简介：

简介：摘要目的构建miR-7-1启动子核心序列的真核表达载体，并初步探讨其意义。方法根据5’端缺失实验原理，设计引物，PCR法分别扩增含不同长度启动子序列和相同miR-7-1成熟体序列的产物；纯化、经KPNI和XHOI双酶切后将它们分别亚克隆入pGL3.0-Basic真核表达载体，并进行酶切及测序鉴定；将三个构建成功的pGL3.0-miR-7载体（分别命名为p-1189-miR-7，p-1731-miR-7，p-2192-miR-7）体外瞬时转染小鼠乳腺癌4T1细胞；用Real-timePCR检测各组中miR-7成熟体的表达水平；CCK-8法检测细胞生长的变化；最后，利用TRANSFAC数据库预测结合miR-7-1启动子核心序列的潜在转录因子。结果酶切和测序验证成功构建了p-1189-miR-7、p-1731-miR-7、p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体；与表达载体p-1189-miR-7、p-1731-miR-7转染组相比，表达载体p-2192-miR-7瞬时转染4T1细胞后可有效表达miR-7成熟体，并显著抑制4T1细胞的体外生长（p＜0.05），提示miR-7启动子序列-1593位点到-2024位点为核心序列；最后，预测结果显示NK2-同源盒-5（NK2-Homebox-5，NKX2-5）和肝细胞核因子4（hepatocytenuclearfactor4homeobox，HNF-4）可能是结合该核心序列的转录因子。结论成功构建了p-1189-miR-7，p-1731-miR-7，p-2192-miR-7三个miR-7-1启动子真核表达载体，并筛选到miR-7-1启动子的核心序列（-1593位点到-2024位点），为后续深入研究miR-7-1在乳腺癌发生中的作用及机制提供了前期实验基础。

简介：摘要目的探讨经皮穿刺髓核微型切除术联合臭氧注射治疗颈椎间盘突出症的临床疗效，为临床选择提供依据。方法将我院收治的47例颈椎间盘突出症患者分为两组，采用经皮穿刺髓核臭氧注射治疗19例（A组），联合髓核微型切除组28例（组），分别于术后立即、术后1周、1个月、3个月、6个月进行随访，评定其治疗效果。结果A组有效14例（73．7％），B组有效25（89．3％），两组病例均无明显并发症发生。结论经皮穿刺髓核微型切除术联合臭氧注射，利用经皮穿刺髓核微型切除术的不同作用，其疗效优于单用注射臭氧髓核消融术，是治疗颈椎间盘突出症的一种较好联合技术。

简介：目的：拟建立慢病毒载体携带的血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）基因短发夹RNA（knti6／shVEGFR2），研究其对鼠白血病的抑制作用。方法：用慢病毒载体系统构建Lenti6／shVEGFR2。检测pU6／shVEGFR2入门克隆转染、knti6／shVEGFR2表达克隆转导HL60细胞后的作用。流式细胞仪分析检测knti6／shVEGFR2对HL60鼠模型白血病的抑制效果。结果：pU6／shVEGFR2转染、Lenti6／shVEGFR2转导HL60细胞后48h细胞抑制率相近，之后pU6／shVEGFR2组细胞抑制率明显下降，而Lenti6／shVEGFR2组变化无显著差异。在异种移植白血病鼠模型中knti6／shVEGFR2感染显著抑制白血病细胞生长（P〈0．05）。结论：慢病毒介导的VEGFR2RNA干扰有可能成为治疗白血病的有效方法。

简介：摘要目的综合分析磷脂酰肌醇3激酶（Phosphatidylinositol3-kinase，PI3K）、蛋白激酶B(Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路在FSH（卵泡刺激素）促进卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用。方法选取在我院2015年2月-2016年2月收治的卵巢癌细胞患者临床资料42例作为研究对象，分别培养卵巢癌细胞株（SKOV3细胞与3AO细胞），随机分为FSH组与对照组，每组均为21例。采用MTT（四甲基偶氮唑蓝）法检测10U/L、30U/L、70U/L、150U/L等不同浓度以及FSH不同处理时间10h、20h、48h、70hSKOV3细胞与3AO细胞增殖情况；采用体外侵袭实验检测两组SKOV3细胞、3AO细胞的侵袭能力。结果FSH组与对照组SKOV3细胞与3AO细胞增殖在不同时间处理后的数据比较差异有统计学意义(P＜0.05)，FSH组与对照组SKOV3细胞与3AO细胞侵袭能力比较有差异有统计学意义(P＜0.05)。结论FSH可能是通过PI3K蛋白激酶B信号通路调节卵巢癌SKOV3细胞、3AO细胞中核因子κB的活性,实现对卵巢癌细胞的促增殖和侵袭作用.