简介：RNAi是指通过双链RNA介导特异性降解靶mRNA，导致转录后水平基因沉默的现象。其作用途径有RdRP依赖的RNAi的途径与非RdRP依赖的RNAi途径2种。利用RNAi的基因敲除技术在dsRNA序列选择、质粒或病毒为载体的dsRNA体内合成、发夹样siRNA的转录、dsRNA的导入方法等方面取得了很大进展，在研究人类或其他生物基因组中未知基因及蛋白质的功能等领域具有诱人的应用前景。

简介：RNA干扰（RNAi）是生物体内源基因发生转录后特异性降解的一种生理现象，作为抵抗病毒的免疫机制，广泛存在于生物体内。RNAi在秀丽隐杆线虫中的发生机制已明确，但昆虫的系统性RNAi不同于线虫，在昆虫中尚未发现线虫跨膜蛋白SID．2的同源蛋白，且果蝇中不存在依赖于RNA的RNA聚合酶（RdRP），但存在具有相似活性的物质。昆虫发生RNAi的效率不仅与靶标基因自身及双链RNA的选择有关，而且与虫体的发育状态及摄入双链RNA的剂量相关。随着RNAi在昆虫中作用特点的阐明，RNAi的应用价值也逐渐体现。近年来，通过RNAi沉默靶标基因，不但促进了昆虫基因功能研究的发展，而且被广泛用于重要农业害虫抗药性基因的研究。最新研究表明，RNAi结合第2代测序技术，针对非模式昆虫，能迅速找到具有致死效应的靶标序列，加快了利用RNAi技术生产生物农药的步伐。

简介：运用RNA干扰（RNAi）技术可以通过以下策略进行肿瘤的靶向治疗：抑制癌基因、生长因子及其受体的过表达，从而抑制细胞生长；干扰细胞周期蛋白及其相关基因的表达，从而抑制细胞增殖；抵抗致癌病毒的入侵；抑制抗凋亡基因的表达；上调和恢复抑癌基因的功能；抑制肿瘤发生过程中的关键酶；抑制与肿瘤转移有关的血管生成；靶向端粒酶；靶向耐药基因。尽管目前RNAi已经较为广泛地应用于基因功能研究和肿瘤疾病的基因治疗研究中，但其在应用过程中还有许多亟待解决的问题。我们就RNAi及其在肿瘤疾病基因治疗中的应用策略和存在的问题做一综述。

简介：美国德州拉斯市贝勒大学医学中心的RobertPerrillo及其同事在AmJGastroenterol上报告，在肝炎Be抗原（HBeAg）阴性的慢性乙肝患者中，经60周聚乙二醇干扰素α-2a治疗后可产生较高的持续病毒学应答率，其应答率比通常使用的48周标准治疗方案高。

简介：多发性硬化症（MS）是一种慢性中枢神经系统疾病,目前在临床上难以治愈.β-干扰素（IFN-β）是一种多功能细胞因子,具有抗病毒、抑制生长、诱导凋亡和免疫调节等作用.近年来IFN-β在缓解MS急性发作和延缓病程方面表现出很好的效果,但IFN-β对MS的作用机制却仍不明了.本文简要综述近年来有关IFN-β治疗MS的作用机理.

简介：基因枪和农杆菌介导的遗传转化是目前常用的两种单子叶植物遗传转化方法。载体的发展和改良是提高植物遗传转化效率的重要基础，RNA干扰载体和过表达载体是目前通过遗传转化研究植物基因功能的主要工具。Gateway克隆技术是一种基于lambda噬菌体特异位点重组特性的通用克隆技术，该技术可以将大批目的基因方便、快捷地连接到受体载体上。本文利用Gateway技术结合传统酶切、连接方法，构建了适用于单子叶植物基因枪和农杆菌转化的RNA干扰Gateway载体pAHC．PSK—RNAi、pClean—G185．RNAi和过表达Gateway载体pAHC．PSK—OE和pClean—G185一OE，为利用基因枪和农杆菌介导的遗传转化，在小麦和水稻等单子叶植物中进行规模化基因功能研究奠定了基础。

