简介：为揭示浑河流域水环境内分泌干扰物对水生态的潜在风险,利用兼并引物扩增获得鲫鱼卵黄蛋白原（Vtg）和核糖体蛋白L-7（RPL-7）基因部分碱基序列（分别为825和450bp）,建立以RPL-7为内参基因、定量鲫鱼Vtg基因表达的实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）方法,并将该方法用于定量浑河野生鲫鱼肝组织Vtg基因表达分析。结果显示：与上游对照点（S1）相比,7月下游各点（S4～S8）雄鱼、S4和S6点雌鱼肝组织的VtgmRNA表达水平皆显著升高（P〈0.05）;11月在雄鱼中未检出VtgmRNA的有效表达,雌鱼也仅在S2和S3点的表达水平升高（P〈0.05）。研究表明,浑河流域野生鲫鱼尤其是在7月明显受到了环境雌激素类物质的影响。另外,qRT-PCR方法能够灵敏检测出鲫鱼Vtg基因表达的时空差异。

简介：采用聚合酶链反应从炭疽芽孢杆菌减毒株ＹＢ１中扩增其保护性抗原（ＰＡ）的编码区基因，将其克隆至ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，并分步测定其序列。序列测定表明，该基因长２２０５ｂｐ，编码７３５个氨基酸残基，与文献报道的标准菌株Ｓｔｅｒｎｅ株的ＰＡ序列只有４个碱基的差异。

简介：目的克隆并鉴定乙型肝炎病毒表面抗原基因,为下一步构建该重组腺病毒载体以及进一步研究腺病毒载体的包装及在乙型肝炎病毒基因治疗中的作用.方法参照人HBVadr亚型序列,设计和合成S基因特异引物.应用PCR技术,从含有HBsAg的HBVDNA中扩增目的DNA,通过TA连接将其克隆入pGEM-Teasy载体,经限制性内切酶BgIⅡ/SalI鉴定后,进一步测序鉴定.结果从乙肝表面抗原阳性(HBsAg+)血清中成功提取HBVDNA,并以此DNA为模板,成功扩增出S基因,测序结果与GenBank中注册的相应序列比对,核苷酸序列的同源性高达92%～99%,预测氨基酸序列同源性亦达82%.结论从HBsAg阳性血清中成功克隆出S基因序列,为进一步构建重组腺病毒及后续实验奠定了基础.

简介：目的观察bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及调控α1(Ⅰ)原胶原基因序列的作用。方法用组织块法培养人皮肤成纤维细胞并传代，采用BrdU掺入的ELISA法，测定不同浓度的bFGF对成纤维细胞增殖的影响。构建三种人α1(Ⅰ)原胶原基因5′侧翼序列与报告基因氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的重组质粒，用FuGENE转染试剂转染成纤维细胞，同时用p—sv—b—GAL表达质粒转染细胞作为阳性对照组，ELISA法测定经bFGF处理后成纤维细胞CAT的表达量。结果在体积分数2％或10％小牛血清培养条件下，bFGF加入浓度从0．25ng／ml增至64．00ng／ml，作用24h后，各组细胞增殖数值之间差异有显著性意义(P<0．05)。用三种重组质粒分别转染细胞，bF-GF处理24h后，CAT相对表达量测定结果提示，bFGF组与对照组相比差异有显著性意义(P<0．05)。结论bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖有抑制作用，对胶原基因启动序列具有负性调控作用，且存在剂量依赖关系。

简介：目的为寻找猪囊尾蚴病新的免疫学候选诊断分子奠定基础。方法设计合成引物,用PCR法从cDNA文库中扩增出猪囊尾蚴抗原6H基因编码序列,将其克隆入PMD-18T载体,然后在原核表达载体PET-28a中亚克隆,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot观察表达结果。结果用PCR法扩增出一条大小约774bp的特异性片段,克隆质粒PMD-18T-6H和原核表达质粒PET-28a-6H作BamHⅠ和XhoⅠ双酶切和以重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段。诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约33kDa大小的融合蛋白条带,Westernblot结果显示其可与猪囊尾蚴病人血清起反应。结论本实验成功地克隆了猪囊尾蚴抗原6H编码基因,并在原核细胞中进行了表达及鉴定,为进一步免疫诊断研究奠定了基础。

简介：

简介：目前临床上预防结直肠癌术后复发与转移主要以化疗为主,但化疗对肿瘤非特异性,敏感性低,全身副作用大,效果欠佳.

简介：纤维蛋白质既参与血液凝固,又参与血液流变学特征的变化,流行病学调查和临床研究发现血浆纤维蛋白原水平增高可能是缺血性心脑血管疾病发病的一个独立危险因素.同时发现纤维蛋白原某些基因多态性与血浆纤维蛋白原水平相关.本文就纤维蛋白原及其基因单核苷酸多态性与缺血性脑卒中的研究进展做以下综述.

