复方氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含量测定

复方氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含量测定

吴梦

河北长天药业有限公司 河北省保定市 071000

摘要：

目的建立复方氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含量的高效液相色谱法^{[1] [2] [3]}的检测方法，方法方法色谱柱采用Aglea Venusll MP C18（4.6*150mm，5μm），流速1.0ml/min，流动相为甲醇：水（40:60），柱温30℃，检测波长为216nm，进样量为20μl，结果对乙酰氨基酚在300~700μg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.9998），平均回收率为99.8%，RSD为0.16%（n=9），溶液稳定性、精密度、耐用性试验含量的RSD均小于2.0%。结论用高效液相色谱法简便准确，专属性强，重复性好，适用于小儿氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚含量的检测。

关键词：复方氨酚黄那敏颗粒，对乙酰氨基酚，含量，高效液相色谱法

一、试验方法

色谱柱：十八烷基键合硅胶为填充剂（C18,150*4.6mm，5μm）；溶剂：10%乙醇

流动相：甲醇-水（40:60）；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；波长：216nm；进样量：20μl；

含量对照品溶液（0.5mg/ml）：取对照品约25mg，精密称定，置50ml量瓶，用乙醇溶解（乙醇量控制在最后溶液约含10%乙醇）并用水稀释至刻线，摇匀即得。

供试品溶液：取装量差异项下的内容物，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚0.125g）置具塞锥形瓶中，精密加乙醇25ml振摇使溶解，用干燥滤纸过滤，精密量取续滤液5ml，置50容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

空辅：取空白辅料1.875g置具塞锥形瓶中，精密加乙醇25ml振摇使溶解，用干燥滤纸过滤，精密量取续滤液5ml，置50容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。

二、结果

2.1专属性

溶液配制：按照上述溶液配制步骤配制溶剂，空辅及对照品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行含量测定。结果表明溶剂及空辅均不干扰对乙酰氨基酚检测。

2.2进样精密度

溶液配制：按照上述溶液配制步骤配制对照品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。结果表明同一溶液连续6次进样，峰面积RSD为0.10%小于1.0%，表明仪器进样精密度良好。

2.3滤膜吸附性

溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置对照品与供试品溶液，分别采取未过滤，经0.22μm滤膜过滤，弃去初滤液0.5ml、1ml及2ml，去续滤液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。结果表明弃去0.5ml、1ml及2ml均不干扰样品检测，因此，本品含量供试品溶液采用0.22μm滤膜过滤弃去1ml。

4.4溶液稳定性

溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置对照品与供试品溶液，分别在室温下0h，4h，8h，12h，24h，48h进样，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。结果表明对照品溶液、供试品溶液室温下48h内相对于0h的峰面积变化值均小于2.0%，对照品溶液、供试品溶液室温下48h内稳定性良好。

4.5线性

线性贮备液：取对照品约100mg，精密称定，置100ml量瓶中，用乙醇溶解并用水稀释至刻线，摇匀即得，作为线性贮备液。分别精密量取线性贮备液3.0ml、4.0ml、5.0ml、5.5ml、6ml、7ml分别置10ml量瓶中，用水稀释至刻线，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。以对乙酰氨基酚峰面积为纵坐标，以乙酰氨基酚浓度为横坐标，绘制标准曲线，结果表明对乙酰氨基酚浓度在300~700μg/ml范围内，线性方程为y=0.5438x-2.899，R为0.9998（n=6），线性关系良好。

4.6准确度

溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置空辅及对照品溶液。

回收率溶液：取空白辅料1.875g置具塞锥形瓶中，分别精密称取对乙酰氨基酚对照品100mg、125mg、150mg，精密加乙醇25ml振摇使溶解，用干燥滤纸过滤，精密量取续滤液5ml，置50容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。回收率80%、100%、120%溶液各平行配制3份。精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。结果表明对乙酰氨基酚平均回收率（n=9）为99.8%，RSD为0.16%。

4.7精密度

溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置空辅、对照品、供试品溶液平行配置6份。精密量取20μl，注入液相色谱仪，进行测定。结果表明对乙酰氨基酚含量的RSD为0.45%（n=6），精密称取同一批号样品6份，在另外一台高效液相色谱仪上检测，对乙酰氨基酚含量的RSD为0.63%（n=12），说明精密度良好。

4.8耐用性

溶液配制：按照上述溶液配制步骤配置空辅、对照品、供试品溶液。分别在流速±0.2ml/min，柱温±5℃，波长±2nm，有机相比例变化±2%，相同品牌不同批号色谱柱，不用品牌色谱柱，各色谱条件下，分别精密量取上述溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明个条件下，空白溶剂及空辅溶液均不干扰样品检测，对乙酰氨基酚含量与原条件的RD均小于2%，符合可接受标准，方法的耐用性良好。

[参考文献]

[1] 化学药品地方标准上升国家标准第三册，标准编号WS-10001-(HD-0256)-2002。

[2]2020版《中国药典》第四部通则0512高效液相色谱法。

[3]2020版《中国药典》第四部指导原则9101分析方法验证指导原则。