简介：有许多不同的酵母已经有效地被利用来分析或表达真核蛋白。酵母的优点是生长快速，发酵条件可轻易批量化，设备相对简单．各项遗传和生物特性都被充分了解，更重要的是可以像哺乳动物细胞一样做转译后的修饰．所以非常适合于真核重组蛋白的大量生产。

简介：目的为了探讨HPV、p16与宫颈病变的关系。方法选择各级别宫颈病变患者130例,采用核酸分子快速导流杂交基因芯片分型技术（HybriMax）及免疫组织化学染色对所有患者分别进行宫颈脱落细胞标本HPV分型检测及病理活检或手术标本p16蛋白染色,分析HPV感染、p16蛋白表达与各级别宫颈病变的关系。结果①130例宫颈病变中检出15种常见的HPV亚型（检出率为71.4%）,从高到低前5种依次为HPV16（56.15%）、HPV33（10.00%）、HPV18（6.92%）、HPV58（5.38%）、HPV31（3.85%）。②高危-HPV阳性率在浸润癌、CIN各组明显高于宫颈炎组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。③p16在CINⅡ/Ⅲ和宫颈浸润癌各组中为过表达（中、强阳性表达）,在CINⅠ和正常组为阴性或弱阳性表达,阳性表达率在CINⅡ/Ⅲ和浸润癌组明显高于CINⅠ和宫颈炎组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。④HPV-16感染与p16表达呈密切相关r=0.998,P〈0.01。结论宫颈病变与HPV感染密切相关,HPV16与宫颈癌关系最密切;p16免疫染色可以区分低、高度CIN。

简介：【摘要】目的：探讨肌动蛋白丝束小梁（Girdin）蛋白表达水平与胃癌病理特征、预后的关系。方法：选取本院收治的103例胃癌患者，采用免疫组织化学法检测癌组织中的Girdin蛋白表达水平，分析Girdin蛋白表达与胃癌病理特征、预后的关系。结果：Girdin蛋白表达与Lauren分型、TNM分期、淋巴结转移、预后关联密切(P＜0.05)，与性别、年龄、肿瘤大小无关(P＞0.05)。结论：Girdin蛋白表达水平检测能够辅助医师了解肿瘤生物学行为，其表达水平与胃癌发展、预后关联密切。

简介：目的阿尔茨海默病（AD）的主要病理机制是β-淀粉样蛋白（Aβ）的聚集,本实验利用大鼠皮层神经元研究钙调磷酸酶抑制剂他克莫司（FK506）对Aβ产生的影响及可能的机制。方法体外培养大鼠皮层神经元,过表达突变型APP基因,将细胞分为4组,分别为对照组,FK506低剂量、中剂量及高剂量组。MTT法检测细胞活力;ELISA检测细胞分泌Aβ40及Aβ42水平;Westernblot及实时荧光定量PCR检测β-分泌酶（BACE1）和synaptophysin的蛋白及基因表达。结果与模型组比较,FK506显著降低Aβ40及Aβ42水平、下调BACE1的表达并上调synaptophysin的表达。结论FK506可减少大鼠皮层神经元分泌Aβ,阻止突触的丢失,其作用机制可能与抑制BACE1表达有关。

简介：目的通过上皮型钙黏蛋白（E-cad）在人非小细胞肺癌组织中表达的检测，探讨其与肺癌临床病理和预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测62例非小细胞肺癌组织中E—cad的表达，并取10例炎性假瘤患者作为对照。结果62例非小细胞肺癌组织中E．cad阳性表达率为56．45％（35／62），其阳性表达率与患者的性别、年龄、组织学类型及肿瘤大小差异无统计学意义，随着肺癌分化程度降低而呈下降趋势。E—cad在是否有肺癌淋巴结转移及不同TNM分期间差异均有统计学意义。结论E—cad表达下调在肿瘤侵袭转移中起重要作用，这个因子可成为潜在的判定因素。检测E-cad的表达对非小细胞肺癌患者临床病情评估、预后判断及治疗方法选择具有一定指导意义。

