简介：摘要目的探讨微RNA（microRNA，miRNA）-223在乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）X蛋白（HBV X protein，HBx）诱导的HBV相关性肾炎（HBV-associated glomerulonephritis，HBV-GN）足细胞焦亡中的潜在功能及相关机制。方法采用人肾足细胞中过表达HBx基因来模拟HBV-GN的发病机制。实时荧光定量PCR和Western印迹分别检测焦亡相关蛋白［核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）、胱天蛋白酶1（Caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC）］及炎性因子［白细胞介素1β、白细胞介素18］mRNA和蛋白的表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-223的下游靶标；TUNEL染色和流式细胞术检测细胞焦亡情况；免疫荧光检测足细胞损伤标志物Desmin和Nephrin的表达；Hoechst 33342染色观察足细胞细胞核的形态和数量变化；酶联免疫吸附测定检测Caspase-1活性。将足细胞分为以下9组：对照组（不予特殊处理）、空质粒组（转染空质粒）、HBx过表达组（转染HBx过表达慢病毒）、HBx过表达+miRNA-223 mimic组（共转染HBx过表达慢病毒和miRNA-223模拟物）、HBx过表达+miRNA-223 inhibitor组（共转染HBx过表达慢病毒和miRNA-223抑制剂）、HBx过表达+miRNA-223 mimic+NLRP3组（共转染HBx过表达慢病毒、miRNA-223模拟物和NLRP3过表达质粒）、HBx过表达+miRNA-223 mimic+NLRP3 siRNA组（共转染HBx过表达慢病毒、miRNA-223模拟物和NLRP3 siRNA）、HBx过表达+miRNA-223 inhibitor+NLRP3组（共转染HBx过表达慢病毒、miRNA-223抑制剂和NLRP3过表达质粒）、HBx过表达+miRNA-223 inhibitor+NLRP3 siRNA组（共转染HBx过表达慢病毒、miRNA-223抑制剂和NLRP3 siRNA）。结果与对照组相比，HBx过表达组miRNA-223表达较低（P < 0.05）。TUNEL染色和免疫荧光结果显示，敲低NLRP3减弱HBx过表达引起的足细胞损伤和焦亡（P < 0.05）。双荧光素酶报告基因实验证明NLRP3是miRNA-223的下游靶点之一。功能回复实验证明，NLRP3过表达削弱了miRNA-223对足细胞损伤的保护作用（P < 0.05）。miRNA-223 mimic和NLRP3 siRNA的共同加入使HBx过表达诱导升高的NLRP3炎症小体及炎性因子表达下降，焦亡细胞数量减少（均P < 0.05）；而同时引入miRNA-223 inhibitor和NLRP3过表达质粒则使足细胞中NLRP3炎症小体和炎性因子的表达上调，Caspase-1活性升高，焦亡细胞数量增加（均P < 0.05）。结论HBx可能通过下调miRNA-223靶向NLRP3炎症小体促进HBV-GN足细胞焦亡。miRNA-223有望成为治疗HBV-GN的潜在靶点。

简介：摘要目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白（hepatitis B virus X protein，HBx）是否通过调控活性氧（reactive oxygen species，ROS）/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）信号通路引起足细胞焦亡。方法采用小鼠肾足细胞过表达HBx基因来模拟乙型肝炎相关性肾炎的发病机制。将足细胞分为以下5组：空白对照组（不予特殊处理）、阴性对照组（转染对照慢病毒）、HBx过表达组（转染HBx过表达慢病毒）、HBx过表达+NLRP3 siRNA组（共转染HBx过表达慢病毒和NLRP3 siRNA）、HBx过表达+ROS抑制剂组（转染HBx过表达慢病毒和添加ROS抑制剂）。电镜下观察足细胞的形态学改变；二氯二氢荧光素二乙酸酯（dichlorodihydrofluorescein diacetate assay，DCFH-DA）法检测ROS的生成；Hoechst 33342染色观察足细胞细胞核的形态和数量变化；酶联免疫吸附测定试验分别检测胱天蛋白酶1（Caspase-1）酶活性、乳酸脱氢酶、白细胞介素（IL）-1β和IL-18水平；实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测细胞焦亡相关蛋白如NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、Caspase-1、IL-1β和IL-18 mRNA和蛋白水平的表达；TUNEL染色和流式细胞术检测焦亡细胞数量；免疫荧光染色检测Desmin和Nephrin的表达。结果HBx过表达慢病毒成功感染足细胞后，电镜下观察到细胞发生焦亡相关形态学改变；与阴性对照组相比，HBx过表达组ROS水平显著升高（P<0.05）；Hoechst 33342染色发现HBx过表达后细胞核浓缩；TUNEL染色和流式细胞术证明HBx过表达后足细胞发生了焦亡；焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18 mRNA和蛋白表达显著上调（均P<0.05）；Caspase-1酶活性、乳酸脱氢酶和Desmin表达水平升高（均P<0.05）。而NLRP3敲低或ROS抑制减弱了HBx过表达引起的足细胞焦亡以及相关蛋白表达增加（均P<0.05）。结论ROS/NLRP3通路在HBx过表达引起的足细胞焦亡中起着重要作用。