简介：目的研究血管紧张素原（Angiotensinogen，AGT）基因5个单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphisms，SNPs）及其构成的单倍型在中国汉族人群中与原发性高血压的相关性及各SNP与高血压患者血浆肾素活性（PRA）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血浆和尿醛固酮（Aid）水平的关系。方法采用MassARRAY^TM系统质谱检测技术，在500例原发性高血压患者和500名正常对照者中，对AGT基因启动子区域的C-532T、A-20C、G-6A及编码区的T174M和M235T进行基因分型。用放免法检测高血压患者PRA、AngⅡ、血尿Aid水平。结果5种SNP的等位基因频率和单倍型分布在原发性高血压组和对照组中均无显著差异（P〉0．05）；男性高血压患者中C-532T多态CT＋TT基因型个体尿Aid水平显著高于CC型个体（6．52vs5．19μg/d，P=0．03）；女性高血压患者G-6A多态GG＋GA基因型个体血Aid水平显著高于AA型个体（78．63vs58．86pg／ml，P=0．015）；女性高血压患者M235T多态MM＋MT基因型个体mAid水平显著高于TT型个体（78．73vs58．81pg／ml，P=0．03）；A-20C多态AC＋CC基因型与G-6A多态GG＋GA基因型联合者尿Aid水平（P〈0．05）、体重指数（P〈0．01）显著高于其他联合基因型。结论AGT基因5个SNP及单倍型分布在高血压患者和正常血压对照之间无显著差异，AGT基因的SNP分布与原发性高血压患者血尿醛固酮水平有关。

简介：摘要目的本课题旨在研究血管紧张素原（AGT）基因C521T单核苷酸多态性与脑梗死的关系，从分子水平探讨脑梗死发病的机制及特点。方法采用病例-对照研究，结合聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术，检测82例脑梗死患者和89例对照者的AGT基因521位点基因型和等位基因，比较和分析病例组与对照组间该基因型及等位基因的分布频率差异。结果脑梗死组与对照组比较,AGT521TT基因型频率22.0%显著高于对照组6.7%,差异有显著性（P<0.05）；脑梗死组中AGT521T等位基因频率为28.0%，与对照组比较,显著高于对照组11.8%,差异有显著性（P<0.05）。有无高血压CI之间比较各基因型频率和各等位基因频率无显著性差异，P＞0.05。结论AGT521TT基因型和T等位基因可能为脑梗死的易患因素。在本组人群中AGTC521T碱基突变不依赖是否致高血压而与脑梗死的发病相关。

简介：摘要：目的：探讨梅毒螺旋体抗原基因的克隆、表达以及在临床检验的应用价值。方法：采用基因扩增技术对全长基因进行分离，将基因工程应用于对表达载体Pgex-2T的融合、充足及克隆中，获得带有梅毒螺旋体47×103特异性抗原基因的重组菌株，利用大肠杆菌表达系统实现充足融合蛋白的获取。利用亲和层次得到纯品。将ELISA应用于检测中，采集非梅毒患者、梅毒患者分别30份血清标本，观察检验结果。结果：克隆、表达、纯化了47×103特异性抗原。ELISA检测30份非梅毒患者的血清均显示阴性，检测30份梅毒患者的血清标本均为阳性，未见特异性交叉反应。结论：通过克隆、表达及纯化得到了梅毒螺旋体的特异性抗原，该方法可准确实现对梅毒的检测且操作简单，其应用提高了梅毒检测的准确性。

简介：目的分析2012-2015年湖北省麻疹流行特征和病原基因特征,为制定消除麻疹策略提供依据。方法通过传染病报告系统和麻疹病例专报系统,收集2012-2015年湖北省麻疹报告病例,描述病例的时间、地区、年龄分布等特征,并对病毒基因型别进行分析。结果2012-2015年,湖北省共报告麻疹病例3258例,年平均发病率约为14.063/100万,2014和2015年发病率明显增高。2012-2015年每年麻疹的发病高峰不同。麻疹发病年龄主要以〈2岁的婴幼儿和≥15岁的成人为主。麻疹发病人群主要集中在散居儿童,其他依次是农民、家政家务、幼托儿童和学生。麻疹病原学监测发现2012-2015年湖北省麻疹病毒基因型主要为H1a亚型,仅发现一例D8亚型,存在少数疫苗相关病例。结论2012-2015年湖北省麻疹发病率明显增高,麻疹病毒主要为H1a亚型,发现一例D8亚型。建议进一步加强麻疹疫情的监测,做好适龄儿童和流动务工人员的常规免疫和查漏补种。

简介：目的研究纳络酮对加速度作用后产生超重状态的大鼠脑组织中脑啡肽、强啡肽的作用及尾部痛阈的影响.方法将大鼠分为对照组、生理氯化钠溶液组和纳络酮组.分别施加+1加速度(+Gz)、高+Gz和±Gz(正、负加速度)交替的作用.作用后测定甩尾反射潜伏期和脑啡肽、强啡肽的含量.结果高+Gz和±Gz交替作用使二种肽类含量增多,痛阈增高;且±Gz交替作用明显.生理氯化钠组与对照组比较,无显著性差异;纳络酮组与对照组和生理氯化钠溶液组分别比较,二种肽类含量虽有所减少,但无统计学意义,大鼠尾部痛阈降低明显.结论高+Gz和±Gz交替作用使两种肽类含量增多,痛阈增高;且±Gz交替作用明显.纳络酮可以拮抗两种肽类的镇痛作用,并降低大鼠痛阈.

