R东欧开放试剂与罗氏原装试剂检测高密度脂蛋白胆固醇比对

R东欧开放试剂与罗氏原装试剂检测高密度脂蛋白胆固醇比对

张霖

张霖(山西省太原市太钢总医院检验科030008)

【摘要】通过对用东欧开放试剂与罗氏原装试剂检测高密度脂蛋白胆固醇（简称HDL-CH）进行结果比对，探讨东欧开放试剂与原装试剂检测HDL-CH结果是否具有可比性，是否可以替代原装试剂。选择临床上40份不同浓度水平的样本根据美国国家临床实验室标准化协会（NCCLS）颁布的EP9-A的文件对结果进行分析，判断其结果的临床可接受性。结论东欧开放试剂与罗氏原装试剂检测HDL-CH结果具有较好的可比性，东欧开放试剂可以替代罗氏原装试剂检测HDL-CH。

【关键词】开放试剂（东欧）原装试剂（罗氏）比对试验高密度脂蛋白胆固醇

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）05-0008-02

罗氏C501生化分析仪结果准确可靠，它具有最权威的溯源体系、高标准的配置、科学严谨的应用原则、聪明的试剂系统、独一无二的试剂添加功能以及远程联网、在线质控等七大优于其它同类。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量等特点。使用罗氏原装配套试剂测定结果准确，溯源性好。但由于试剂较贵，导致检测成本增加。因此我们根据NCCLS的文件对东欧开放试剂HDL-CH在c501上的应用进行实验评价。

1材料与方法

1.1标本来自太钢总医院住院及门诊患者的的标本40份。

1.2仪器和试剂（1）仪器：罗氏C501全自动生化仪。（2）试剂：罗氏原装HDL-CH试剂，批号：658915。开放试剂（浙江东欧诊断产品有限公司）生产的HDL-CH试剂，批号：2012010014。（3）参数：原厂提供的检测参数。

1.3试验原理罗氏原装（均相酶比色法）：在镁离子介质环境中，硫酸葡聚糖与低密度脂蛋白，极低密度脂蛋白，乳糜微粒等选择性的形成水溶性复合物，这些复合物不能被PEG修饰的酶催化。通过PEG修饰的胆固醇酯酶及胆固醇氧化酶与高密度脂蛋白胆固醇反应来检测高密度脂蛋白的胆固醇浓度。胆固醇脂被破坏，定量的形成游离脂肪酸及游离胆固醇。在加入氧后，胆固醇被氧化成△4-胆烯醇和双氧水。加入过氧化物酶后，双氧化物酶后，双氧水与4-氨基安替比林和HSDA反应形成蓝紫色的醌亚胺。形成的颜色强度与标本中的胆固醇的浓度成比例。

东欧开放试剂（直接法）：本方法以液体双试剂形式反应，试剂一中含有聚阴离子和表面活性剂，使聚阴离子选择地与VLDL-CH、LDL-C结合，并抑制试剂二中的COD、CE对VLDL-CH、LDL-C起作用于HDL-C，通过CE-COD-POD作用，检测546nm吸光度与HDL-C成正比。

1.4方法按照操作规程开机、保养使仪器处于最佳状态。罗氏原装HDL-CH扫描参数放于封闭通道。罗氏原装HDL-CH用配套Cfas-LiP校准品校准。东欧开放HDL-CH根据厂家提供参数放于仪器开放通道。东欧开放HDL-CH用厂家配套的校准品校准。

使用两种方法每天测定8个样本，每个样本重复测定2次，共测定5天。在样本的重复测定中，指定第一次测定顺序，按反方向顺序检测第二次。第二次标本的反向顺序可以减少交叉污染及漂移对重复测定标本平均值的影响。共检测住院及门诊患者不同浓度的HDL标本40份，其中≥1.9mmol/l的标本10份，≤0.9mmol/l的标本10份，0.9-1.9的标本20份。且标本浓度在线性范围内均匀分布。将结果进行相关回归处理，求其相关系数，及回归方程Y=bX+a。以美国临床实验室修正法规(CLIA'88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准，判断其结果的临床可接受性。

2结果

2.1做图（1）实验方法均值为y轴，对比方法均值为X轴做散点图。（2）单个实验方法结果Yij对比对方法均值散点图。（3）均值差值与两种方法均值的偏倚图。（4）单个结果差值与两种方法均值的偏倚图。

2.2试验数据处理及分析按《用患者样本进行方法学比对及偏倚评估EP9-A指导文件》，以罗氏原装试剂测HDL-CH为比对对象(X)，该试剂使用配套的校准物定期校正，每天有质量控制系统监控，并参加室间质评活动，各项目均在可接受范围之内。以东欧开放试剂做试验对象(Y)。分别统计两种试剂检测40份样本双份测定的平均值、双份测定值的绝对差值、方法标准化（相对）的绝对差值、方法间相对绝对差值、方法间相对平均绝对差值等。

根据EP9-A文件，对数据进行方法内离群值的检验东欧开放试剂检测HDL-CH的限值(4DY)是0.1542。罗氏原装试剂检测HDL-CH的限值(4DX)是0.072，进过检查没有离群值出现。然后进行方法间离群值检验东欧开放试剂检测HDL-CH的限值4DY'是0.556。罗氏原装试剂检测HDL-CH的限值4DX'是0.122，进过检查没有离群值的出现。按照CLIA'88标准，HDL-CH的总允许误差为30%，经过分析均在1/2TEa可接受范围内。

两组数据的相关系数为0.98>0.95，表明东欧开放试剂与罗氏原装试剂检测HDL-CH的相关性比较好，测定结果可靠。回归方程为Y=1.0268X+0.0045。

3讨论

根据NCCLS文件EP9-A对罗氏原装和东欧开放进行方法对比及偏倚评估，测定表明二者有良好的相关性，相关系数r>0.975，标本的测定范围合适，而预期偏差和相对偏差均小于临床研究我国卫生部临床检验中心推荐采用的美国CLIA'88室间能力比对检验的分析质量要求。罗氏原装和东欧开放试剂在所检测的HDL-CH的各个浓度对比过程中，均存在较好的相关性，预期偏倚均在可接受的范围内。

上述试验表明，罗氏原装试剂与东欧开放试剂检测HDL-CH的测定结果具有较好的可比性，检验结果可以互认。

参考文献

[1]杨有业，张秀明主编.临床检验方法学评价.北京市：人民卫生出版社,2009.06.

[2]林其燧.高密度脂蛋白胆固醇的检测方法及标准化研究进展.中华医学检验杂志1998年1月第21卷第1期

[3]李再忠,陈晓蓓,徐炜峰,陈建伟.“简捷法”与EP9-A2“标准法”比对分析偏倚评估结果的比较研究[J].浙江检验医学,2012,(第2期).