腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值分析

腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值分析

李彦

四川省地矿局四 0 五医院 四川成都 611830

【摘要】目的：探讨腹泻粪便进行小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值。方法：2020.8-2021.12，选取在本院就诊的160例腹泻患者为对象，经患者同意后，采集患者的腹泻粪便（2份），样本1采用传统培养方法检验，样本2采用 RT-PCR 方法检验，比较检出结果。结果：样本2的阳性检出率92.50％大于样本1 的76.88％，比值显示有差异（P＜0.05）。结论：对腹泻患者提供的粪便样本进行小肠结肠炎耶尔森菌检验时采用RT-PCR 方法，检验准确性高，可辅助临床早期为患者提供对症治疗。

关键词：腹泻；粪便样本；小肠结肠炎耶尔森菌；RT-PCR 方法；传统培养方法

小肠结肠炎耶尔森菌属于肠道致病菌，可诱发肠道传染性疾病，全球范围内均有发生^[1]。发病后患者会有严重腹泻症状与胃肠炎症状发生，部分患者同时还会伴有胃肠道疾病、呼吸道疾病以及骨骼疾病，诱发败血症这一严重并发症的概率较高，需早期确诊治疗^[2]。临床调查^[3]表明，该病致病菌可能与爬行动物及家禽等传播存在相关性。多数患者的症状表现和阑尾炎十分相似，部分患者误诊阑尾炎后进行手术治疗，术中发现误诊。为提升患者的治疗效果，避免不必要手术治疗，需积极采用有效方法确诊小肠结肠炎耶尔森菌。本文主要介绍两种方法的小肠结肠炎耶尔森菌检验结果，报道如下。

1·资料与方法

1.1临床资料

2020.8（起始时间）-2021.12（终止时间），选取在本院就诊的160例腹泻患者为对象。男性有89例，女性有71例；最小年龄20岁，最大年龄57岁，平均年龄（38.71±6.20）岁。纳入标准：（1）患者均经临床确诊腹泻，均因小肠结肠炎耶尔森菌导致腹泻；（2）患者了解粪便检验的必要性及重要性，主动配合临床采集新鲜腹泻粪便进行检验；（3）患者可进行正常沟通交流，且对研究知情。排除标准：（1）因个人情绪导致的检验不依从及检验不配合患者；（2）因其他原因或致病菌导致的腹泻患者；（3）患有精神疾病或是痴呆症患者。

1.2方法

确定患者发生腹泻，且需要进行粪便样本进行实验室检查后。主动向患者阐述检验内容、流程及样本准备，明确告知患者如何采集样本，要求患者同时采集两份腹泻粪便样本。成功采集样本后，将其放在干燥清洁无吸水性容器中，避免水、尿、粪便混合。

样本1采用传统培养方法检验，将0.5g新鲜样本置入 Carry-Blair 保存液中，提供生理盐水45ml充分稀释。将稀释后样本放入培养箱进行持续18h培养，培养温度控制在16℃。完成培养后将其接种到 CIN-1琼脂平板平板，在温度25℃环境下继续培养，培养时间设置为24h，培养完成后筛选疑似菌落，完成初次筛选后进行细菌生化鉴定，并应用标准实施阳性对照。阳性判定标准如下，和标准菌株有相同生化反应。

样本2采用 RT-PCR 方法检验，取0.5g新鲜样本，放在温度16℃环境下培养，培养时间设置为18h。获取200μg样本进行DNA提取，提取环境温度是90℃，之后实施扩增处理，扩增长度是 154bp。阳性判定标准如下，获取扩增样品后会有同预期大小相似的条带出现。

1.3观察指标

样本1及样本2的检验结果。

1.4统计学方法

统计软件是SPSS 22.0。

2·结果

样本1检出阳性123例，样本2检出阳性148例，样本2的阳性检出率大于样本1，比值显示有差异（P＜0.05）。见表一。

表1 两组样本的检出结果（n=160例，n/％）

3·讨论

临床调查^[4]表明，小肠结肠炎耶尔森菌属于重要致病菌，感染后可诱发肠道外及胃肠内感染。患者感染后的症状较多，若不能早期鉴定识别，有很高概率诱发严重并发症，危害患者身心健康。现今临床已经认识到该致病菌的危害性，会为疑似感染患者提供实验室检验，达到确诊感染原因、辅助临床针对性治疗等目的。既往临床多应用传统培养方法检验，检验方法相对便捷简单，操作便利性较强，可有效降低肉眼诊断的难度及主观性，可提升致病菌确诊率。但这种检验方法容易被外部环境影响，所以依然有一部分患者误诊或漏诊。RT-PCR 方法是现今比较推崇的新型检验方法，检验操作流程十分简单便捷，所以检出阳性率比较大

^[5]。从应用可发现，该检验耗费时间是2d，反应后无需进行电泳，可减少检验导致的环境污染现象，环境效益比较好。再者，该检验方法的检验准确性较好，多数患者均可确诊，可辅助临床及时诊断治疗患者、评估患者病情严重程度，进一步提升治疗针对性与有效性。从致病菌角度分析，该致病菌采集后必须进行有机培养，但致病菌生长速度缓慢，需严格调控培养温度才能保证致病菌顺利生长。从致病菌培养温度看，RT-PCR 方法更具应用价值，可加速致病菌生长，适当缩短检验时间，还可保证检验结果准确性。经RT-PCR 方法检验，还可对致病菌进行定量分析，进一步提升诊断准确性，保证后续治疗的科学性与针对性。

综上可知，腹泻粪便应用RT-PCR 方法进行小肠结肠炎耶尔森菌，检验准确性好，值得推广。

参考文献:

[1] 满玉霞,臧慧平,庞瑞昌. 小肠结肠炎腹泻不同检验方法对粪便中耶尔森菌检查结果比较[J]. 临床检验杂志（电子版）,2019,8(3):14-16.

[2] 李晓蕾,张连涛,梁贤栋,等. RT-PCR法检验腹泻患者小肠结肠炎耶尔森菌的应用效果[J]. 深圳中西医结合杂志,2019,29(17):55-56.

[3] 袁媛,孙永,常宏伟,等. 安徽省2018-2019年小肠结肠炎耶尔森菌分型分布及分子特征分析[J]. 中国媒介生物学及控制杂志,2021,32(3):298-301.

[4] 刘伟,白婧,韩喜荣,等. 2015年-2019年北京市海淀区1810例感染性腹泻病原菌检测结果分析[J]. 中国卫生检验杂志,2021,31(17):2129-2132.

[5] 牟文婷,杨毅,王启果. 2018年乌鲁木齐市细菌性腹泻病监测结果分析[J]. 世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊）,2019,19(46):49-51.