对零件加工精度的影响,对装夹方式、装夹基准选择、加工顺序、数控加工程序等方面进行优化完善,有效地克服工件在加工中出现的变形,保证了产品的加工精度,为此类零件提供了一个成功范例。

  • 标签: 数控加工 深孔 镗削 同轴度