隔离器在无菌检验中的应用分析

隔离器在无菌检验中的应用分析

翁云娇

海南新合赛制药有限公司， 海南 海口 570311

摘要：无菌检查是无菌药品质量控制的关键项目，对检测环境和检测人员操作都有相当高的要求。由于供试品在无菌生产过程中被污染为小概率性事件，因此供试品的无菌检查对检测环境的洁净级别提出了相当严格的要求。为避免人员带来的污染，许多单位都选择无菌隔离器来规避污染风险。本文对隔离器在无菌检验中的应用进行了阐述。

关键词：隔离器；无菌检验；应用

1 导言

在即将颁布的中国药典2015年版中，首次提到了无菌检查隔离器。本文结合了国内的技术条件，详述了无菌检查隔离器的相关验证要求。在这样的法规背景下，无菌检查隔离器越来越受到制药企业的关注，而无菌检查隔离器在可控、先进、低能耗的QC无菌检查实验室中的应用也将成为趋势。

2 隔离器的类别和使用范围

隔离器系统（Isolator system）是无菌制药领域的关键设备。隔离器系统最早从二十世纪八十年代开始使用以来，逐渐完善和发展。在近十年中，获得长足技术进步。在2002年5月，USP微生物方面的开放会议中，仅有两项无菌技术被冠予“高级的（advanced）”名号来进行讨论：隔离器技术（Isolator technology）和吹-填-封技术（Blow-fll-sealtechnology）。由此可见，隔离器技术在无菌制药领域的地位。

目前，在无菌制药领域中，主要有如下几种隔离器在使用，分别是无菌取样隔离器、无菌分装隔离器，无菌检验隔离器等。

3 隔离系统的结构

3.1 屏护装置

屏护装置一般采用柔韧性塑胶薄膜或刚性材质，柔韧性塑胶薄膜材质的屏护装置主要用于无菌检测隔离系统，以透明聚氯乙烯（PVC）居多。刚性屏护装置主要用于无菌生产过程，主要材质有聚碳酸酯（PC）、丙烯酸树脂/亚克力、钢化玻璃或不锈钢。

3.2 传递/转移技术

常见的传递/转移技术主要有简易门、鼠洞、闸室—舱口—传递箱、装袋口、快速传输端口（RTP）以及服务系统，隔离器通常所需的服务有电源、水、气、真空、压缩空气、灭菌排水等。

3.3 空气调节系统

隔离器内部气流模式分为紊流和单向流。紊流多用于常规隔离器无菌测试，而单向流分为垂直单向流和水平单向流，多用于无菌生产中，粉尘量较大或气雾类药品时须对空气进行过滤处理后再次进入回路系统，而过滤单元是维持隔离器内部无菌状态的保证，在隔离器的空气进出口均安装有HEPA（高效过滤器）或ULPA（超高效空气过滤器）级别过滤器。空气入口过滤器为隔离器提供无菌空气以净化隔离器内部容器，出口的排气过滤器会阻止返回隔离器内部容器的任何物质，而且通过进排气系统的连续运行，保证隔离器内保持设定的压力。

3.4 灭菌/去污系统

最早的隔离系统采用灭菌剂擦拭、喷雾或熏蒸等方式以达到灭菌效果，随着灭菌技术的不断发展，现代隔离器采用低温气体自动化灭菌技术进行灭菌，所用的灭菌剂有汽化过氧化氢（VHP）、过氧乙酸（PAA）、臭氧（Ozone）、二氧化氯（CD）等。灭菌时一般采用自动气体发生器产生一定浓度的灭菌剂气体充满隔离器，同时隔离器内部使用风机来实现灭菌剂的均匀分布，以确保隔离器内所有暴露的表面能够接触到灭菌剂气体，当达到灭菌剂作用时间后，使用通过除菌装置新鲜空气或其他方式处理过的空气将灭菌剂排走。

3.5 隔离器安装位置的选择

用于无菌检验的隔离器不需要安装在洁净区，但是安装在一个限制非授权人员进入的区域仍然是重要的。安装时，应当使隔离器周围有足够的空间，以便于移动隔离器，传递物料，以及通常的维护。