简介：【目的】甜瓜和棉花均是棉蚜及烟粉虱的适宜寄主,瓜套棉种植模式为2种害虫混合危害提供了条件,该模式下哪种害虫具有竞争优势值得探讨。【方法】通过田间定点调查和室内行为学观察,研究了吐鲁番地区瓜套棉种植模式下棉蚜和烟粉虱的发生动态及竞争干扰。【结果】田间观察分别于2011和2012年进行,在瓜套棉种植模式棉花、甜瓜上,棉蚜的发生期较烟粉虱早,但随着烟粉虱田间种群数量增加,对棉蚜产生明显的干扰和竞争作用,8月下旬至9月上旬烟粉虱成为田间优势种群。室内行为观察表明,2种害虫共存状态下均表现出以烟粉虱为优势的竞争作用,主要行为表现为通过触角、足的驱赶行为和进入棉蚜活动区域干扰等。当虫量低于4头·皿~（-1）时,无论棉蚜和烟粉虱哪种昆虫先接入,相互间的影响和干扰都很少。当2种昆虫数量均增加到8头·皿~（-1）时,烟粉虱成虫以触角、足等干扰棉蚜的行为频次显著增多。不同的定殖时间下,无论棉蚜和烟粉虱哪种昆虫先接入,随着定殖时间的延长,烟粉虱通过触角、足以及进入棉蚜活动区域驱逐和干扰棉蚜的行为都呈递减的趋势。【结论】在瓜套棉种植模式下,烟粉虱较棉蚜具有显著的竞争优势。

简介：大麻THCA合成酶基因CsTHCA在调控大麻THC含量方面起着重要的作用。通过RT-PCR方法从大麻中克隆了CsTHCA,该基因开放阅读框全长1638bp,共编码545个氨基酸。通过pSKint中间载体,构建CsTHCARNA干扰植物转化载体并转化大麻茎尖,获得转基因植株,通过分析大麻中THCA合成酶基因的表达并结合薄层色谱法和SPE-HPLC法发现,转基因植株中基因表达量降低且THC含量降低,这表明CsTHCA通过某种机理正调控THC的含量。

简介：用生物技术大规模生产药物已形成产业化,取得了令人鼓舞的结果,获得了可观的经济

简介：目的：获得抑制效果好的泛素C端水解酶LI（UCH—L1）基因小干扰RNA（siRNA）干扰载体。方法：根据Gen—Bank中大鼠UCH—L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列，将4对寡榱苷酸序列退、k成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR中构建4个siRNA表达质粒，测序鉴定后将4个siRNA表达磺牝分别转染HEK293细胞，利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果；将干扰效果最好的质粒包装成腺病毒，感染大汛血管平滑肌细胞（VSMC），并采用TNF-a干预诱导UCH—Ll表达升高，Western印迹验证干扰效果。结果：测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR；qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载沐对UCH—Ll表达的抑制程度最高，将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFd湾导的U（：H—I。l表达升高。结论：构建并筛选出干扰效果好的UCH—LlsiRNA干扰载体。

简介：目的：为进一步的临床试验提供重组人ω-干扰素（rhIFN-ω）的分布和排泄试验数据。方法：用^125I同位素示踪法结合三氯醋酸（TCA）沉淀法测定各主要器官组织的总放射性浓度和酸沉淀部分放射性浓度，获得rhIFN-ω的尿粪排泄和胆汁排泄数据。结果：各主要器官组织的总放射性浓度AUC0-dh排序由大到小依次为：尿、胸腺、胆囊、膀胱、肾、肾上腺、肠内容物、肠淋巴结、空肠、肺脏、血清、卵巢、脾、肝、肌肉、心脏、骨髓／股骨、睾丸、脂肪、脑。皮下注射^125I-rhIFN-ω后48h尿和粪的累计排出量分别达到注入放射量的87．9％±2.8％和4．0％±1．6％，尿粪合计排出量占注入放射性量的91．9％±2．1％，而皮下注射^125I-rhIFN-ω后20h内胆汁排泄放射性量占注入放射性量的3．34％。结论：rhIFN-ω在泌尿系统分布比较高，与血清蛋白结合比较少，在脑、脂肪和肌肉等组织的药物浓度最低。rhIFN-ω主要以尿的形式排泄。

简介：目的：构建能介导结缔组织生长因子（CTGF）基因RNA干扰的复制缺陷型腺病毒表达载体。方法：以大鼠CTGF基因为靶序列，设计并合成含编码短发夹RNA序列的寡核苷酸，构建腺病毒穿梭质粒P-shuttle-CTGF，酶切及测序分析正确后，与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染AD-293细胞，进行病毒包装，得到腺病毒载体Ad．H1-CTGF，用该载体感染HSC-T6细胞，观察其对CTGF基因表达抑制的效果。结果：构建的腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF经酶切、测序分析证实正确；包装的病毒载体滴度为4×1010PFU／mL，感染HSC-T6细胞后，Western印迹证实CTGF表达显著减少。结论：构建的腺病毒载体Ad．H1-CTGF可有效抑制HSC-T6中CTGF的表达，为抗纤维化研究提供了有力的工具。