简介：目的探讨鼻咽癌组织中P16蛋白的表达及其意义。方法应用免疫组化S—P法检测P16蛋白在60例鼻咽癌和30例鼻咽慢性炎症组织中的表达。结果60例鼻咽癌中P16蛋白表达阳性率为20％，30例鼻咽慢性炎症黏膜P16蛋白阳性率为100％。角化性鳞癌P16蛋白阳性率明显高于分化型非角化性癌和未分化癌(P<0．01)。淋巴结转移组中P16表达率明显低于无转移组(P<0．01)。结论P16蛋白的缺失可能涉及鼻咽癌的发生发展过程，且与鼻咽癌的细胞分化、转移有关。

简介：摘要：本研究主要探讨了温度对重组大肠杆菌生长及外源蛋白表达的影响。在适宜的温度范围内，大肠杆菌的生长速率会随着温度的升高而加快。过高的温度会导致细菌生长受到抑制，同时也会影响外源蛋白的表达。此外，低温可以改善外源蛋白的稳定性和可溶性。本研究旨在为重组大肠杆菌的优化培养提供理论参考，以期提高外源蛋白的表达水平。

简介：目的评价C反应蛋白、糖化血红蛋白在2型糖尿病视网膜病变中的表达及意义。方法96例2型糖尿病患者,按视网膜病变程度分为A组[35例,无视网膜病变的糖尿病（NDR）患者]、B组[31例,非增生性的糖尿病视网膜病变（NPDR）患者]、C组[30例,增生性的糖尿病视网膜病变（PDR）患者];40例健康体检者作为对照组。检测各组C反应蛋白以及糖化血红蛋白的含量,分析各组差异。结果A、B、C组C反应蛋白[（6.86±1.97）、（7.15±2.01）、（9.02±1.74）mg/L]及糖化血红蛋白[（7.35±2.09）%、（8.58±2.42）%、（9.67±2.17）%]的含量均高于对照组（4.31±1.59）mg/L、（4.98±1.01）%（P〈0.05）,且A、B、C组C反应蛋白及糖化血红蛋白的含量依次升高（P〈0.05）;通过线性分析,2型糖尿病患者C反应蛋白与糖化血红蛋白呈正相关（P〈0.05）,C反应蛋白、糖化血红蛋白含量与视网膜病变程度呈正相关（P〈0.05）。结论C反应蛋白、糖化血红蛋白含量的变化可预示糖尿病患者发生视网膜病变,在预防和治疗2型糖尿病视网膜病变时可以从C反应蛋白及糖化血红蛋白入手。

简介：目的研究普伐他汀对激素性坏死股骨头内骨形成蛋白-2（BMP-2）表达的影响。方法54只新西兰白兔随机分为正常组、模型组和普伐他汀治疗组，每组18只。模型组和普伐他汀治疗组应用大肠杆菌内毒素及甲泼尼龙琥珀酸钠造成股骨头坏死模型，普伐他汀治疗组于造模后4周开始普伐他汀灌胃，正常组和模型组灌服等容量蒸馏水。分别于喂药后第4、8、12周分批处死动物，实时荧光定量RT-PCR检测股骨头内BMP-2mRNA的表达。结果模型组和普伐他汀治疗组各时相点BMP-2的mRNA表达水平均低于正常组，但普伐他汀治疗组喂药后第4、8、12周的表达量明显高于模型组，差异具有显著性（P〈0．01）。结论普伐他汀可诱导激素性坏死股骨头内源性BMP-2mRNA的表达。

简介：目的探讨了内质网氧化物蛋白（ERO1L）在胃癌组织中的表达变化以及与患者预后的关系。方法选取2009年6月—2011年6月接受胃癌根治术的128例患者的胃癌组织作为研究对象,并选择相同患者的癌旁无病变组织作为对照。采用实施荧光定量PCR、Westernblot和免疫组织化学分析肿瘤组织和癌旁组织ERO1LmRNA和蛋白质表达水平。并分析ERO1L蛋白的表达水平与胃癌患者预后的关系。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中ERO1LmRNA和蛋白质水平明显增加（P〈0.05）。ERO1L蛋白主要表达于细胞质中,经评定其中102例ERO1L表达呈阳性,26例表达呈阴性。ERO1L阳性组患者术后1、3和5年的累积生存率明显低于阴性组（P〈0.05）。结论ERO1L在胃癌组织中呈高表达状态,并与患者预后密切相关。