隔离器房间温度和湿度对于操作者的安全和舒适是重要的，温湿度对于除菌和净化技术的影响效果也很关键。如果隔离器位于空气补给口的气流通道中，当隔离器采用蒸汽灭菌时，空气气流会使隔离器个别部位温度较低形成冷凝水。当采用对温度敏感的灭菌方法时，隔离器所处房间的温度应当是均一的。

4 隔离器在无菌检验中的应用

4.1 隔离系统中的操作方式

因隔离系统内部与外部完全隔离，隔离系统内部物体是在无菌条件下进行传递的，因此无菌隔离系统中一般配备保护手套和袖套，其主要作用是便于操作人员在不接触产品的情况下完成某些操作，避免人为造成的污染。手套一般与袖套在腕部连接，通常采用高张力强度适中的胶乳橡胶、丁基橡胶或海帕伦等材质，不同的操作人员用不同尺寸的手套，不同的工艺用不同材质的手套，手套更换方便，无需拆封即可实现更换。通过手套与袖套，操作者一般可以在500 mm的范围内提起约5 kg的物体，而当有些隔离系统空间较大，操作者通过手套与袖套无法实现操作时，可以穿半身衣进行操作。操作者在穿半身衣的情况下可以在1 200 mm的范围内提起15 kg的物体。隔离系统的整个操作过程中，操作者无需穿戴特殊的洁净服进行操作，只需穿着标准的实验室服装或工作服即可。因此，隔离系统避免了人与物料的直接接触，避免了设备或药品被污染。

4.2 隔离器内部无菌环境的维持

在一个无菌周期内，隔离器系统保持内部环境无菌的能力必须被验证。隔离器系统出现故障或者隔离器内部的偶然污染情况下的微生物必须被检测。微生物检测通常包括一个例行的取样程序，它可以包括这样的时间点，例如：灭菌后的第一天和无菌保持期的最后一天。验证方法：就是放置在隔离器中的培养基被证明是无菌的。

隔离器内部可以使用接触碟监控规则表面，或者使用棉签擦拭监控不规则表面。然而，因为培养基残留会使隔离器产生染菌的风险，因此，这些检测最好在检测周期快结束时进行。如果环境监控和检测同时进行，而且有培养基残留，要细心地从隔离器内部清理干净。空气取样和沉降菌检测可以使用，但它们在检测隔离器内部非常低水平的污染时不是很灵敏。

最可能污染的途径是检验用具和样品进入隔离器的过程。验证所有进入隔离器内部的物品是无菌的是关键的，也应当定期检查垫圈，确保其完整，避免微生物的进入。手套和半身衣是另一个可能产生污染的来源。因为操作者戴着手套处理无菌检验物品，所以手套是应当特别关注的，手套上微小的破损很难检查出来，手套在使用时，在拉伸情况下，手套上微小的破损可以体现出来。特别注意：培养基接触法检测手指菌落的方法，在检测低水平的污染时灵敏度是不足的。用0.1%的蛋白胨水溶液浸泡手套，将溶液过滤，然后将滤膜放在生长培养基碟子上检测，这个方法可以检测出其他方法检测不出的泄露。

隔离器内部进行连续的尘埃粒子检测是理想情况，这样可以快速检测到过滤器的泄露。第二个选择是使用便携式的尘埃粒子检测器进行周期检测。尘埃粒子检测取样不能对隔离器内部的无菌环境产生风险。

5 结语

国内外药品监督管理部门从法规上对隔离技术在制药行业的应用给予了明确规定及技术指导，不仅有助于增强无菌药品生产时无菌性的保障，新版GMP体系与国际药政法规已经全面接轨，不仅对药品生产企业的要求有了大幅度提高，尤其是对无菌产品的质量管理更加严格。我国的制药企业应从产业发展的长远角度出发，在无菌生产及检验过程中采用合适的无菌隔离系统，这不仅有助于我国制药企业提高GMP管理水平，而且对其参与国际认证、进入国际市场是一种极大的推动。

参考文献：

[1]汤澍,田雪.浅谈制药行业的无菌隔离技术[J].黑龙江科技信息，2013，（1）:16.

[2]陈勇.药用冻干机的无菌隔离系统[J].机电信息，2011,（35）:37-42.