高效液相色谱及液相色谱-质谱联用技术在保健食品检测中的应用

高效液相色谱及液相色谱-质谱联用技术在保健食品检测中的应用

丁鹏1   ,赵瑞梅2, ,李双1

1青岛检验检疫技术发展有限公司    山东青岛   266000

2通标标准技术服务(青岛)有限公司  山东青岛 266101

摘要：本文介绍了HPLC及LC-MS技术在保健品分析方面的最新研究进展。主要用于检测保康食品中的多不饱和脂肪酸，类胡萝卜素，多糖，皂甙，以及黄酮等营养物质。

关键词：高效液相色谱；液相色谱-质谱联用技术；应用

前言：在保健食品行业的加工生产等环节中，必须把产品的品质和安全置于第一位，并对产品的品质进行严格的检测。随着社会的发展和人民的生活质量的提升，人们对食物的需求逐渐从温饱转向了满足健康需求，从而将目光转向了营养保健品领域。在中国，保健食品被界定为不以治病为主要用途，具有一定调理功能的食物。我国各种保健产品层出不穷，保健产品在市场上占有一席之地，强化对保健食品生产的品质监督迫在眉睫，运用HPLC、LC-MS等现代技术，可以对保健食物中的各种物质进行快速、准确的检测，从而判断其是否符合质量标准，是否能对人体产生益处。

1.食品行业中应用的检测技术

1.1高效液相色谱技术

高效液相色谱技术是用一种溶液作为流动相（单个溶液和多种溶液的配比），并将其抽吸到一个含有固定相的色谱柱中。不同成分溶解于流动相，通过固定相后，与其发生吸附、分配、离子吸引或亲和等反应，其保留的持续时间也有不同。在每一种成分从固定相中排出之后，利用测峰信号，来对待测成分进行判定。利用HPLC技术，可以对溶液中的溶质进行检测和分离，通过色谱系统的处理，根据其检测结果，对各种溶质之间的差别进行分析，从而可以准确地确定样本溶液中每个溶质的含量。在HPLC的分析过程中，载液输出的压力使得流动相快速地穿过了色谱柱，从而提升了分析效率，加速了固定相和流动相的分离。采用高灵敏、高精度的色谱仪，能完全保证测定的准度。在对有机物进行分离和检测时，通常要将HPLC技术运用到检测中，并根据检测工作的实际需求，对不同的流动相进行了灵活的选取，从而实现对溶剂的快速高效分离[1]。

1.2液相色谱-质谱联用技术

以LC-MS为主要的分析体系，将液相色谱和质谱分别作为分离系统和检测系统。在质谱分析中，将试样从流动相中分离。采用离子源，对试样进行电离处理，进行质量分析，得到质谱图谱。液质联用技术具有测定和分析广泛、测定的精确度高、测定流程自动化等优点。

2.高效液相色谱和液相色谱-质谱分析方法在保健品中的研究

2.1对类胡萝卜素的检测

类胡萝卜素包括番茄红素，叶黄素，玉米黄素等一系列的天然色素，在保健品中得到了大量的使用。在所有的类胡萝卜素中，番茄红素营养性最高，清除单线态氧的能力是维生素E的100倍，对防治疾病和治疗疾病起着关键作用。在营养保健功效上，番茄红素具有抗氧化、抑制突变、降低心血管疾病和防治肿瘤等各种功效。叶黄素和玉米黄素是天然产物，叶黄素和玉米黄素均有效防止衰老性眼底黄斑块变性的作用，并可有效预防和治疗老年患者的视觉减退等问题。利用HPLC对保健食物中的番茄红素进行分析，该方法适用于对胶囊、片状等保健食物中的番茄红素进行分析。利用HPLC对多种植物样本进行了叶黄素的含量分析和测量，发现各种植物之间叶黄素存在着很大的差别。建立一种在蔬菜食物中使用HPLC进行类胡萝卜素的测定的方法，可以通过对各种不同类型的胡萝卜素成分进行色谱、波谱等信息的采集，从而达到对植物食物中类胡萝卜素进行定性、定量的目的[2]。