简介：目的探讨血清胰蛋白酶原-2在大肠肿瘤中的表达及意义。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对2011年9月—2012年12月收治的经内镜及病理证实的大肠癌39例、大肠腺瘤35例及同期健康体检者35例（对照组）的血清胰蛋白酶原-2的水平进行检测。结果血清胰蛋白酶原-2水平大肠癌组和大肠腺瘤组均高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。绘制出胰蛋白酶原-2含量ROC曲线,以1.25μg/L为最佳截断值,敏感性和特异度分别为54.00%和83.00%,ROC曲线下面积为0.72。结论血清胰蛋白酶原-2在大肠癌及大肠腺瘤中表达明显高于正常人群,对大肠肿瘤性病变有一定的提示意义,可作为大肠肿瘤性病变早期筛查的潜在标志物。

简介：目的探讨Nod1受体激活对腹膜间皮细胞自噬的影响。方法Nod1受体激动剂iE-DAP作用大鼠原代培养腹膜间皮细胞0、1、2h,Westernblot检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1的表达。结果随刺激时间延长,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达比值增加,Beclin-1蛋白表达亦增加。结论Nod1受体激活可诱导腹膜间皮细胞自噬的发生,这有可能发挥清除细胞内细菌感染的作用。

简介：摘要目的就神经纤毛蛋白1、2在大肠癌组织中的表达与意义进行探讨。方法采用免疫组化定性检测60例大肠癌患者的癌组织、癌旁组织、正常组织中的NRP-1、2的表达情况，计数PCR值。结果NRP-1、NRP-2在大肠癌组织、癌旁组织、正常组织中的表达阳性率分别为71.7%、28.3%、0以及83.3%、16.7%、0，各组之间对比差异较为明显，具有统计学意义（P<0.05）。PCR在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中的计数分别为（35.67±5.27）、（14.28±3.35）、（6.85±1.6），各种间对比，差异较为明显，具有统计学意义（P<0.05）。结论NRP-1、2在大肠癌的血管新生中起重要作用，并且与大肠癌侵袭和转移关系密切，在治疗大肠癌患者时可以结合这点进行治疗。

简介：目的构建人卵细胞ZP3蛋白的原核重组载体并进行表达和鉴定。方法提取人卵巢中总RNA，逆转录合成cDNA，自行设计引物，PCR扩增ZP3蛋白编码序列，PCR产物经BamHI／NheⅠ双酶切后，克隆至表达载体pET—His中，在E．coliBL21-DE3中诱导ZP3融合蛋白的表达。结果在异丙基-β-硫代半乳糖苷（IPTG）的诱导下，重组菌高效表达出一个相对分子质量约为50000的产物。结论人卵细胞ZP3蛋白的全长编码序列已被克隆ZP3蛋白融合表达载体pET—His，并在E．coliBL21-DE3中获得高表达。

简介：摘要：重组蛋白表达系统是生物制药领域中的重要工具，用于大规模生产具有特定功能的蛋白质。通过基因工程技术将目标基因导入到适当的宿主细胞中，利用宿主细胞的生物合成机制来表达和产生目标蛋白质。重组蛋白表达系统的构建和优化对于提高蛋白质产量、纯度和活性至关重要。本文将介绍重组蛋白表达系统的构建和优化在生物制药中的应用。

简介：目的：探讨成釉细胞瘤中基质金属蛋白酶12（MMP-12）和细胞角蛋白7（CK-7）的表达及其临床病理学意义。方法：收集39例成釉细胞瘤患者的手术标本,均经组织病理证实,设为观察组;同时,收集40例正常口腔黏膜组织作为对照组。利用标本制作石蜡切片,实施苏木精-伊红染色,并利用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法测定MMP12和CK7的表达。结果：MMP-12在对照组中无阳性表达（阳性表达率为0）,在观察组中呈现出一定的阳性表达[阳性表达率为74.36%（29/39）],2组的差异有统计学意义（P〈0.05）;CK-7在对照组中的阳性表达率为2.50%（1/40）,显著低于观察组的61.54%（24/39）,差异有统计学意义（P〈0.05）。对不同病理情况下的MMP-12与CK-7表达情况进行统计,结果显示,随着肿瘤的复发与恶变,MMP-12与CK-7的阳性表达水平相应地不断升高,病理程度越高,相应的,MMP-12与CK-7的阳性表达率也越高,且组间两两比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：成釉细胞瘤中MMP-12和CK7会呈现出明显的阳性表达,且与临床病理情况之间存在密切的联系,随着肿瘤的复发与恶变,MMP-12与CK-7的阳性表达水平也不断升高。