简介：[背景]红火蚁入侵后对新发生地区生物多样性的影响及与土著物种的关系是入侵生物学研究的重点之一，解释红火蚁与类似生态位的土著蚂蚁的关系对全面了解该蚁入侵的生态学效应具有重要意义。[方法]通过野外模拟设置蚁巢，观察、记录距离红火蚁和黑头酸臭蚁蚁巢30（3Ill处诱集到的黑头酸臭蚁工蚁在红火蚁人侵前、入侵中及移除后的数量变化，研究短期入侵红火蚁实验种群与荒草地和荔枝园黑头酸臭蚁间的干扰竞争。[结果]红火蚁实验种群短期入侵对荒草地生境黑头酸臭蚁的干扰较明显，而对荔枝园生境黑头酸臭蚁的干扰较小；红火蚁未入侵荒草地生境黑头酸臭蚁受干扰最明显，移除红火蚁20rain后，处理诱饵上召集的黑头酸臭蚁数量才与入侵前差异不显著；红火蚁未入侵荔枝园生境黑头酸臭蚁受干扰最小，移除红火蚁仅5min后，处理诱饵上黑头酸臭蚁数量就恢复到入侵前，甚至超过入侵前数量。[结论与意义]红火蚁入侵对黑头酸臭蚁的觅食行为存在较大的干扰抑制作用，其影响程度与生境的复杂性有着密切关系。研究结果可为了解红火蚁入侵的生态学效应提供证据。

简介：甘蓝型油菜是一种重要的油料作物,为了改良其种子脂肪酸组分,提升其经济价值,本研究分析了油菜种子发育时期脂肪酸合成积累模式及BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因的表达规律,认为这3个基因在种子发育中后期（授粉后25d起）的高效表达对油酸合成积累有着重要影响。通过Napin启动子诱导对油菜植株中BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因进行RNAi共干扰抑制,以达到提升油酸含量的目的。试验结果表明,转基因油菜种子中BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因的表达受到强烈抑制,种子中油酸含量由66.76%提升至82.98%,且油脂合成的相关基因同步出现表达上调。

简介：目的：观察DcR3基因小干扰RNA（siRNA）对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤DcR3基因表达的影响。方法：建立结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体注射脂质体与DcR3siRNA混合物,转染DcR3siRNA,免疫组织化学及RT-PCR检测观察DcR3基因的表达。结果：建立了结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型;治疗后,治疗组移植瘤明显减小,空白对照组、阴性对照组肿瘤体积显著大于治疗组（P〈0.01）;各组肿瘤组织中DcR3基因均有不同程度的表达,治疗组表达程度明显低于阴性对照组及空白对照组（RT-PCRP〈0.05,免疫组化P〈0.01）。结论：人结肠癌SW480细胞在裸鼠皮下有良好的成瘤性;脂质体与DcR3siRNA混合物可特异性抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤内DcR3基因的表达。

简介：目的探讨变应性真菌性鼻窦炎的诊断以及治疗方法。方法通过临床表现、皮肤激发试验、血清嗜酸性粒细胞、鼻腔真菌涂片、鼻窦CT、鼻内窥镜等专科检查，明确21例变应性真菌性鼻窦炎患者，给予丙酸氟替卡松鼻喷剂喷鼻、151服氯雷他定片10mg（1次／d）、生理海水鼻腔冲洗1～2次／d，治疗1周后，入院行鼻内窥镜鼻息肉切除鼻窦Fess手术，术中彻底清除病变鼻窦内真菌团块或褐色泥砂样真菌泥后，氟康唑氯化钠注射液冲洗窦腔，术后氟康唑氯化钠注射液冲洗清洁术腔，每周1～2次，连续1个月，鼻腔局部继用糖皮质激素3—6个月，获得良好的治疗效果。结果21例变应性真菌性鼻窦炎患者中，单侧鼻窦发病16例，占76．2％，双侧鼻窦发病5例，占23．8％，上颌窦发病16例，占76．2％，上颌窦合并筛窦发病4例，占19．0％，蝶窦发病1例，占4．8％，伴鼻息肉15例，占71．4％，伴有哮喘史8例，占38．1％，术后2例复发，占9．5％。结论变应性真菌性鼻窦炎临床诊断并不困难，治疗以手术为主，但术前糖皮质激素的应用，手术时机选择，术后对鼻腔与鼻窦变应反应的处理，将直接影响预后。

