简介:目的利用错配杂交和化学发光技术,建立一种检测MGMT基因启动子区过甲基化的定量分析方法.方法基因组DNA经过亚硫酸氢钠修饰,所有未甲基化的胞嘧啶都被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不发生变化.设计特异的PCR引物(不合CpG位点),同时扩增含有CpG位点甲基化或非甲基化目的MGMT基因启动子区,用两条分别与甲基化及非甲基化CpG位点互补的寡核苷酸探针与扩增产物杂交,化学发光检测,通过两条探针的杂交信号强度之比确定样品DNA中MGMT甲基化的程度.结果检测混合样品中MGMT基因的甲基化水平与结果完全相符,并可用于肿瘤组织样品的MGMT甲基化定量检测.结论与现有方法相比,本法是一种检测快速、操作简便的MGMT基因甲基化的定量检测方法.
简介:三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)俗称砒霜,始载于宋《开宝本草》,其味苦酸,有毒,归脾、肺、肝经,具有蚀疮、去腐、杀虫、劫痰定喘、劫疟之功。砷是一种广泛存在于人类生活环境中的致癌物质,与包括皮肤癌、肺癌和膀胱癌在内的多种恶性肿瘤相关。近年来,As2O3被成功应用于治疗急性早幼粒细胞性白血病(acutepromyelocyticleukemia,APL)。此外,砷可以诱导多种恶性肿瘤细胞凋亡。单甲基亚砷酸(MMAIII)是As2O3甲基化的活性代谢产物,大量研究表明MMAIII具有比As_2O_3更强的生物学活性。