简介：肝纤维化是慢性肝损伤的修复反应，以胶原为主的细胞外基质（ECM）在肝内大量沉积的病理过程。其形成机制较为复杂，各种细胞因子彼此相互作用，形成细胞因子网络，共同调控肝纤维化的发生、发展。抗肝纤维化治疗策略主要包括调控HSC活化增殖或促其凋亡、抑制胶原合成或促其降解、细胞因子治疗和间充质干细胞治疗等。反义核酸技术是一种发展迅速并极富应用前景的基因控制技术。它是利用DNA或RNA分子通过WatsonCrick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合，通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译，从而抑制目的基因的表达，主要包括反义寡核苷酸技术、RNA干扰技术和三股螺旋结构寡核苷酸技术。本文综述了应用反义核酸技术调控相关基因的表达来防治肝纤维化的研究现状。

简介：摘要目的分析辽宁地区手足口病(hand, foot and mouth disease, HFMD)的主要病原学构成并对柯萨奇病毒(coxsackievirus A CV-A)组6型(CV-A6)和10型(CV-A10)进行基因特征分析，为进一步做好HFMD防控工作提供依据。方法对2018年辽宁地区的4 744份临床标本进行肠道病毒的核酸检测，选择核酸阳性的688份标本进行病毒分离培养鉴定，对6株CV-A6和10株CV-A10进行VP1区核苷酸序列测定及其分子特征分析。结果发病者以1～4岁幼儿为主，高发为7～8月份。4 744份HFMD临床标本中检测到核酸阳性标本3 161份，阳性率66.63%，以除EV71和CA16以外的其他肠道病毒为主(86.68%)。2018年辽宁省分离到的病毒株以CV-A6为主。序列分析显示，CV-A6的流行株属于D3亚群，CV-A10的流行株C基因型。结论辽宁省HFMD发病人群主要以1～4岁幼儿为主，夏季为高发季节，CV-A6是2018年辽宁省HFMD病原的主要流行性别。

简介：摘要RAS在血压及心血管稳态调节中占有极其重要的地位，它的过度激活与冠心病、高血压、心肌病等疾病的发生、发展相关。血管紧张素转化酶（ACE）和血管紧张素原（AGT）是其中的两个关键成分。其基因多态性对心血管疾病的影响近年来研究较多。现将这方面的研究作一综述。

简介：为探讨中药汉防已甲素对肾病综合征的影响，采用单侧肾切除加两次注射阿霉素制造肾病综合征大鼠模型，观察分别经汉防已甲素和络活喜治疗后肾皮质Ⅳ型胶原基因表达。结果：两药均能使模型鼠肾皮质Ⅳ型胶原mRNA表达明显下调。提示汉防已甲素可预防和延缓肾病综合征，其作用与络活喜相似。

简介：以TaqI限制性内切酶测定Fg基因的多态性与儿童单纯性肥胖进行关联研究，发现基因型的分布在单纯性肥胖组和正常体重组有显著差异（基因型分布P=0.029；等位基因频率P=0.005），携带突变等位基因的儿童易于肥胖。从而推测Fg基因可能是儿童单纯性肥胖的基因标记。研究结果提示：通过测定基因基础不仅可以预测单纯性肥胖的倾向，而且可以为建立预防和干预肥胖的模型提供理论依据。

简介：例题设P,A,B,C球O上的四个点PA,PB,PC两两垂直,且PA=PB=PC=1,求球O的体积和表面积.分析此题的难点是学生没有对关键条件PA,PB,PC两两垂直＂进行深入分析,也没有从“PA=PB=PC=1”这个条件．发现更为重要的隐含信息．关键是无法将长度相等、两两垂直且有公共点的三条线段构成的几何体。还原成正方体，使得图形画不出。题目条件不会用．

简介：阿片受体及其内源性肽配体可调节疼痛。在慢性疼痛过程中，强啡肽既表现出由阿片受体介导的镇疼性效应，又表现出由未知机制介导的促疼性效应，此二者效应的产生完全依赖于强啡肽的浓度，但其调节机制还不清楚。单纯的神经元研究未能给出令人信服的解释，因而研究星形胶质细胞是否参与这一过程具有极其重要的意义。