简介：目的探究本课题组研发的亲和吸附材料特异清除肠源性内毒素的有效性及安全性。方法运用阑尾结扎穿孔的方法建立犬肠源性内毒素血症模型,进行灌流治疗。实验过程中选取多个时间点,监测生命体征,采血检测内毒素含量及血液生理生化指标。结果灌流吸附1、2h后内毒素含量为（0.49±0.22）、（0.034±0.00）Eu/mL,与灌流开始（7.25±1.18）Eu/mL相比,差异有显著性（P〈0.05）。灌流2h后平均清除率R=99.52%。灌注治疗后白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、总蛋白、白蛋白、球蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐指标均有所下降,与灌流开始相比差异有显著性（P〈0.05）,各值均在正常值范围。灌流过程中犬的生命体征平稳。结论本课题研发的亲和吸附材料能高效清除实验犬血液中内毒素并有良好的血液相容性。

简介：目的研究脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）对实验性变应性鼻炎的影响.方法SD大鼠40只随机分4组,其中,变应性鼻炎组经腹腔注射及鼻腔滴入卵清白蛋白（OVA）致敏,建立变应性鼻炎动物模型;LPS刺激组经鼻腔滴入LPS（10μg/100μL）;变应性鼻炎＋LPS刺激组为大鼠激发成变应性鼻炎后再以LPS滴入鼻腔.观察各组的症状变化,如喷嚏,流涕等.行常规HE及甲苯胺蓝染色观察各组鼻黏膜炎性细胞的浸润情况,并行高倍镜下嗜酸性粒细胞计数.结果①变应性鼻炎＋LPS刺激组过敏症状评分高于其余各组（P＜0.01）;正常对照组及LPS刺激组症状评分差异无显著性（P＞0.05）.②变应性鼻炎＋LPS刺激组鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数高于变应性鼻炎组,差异有显著性（P＜0.05）;正常对照组及LPS刺激组鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数差异无显著性（P＞0.05）.结论LPS刺激可以加重变应性鼻炎的症状及鼻黏膜组织的病理学改变.

简介：目的建立稳定且易操作的急性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎大鼠模型,以促进对急性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎的实验研究,指导临床。方法将SD大鼠随机分为4组。A组,免疫抑制＋右侧鼻腔填塞Merocel海绵条＋右侧鼻腔滴入烟曲霉孢子悬液;B组,右侧鼻腔填塞Merocel海绵条＋右侧鼻腔滴入烟曲霉孢子悬液;C组,免疫抑制＋右侧鼻腔滴入烟曲霉孢子悬液;D组：对照组。A、B、C组大鼠连续3d鼻内滴入烟曲霉孢子悬液,4组大鼠均于第1次滴菌后第4天处死。取内眦静脉血监测大鼠免疫抑制情况,对鼻部组织行真菌培养和组织病理学观察。结果免疫抑制组大鼠血中性粒细胞明显降低,接种烟曲霉当天中性粒细胞计数〈0.1×109/L,其余两组变化不明显。病理结果显示A组90%（9/10）大鼠鼻腔鼻窦组织被烟曲霉侵袭,10%（1/10）肺部可见侵袭;B、C、D组大鼠无鼻部烟曲霉感染,但C组中20%（2/10）大鼠肺部可见烟曲霉侵袭。真菌培养结果显示A组71%（5/7）大鼠鼻部组织烟曲霉培养阳性,其他组均为阴性。结论单纯对大鼠进行免疫抑制或单纯造成大鼠鼻腔堵塞均不易造成大鼠鼻腔被真菌侵袭;免疫抑制基础上,对大鼠鼻腔填塞Merocel海绵条后再滴入烟曲霉可以成功建立急性侵袭性真菌性鼻-鼻窦炎模型,其成模率高,模型稳定,操作简易,有利于对此疾病在免疫、病理、药物等方面的深入研究。

简介：犬传染性肉瘤是犬类动物生殖系统自然发生的肿瘤,其具有独特的同种与异种移植特性.本文着重从肿瘤细胞的生物学特性探讨肿瘤模型的建立,该模型具有可靠的稳定性、模拟性及接种的多样性,能够在难以接种肿瘤的器官及大动物体内建立较为理想的原位移植性肿瘤模型,为临床及影像学科开展原位肿瘤方面的研究提供了较好的实验基础.