简介：目的用单克隆抗体检测类风湿关节炎(RA)和强直性脊柱炎(AS)患者滑液和血浆中基质金属蛋白酶-8(MMP-8)的表达.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定正常人、RA和AS滑液和血浆中MMP-8的表达.结果①正常人、RA和AS血浆中MMP-8的浓度均为1～23μg/L;②正常人和AS滑液中MMP-8的浓度为10～20μg/L;③RA滑液中MMP-8的浓度为90～2800μg/L.结论①RA患者与正常人和AS患者血浆中MMP-8的浓度差异无显著性.②MMP-8在关节滑液的浓度,RA患者远高于正常人和AS患者.

简介：目的：检测乳腺癌前哨淋巴结中人乳球蛋白的表达情况，了解人乳球蛋白的表达对预测乳腺癌前哨淋巴结微转移的临床价值。方法采用免疫组化法检测驻马店市中心医院2011年7月～2012年9月共60例乳腺癌患者SLN中人乳球蛋白的表达情况，同时与常规病理检查比较，并比较转移组、无转移组患者的临床资料。结果183枚SLN常规病理检查阴性101枚，其中17枚人乳球蛋白表达阳性，常规病理检查与免疫组化相比，检出率差异有统计学意义（P〈0.05）。结论人乳球蛋白可作为标志物来检测乳腺癌SLN中微转移情况。免疫组化方法检测人乳球蛋白在SLN中的表达可明显降低乳腺癌SLN的假阴性率。

简介：目的:构建含目的基因葛佬素(gloverin)的重组子并通过体外快速翻译系统RTS500(rapidtranslationsystem)对其进行表达.方法:采用PCR方法扩增葛佬素cDNA,将其与表达载体pIVEX2.3连接;采用PCR及双酶切方法鉴定连接产物.将含目的基因片段的阳性重组质粒通过体外表达翻译系统RTS500,使其蛋白能在大肠杆菌(E.coli)裂解产物中进行表达.应用蛋白免疫印迹方法对表达产物进行鉴定.结果:pIVEX2.3-G重组表达质粒通过体外表达翻译系统RTS500可表达出分子量约为14.4的蛋白;蛋白免疫印迹证实该蛋白为带有多聚组氨酸标签的融合蛋白.结论:抗菌肽葛佬素可在体外大肠杆菌裂解产物中进行表达.

简介：目的探讨变应性鼻炎（AR）大鼠鼻黏膜Bcl-2蛋白的表达与细胞凋亡之间的关系。进一步了解变应性鼻炎的发病机制。方法选健康SD大鼠20只，雌雄不限，随机分为实验组和对照组。各10只。实验组以卵清蛋白腹腔注射致敏，继之鼻局部激发建立变应性鼻炎大鼠模型。取实验组与对照组动物鼻呼吸区黏膜．行Bcl-2蛋白免疫组织化学染色，以细胞凋亡末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测鼻黏膜细胞凋亡状况，以图像分析软件分析结果。结果变应性鼻炎大鼠鼻黏膜Bcl-2蛋白主要表达于细胞胞质中，包括鼻黏膜腺体细胞、上皮细胞，固有层中的淋巴细胞，鼻分泌物中可见大量呈强阳性反应的嗜酸性粒细胞。实验组Bcl-2蛋白表达水平显著高于对照组。凋亡细胞散在于鼻黏膜上皮层和固有层。实验组更多见于上皮层．实验组凋亡指数与对照组相比下调。结论变应性鼻炎大鼠鼻黏膜细胞凋亡过程受抑可能是变应性鼻炎鼻分泌物增多及上皮破坏的机制之一。