简介:摘要目的探讨重组人血小板生成素与重组人白介素-11对急性白血病化疗后血小板减少的治疗效果。方法选择我院2015年3月至2017年2月收治的72例急性白血病化疗后血小板减少患者为研究对象,随机分为A、B两组,每组36例,A组接受重组人血小板生成素治疗,B组接受重组人白介素-11治疗,对两组患者血小板变化及不良反应情况进行观察。结果A组血小板最大值、最小值均较B组高,血小板恢复至70×109/L时间均较B组短,两组差异有统计学意义(P<0.05);A组不良反应发生率11.11%,明显较B组41.67%低(P<0.05)。结论重组人血小板生成素治疗急性白血病化疗后血小板减少效果优于重组人白介素-11,安全性较高,值得临床推广。
简介:目的构建人survivin基因shRNA重组腺病毒载体,为缺氧性肺动脉高压(Hypoxicpulmonaryhypertension,HPH)的基因治疗研究提供实验基础。方法构建survivin-siRNA表达质粒,测序鉴定正确后,将survivin-siRNA表达质粒与含有腺病毒右臂的骨架质粒pBHGE3共转染至人293A细胞,包装成腺病毒Ad-survivin并扩增,TCID50法测定病毒滴度。将人肺动脉平滑肌细胞缺氧培养24h,并将细胞分为空白对照组(Con组),阴性对照组(Ad-LacZ组),不同Adsurvivin序列的干扰组(sh1组、sh2组、sh3组)。Ad-survivin感染缺氧人肺动脉平滑肌细胞,Westernblot检测survivin蛋白,验证重组腺病毒干扰效果。结果(1)将shRNA片段与pAd-U6-CMV连接后的质粒进行测序,结果提示目的基因片段插入成功;(2)TCID50法测定病毒Ad-survivin-shRNA1、Ad-survivin-shRNA2和Ad-survivin-shRNA3的滴度分别是1×1010,1.2×1010,1×1010;(3)sh2组缺氧人肺动脉平滑肌细胞内survivin蛋白表达明显低于其他4组(P〈0.05)。结论本研究成功构建人survivin腺病毒载体,为研究survivin基因在缺氧性肺动脉高压中的作用提供了实验基础。
简介:目的构荧光蛋白和canstatin融合蛋白基因的真核表达载体pEGFP-N1/canstatin,以深化研究血管生成抑制剂canstatin的生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性。方法提取人胚肝总RNA,RT—PCR扩增canstatin基因片断,T—A克隆到pGEM—T中,从pGEM—T/canstatin克隆载体中,将人canstatincDNA亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1,构建含人canstatincDNA的重组质粒pEGFP-N1/canstatin,通过酶切鉴定出重组体并测序分析。结果成功构建pEGFP—N1/canstatin真核表达载体,双酶切及测序鉴定显示canstatin基因片断正确插入载体,与Genebank中报道的序列一致。结论pEGFP—N1/canstatin真核载体的构建为进一步进行canstatin蛋白表达和活性研究以及canstatin用于基因治疗奠定了基础。
简介:目的:在FUS-50L生物反应器中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pET28a(+)-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS株,生产重组颗粒溶素(GNLY)。方法:选取含pET28a(+)-GNLY的BL21(DE3)pLysS菌株单个克隆分级培养,将制备的二级种子液接种于发酵罐中。在发酵过程中,控制溶氧为30%~50%,温度为37℃;在基础培养基内生长4h后,补加以甘油为碳源的补料,继续生长到11h;加入葡萄糖至终浓度为1%,30℃诱导表达6h;收集菌体,纯化制备目的蛋白。利用Western印迹检测重组蛋白的抗原性,用CFU方法检测其生物学活性。结果:发酵液中最终菌体密度达80g/L;纯化所得重组蛋白约占菌体总蛋白的5%,含量为60mg/L;经鉴定所获重组颗粒溶素有较好的免疫学活性和生物学活性。结论:用含重组质粒pET28a(+)-GNLY的大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达系统,可得到具有生物活性的重组颗粒溶素,为大批量生产提供了条件。