2.2对活性多糖的检测

活性多糖是一种具有生物生理活性和特殊保健功能的多糖类物质，可提高T细胞的活力，提高人体对5-羟色胺的敏感性，提高补体的活力等。保健食品中常见的多糖有香菇多糖、灵芝多糖、虫草多糖、茶叶多糖、海带多糖、螺旋藻多糖等。运用TSK凝胶柱为分离柱，选取示差折光检测器，以不同分子量的标准右旋糖酐为基准，利用HPLC法测定了蘑菇多糖产品中多糖的分子量状况和含量。现在已经构建出一种简单而稳定的HPLC对一种灵芝多糖的浓度进行了测定，它使用的是一种糖类的特殊的分析柱，使用的是一种具有分子量104D的葡萄糖苷作为基准，对其进行了测量，结果是0.03g/L，其回产率在98%到104%之间。还可以利用所建立的无衍生化HPLC法，对银耳多糖中的单糖组成进行分析，为在多糖的单糖组成测定提供了一定的依据。         

2.3皂甙类化合物的检测

皂甙类化合是一种含有皂甙元和糖及糖醛酸的复合体，包括人参皂甙、大豆皂甙、绞股蓝皂甙等。在人类循环系统、血液系统、神经系统等方面都有着非常广泛的分布。采用高效液相色谱法测定保健食物草鸡精中的“黄芪甲苷”，其含量在97.2%~98.9%之间。通过反相液相色谱方法，以乙腈-0.2%磷酸水为流动相，通过渐变的洗脱方法，对三种参总苷Rg1,Re,Rb1进行了同步检测。以低乙腈含量为指标，利用非线性梯度法，以Rg1,Rb1,Re,Rb2,Rc,Rd为6种，以Rg1,Rb1,Rb1,Re,Rb2,Rc,Rd为6种，其与总皂甙的比较，其相对标准误差为0.9%-4.4%，检测的最小值为5.5ug/g，其回收率为95.56%-98.52%，适合于该法的快速检测。采用HPLC/APCI-MS联用技术对人参中29个不同种类的人参总苷（含丙二酰人参总苷）进行了分离鉴定，并可对不同种类的人参总苷进行分离鉴定及结构解析。通过大孔树脂柱色谱法从其中获得了三个组分：SS-I,SS-II,SS-1,SS-2,SS-3个组分，并通过HPLC-EMS-MS对SS-III组分进行了系统的分析。

2.4类黄酮成分分析

天然类黄酮化合物以糖苷的形态为主，少数以自由糖苷的形态出现，如：白果黄酮糖苷、大豆异黄酮、葛根异黄酮等，被广泛用于健康食品中。而在国内外，由于其在预防骨质疏松，改善女性更年期综合征，抗脂质过氧化等领域的重要功能而备受关注。将HPLC用于保健食品中的大豆异黄酮的分析，可以在不影响质量的前提下，对不同类型的大豆异黄酮苷元及糖甙进行分析。

结束语：在我国，由于我国的经济和生活水平不断提高，对饮食的重视程度也在不断提高。保健食品已经是现代食物产业中不可或缺的一环，也是未来食物产业发展的重点。HPLC及LC-MS联用技术不但可以有效地克服传统的保健品分析技术在灵敏度和特异性上的缺陷，还可以为保健品中的复杂生产分提供大量可靠、准确的数据，简化试验步骤，节约分析时间，具有灵敏度高、操作简单、可实现高通量样本分析等优势。可以看出，HPLC和LC-MS的联合技术可以作为一种突破保健品的检验技术的技术手段，在今后保健品的检验中有着更加广泛的应用。

参考文献：

[1]谢瑶,石萌萌,庞欣.高效液相色谱及液相色谱-质谱联用技术在保健食品检测中的应用[J].化学通报,2010,73(08):684-688.

[2]曾宸,蔡文静,叶甜甜,冯钰锜.稳定同位素标记结合超高效液相色谱-质谱技术分析镉胁迫下水稻中的羧基化合物[J].分析科学学报,2022,38(05):529-537.