简介：摘要冷侧压充填技术和热牙胶连续波充填技术是临床经典的根管充填方法。单尖法根管充填技术具有操作简便省时的特点，近年来结合具有优良理化和生物学性能的生物陶瓷根管封闭剂，取得了较好的短期临床效果。但目前针对生物陶瓷封闭剂单尖充填后根管超填、根管再治疗困难，以及长期临床疗效不明确等情况尚缺乏合理的规避及解决办法。本文回顾单尖法根管充填的起源与发展，解析其优缺点和临床应用现状，并对该技术的改良及临床应用前景进行展望。

简介：摘要： 目的：分析电子支气管镜检查环节应用舒适护理所产生的价值和效果。方法：选择在2019年1月至2021年1月进入到我院展开治疗的患者进行研究，全部通过电气支气管镜方式进行检查，总计有86例患者。随机分为两组，观察组与对照组，每组有43例患者。观察组选择使用舒适护理方式，对照组选择常规护理措施。在检查完成之后，对比两组的护理效果。结果：观察组满意度较高，且不良反应率比较低，各项数据有统计差别（P＜0.05）。结论：通过舒适护理措施应用到电子支气管镜检查中，可以有效的提升检查的质量和效果，降低不良事件发生率，综合效果比较好。

简介：摘要：随着新课改的持续深入，“高效课堂”随之受到教育界人士的高度关注，且越来越多的教育工作者参与到高效课堂教学实践与研究中。但小学英语高效课堂构建现状不容乐观，一定程度上制约了小学英语教育价值的体现，同时也不利于新课改理念的践行。因此，应积极探寻基于新课改的有效教学方法，以期通过可行的教学方法来构建小学英语高效课堂，使新课改理念真正落实。

简介：摘要：在小学英语学科的翻转课堂模式之中，语篇教学内容是非常关键的，除却创设独特的语境之外，教师也需要让学生们在自主学习过程中收获到独特的学习经验和应用技能。语篇教学不仅需要涵盖阅读和理解等基本要素，也需要在翻转课堂教学模式中占有一席之地，才能逐步引申出多种英语语言的应用技能。本文主要探讨小学英语语篇教学中翻转课堂的应用策略。

简介：摘要：小学英语是小学阶段教学中的主要科目之一，其也是衔接初中英语教学，帮助学生打好语言基础、养成良好学习习惯的重要依靠。出于对小学生喜欢热闹、崇尚自由心理的考量，小学英语教学应当充分发挥英语作为语言载体的传情达意的作用，教师应当充分考虑汉英双方面的文化特征，制定以表演、表达、表现为核心的情境化课堂教学计划，为学生营造较为真实的英语母语环境，促进其英语能力的提高。本文将从主题活动、话剧表演、生活情境三个方面阐述情境化课堂教学的实际应用策略。

简介：摘要报道1例造血干细胞移植后的肝窦阻塞综合征，国内此类病例报道较少，在诊断和治疗上具有参考意义。

简介：

简介：近年来,为了更好的处理医疗纠纷问题,我国先后施行了《民法通则》、《医疗事故处理条例》、《侵权责任法》和《医疗纠纷预防和处理条例》。但是,这些法律法规之间的规定并不统一甚至相冲突,导致了医疗纠纷法律适用的'二元化'局面。本文通过对医疗纠纷法律适用的分析与思考,试图为解决医疗纠纷法律适用问题提出初步建议。