简介:【摘要】目的:探讨重组人血小板生成素和重组人粒细胞刺激因子治疗化疗放疗后的骨髓抑制的临床疗效分析。方法:选取2018年8月至2022年8月收治的30例化疗放疗后骨髓抑制患者作为研究对象,用随机数字表法将其分对照组和观察组,各15例,对照组接受重组人血小板生成素治疗,观察组接受重组人粒细胞刺激因子治疗,比较两组患者白细胞、中性粒指标、血小板指标、不良反应发生率。结果:观察组第1d、第3d时中性粒细胞、白细胞指标更高,血小板恢复最大值更高(P0.05)。结论:重组人粒细胞刺激因子治疗化疗放疗后骨髓抑制,能更好的控制机体白细胞、中性粒细胞指标,且可确保用药安全。
简介:病例:患者,男,67岁。因“贲门癌术后6月,再次化疗”入院。诊断为:贲门黏液腺癌术后pT4N1M0临床IIIA期。既往史:有高血压病史20年,最高血压150/90mmHg,长服口服苯磺酸氨氯地平片5mg,qd+酒石酸美托洛尔片25mg,qd,有心房颤动史10年。有吸烟史40年,每日约20支,手术后戒烟。否认饮酒史。查体:体温37.4°C,脉搏134次/min,呼吸30次/min,血压110/75mmHg。胸廓外形正常,可见左侧胸壁一弧形手术疤痕形成20cm,其余未见异常。患者曾于2016年1月7日无诱因情况下出现中上腹不适,进食后饱胀感,嗳气,无呕吐、黑便、腹痛、腹泻。2016年1月21日胃镜提示:贲门癌(食管下端累及),胸部增强CT提示:两肺未见明显异常,主动脉及冠状动脉管壁钙化,附见肝脏囊性灶。2016年1月25日胃镜活检病理提示:低分化腺癌,胃镜病理提示:黏液腺癌。2016年1月26日上腹腔增强CT提示:贲门胃壁增厚,肿瘤性病变可能(请结合胃镜)。腹膜后小网膜多发小淋巴结,肝脏多发囊肿,左肾上极小囊性灶,腹主动脉管壁多发钙化。2016年2月23日行左胸下段食管+近段胃大部切除,胃-食管主动脉弓下吻合术。
简介:摘要目的表达和纯化重组人Ⅲ型胶原蛋白(rhCol),并评价其性能。方法构建重组基因工程菌pET30a(+)-1880/pACYCDuet-hy726/BL21(DE3),稳定共表达rhCol和脯氨酰羟化酶。通过大肠杆菌高密度发酵与盐析和柱层析蛋白纯化技术制备并纯化rhCol。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定rhCol的纯度,全自动蛋白质多肽测序仪测定rhCol的N端氨基酸序列,紫外分光光度法测定rhCol中的羟脯氨酸含量,噻唑蓝法评价rhCol的细胞相容性。结果高密度发酵最终菌体湿重约200 g/L,表达量约3 g/L,通过亲和层析获得的rhCol的纯度大于95%。rhCol的羟脯氨酸含量为11.44%,其水溶性及细胞相容性良好。结论本研究制备的rhCol可作为一种优良的生物材料广泛用于皮肤护理及生物医药等领域。
简介:[摘要]重组人血管内皮抑制素(恩度)是我国自主研发的抗肿瘤分子靶向药物。临床研究表明,本品能抑制血管内皮细胞增殖和血管生成,从而抑制肿瘤生长;与化疗联合使用可以控制和稳定晚期恶性肿瘤的发展,改善患者生活质量,且毒性低,是一种安全有效的药物,在临床治疗得到较好的效果。本文综述了恩度联合化疗、放疗等治疗方案在非小细胞肺癌、大肠癌、胃癌、食管癌、宫颈癌等的临床研究和应用进展。
简介:摘要:目的:探讨在儿童生长激素缺乏症与特发性矮小症治疗中应用重组人生长激素的施治效果。方法:试验对象选择于2019.04-2021.03期间,在我院儿科接受治疗的儿童生长激素缺乏症与特发性矮小症患儿50例,将25例生长激素缺乏症患儿作为治疗1组,将25例特发性矮小症患儿作为治疗2组,均接受重组人生长激素施治,统计组间生长情况、临床指标及用药不良反应差异性。结果:治疗1组与治疗2组在经过3个月、6个月及9个月治疗后,身高增值与生长速度明显增加,且治疗2组优于治疗1组,P<0.05;治疗1组及2组施治后促甲状腺激素与胰岛素样生长因子-1水平明显高于施治前,P<0.05;治疗1组与治疗2组用药不良反应无显著差异,P>0.05。结论:通过将重组人生长激素应用于矮小症患儿治疗中,可显著提升患儿身高增长速度的同时,还能对其体内促甲状腺激素与胰岛素样生长因子-1水平进行改善,且不易增加患儿用药不良反应风险,适宜临床借鉴。
简介:目的探讨重组人Elafin在大鼠肝脏缺血-再灌注损伤中的保护作用。方法将50只大鼠随机均分为5组,即正常对照组、肝脏缺血-再灌注损伤模型组以及Elafin低、中、高剂量组。对Elafin低、中、高剂量组给予不同浓度的重组人Elafin进行治疗,然后取血液及肝脏标本,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)水平,测定肝组织中髓过氧化物酶(MPO)和一氧化氮(NO)含量,并观察肝脏的病理组织学改变。结果缺血-再灌注后大鼠肝组织损害较重,血清ALT和AST以及LDH水平明显升高(P〈0.001),肝组织中MPO和NO含量明显升高(P〈0.001);若手术前给予大鼠一定浓度的重组人Elafin,可使ALT,AST,LDH,MPO及NO水平明显降低(P〈0.05)。结论重组人Elafin对肝脏缺血-再灌注损伤有一定的保护作用。