探讨金黄色葡萄球菌临床监测与葡萄球菌A蛋白快速检验

探讨金黄色葡萄球菌临床监测与葡萄球菌A蛋白快速检验

马杰

马杰

（洛阳市第五人民医院河南洛阳471000）

【摘要】目的探讨金黄色葡萄球菌临床监测与葡萄球菌A蛋白快速检验。方法选取100株SA菌株，分析其分布特征和耐药性。构建金属螯合免疫磁性微球，测定所有菌株的表面形态、表面集团吸收峰以及大小，采用磁性微球分析SPA，用于SA检测，总结经验。结果所有SA菌株分离自痰液56例，分泌物32例，血液7例，胆汁2例，器械导管3例。经检测发现46例甲氧西林敏感SA。在耐药率方面，对青霉素G（93%）、庆大霉素（23%）、左氧氟沙星（13%）、红霉素（54%）、克林霉素（56%）。剩余54例甲氧西林耐药SA，在耐药率方面，对青霉素G（92%）、左氧氟沙星（61%）、复方磺胺甲恶唑（21%）、庆大霉素（29%）、克林霉素（76%）。磁性微球的分散性较好，对于SA样品的检测灵敏度教导，达到100CFU，并且在特定情况下可保持3周较高活性。结论经过检测研究表明SA菌株在耐药性方面较强，免疫磁性微球技术在SA的迅速检测中有非常重要的意义，具有推广价值。

【关键词】金黄色葡萄球菌分离检验技术快速检验

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）09-0243-02

作为临床中非常常见的病原菌代表之一，金黄色葡萄球菌（SA）以往检测时间较长并且操作复杂。葡萄球菌A蛋白(SPA)表达于葡萄球菌细胞壁，能够同人类以及许多哺乳动物的IgGFc段进行结合[1]。为探讨金黄色葡萄球菌临床监测与葡萄球菌A蛋白快速检验方法及意义，我院专门成立研究小组，现将研究结果报道如下。

1.资料与方法

1.1临床资料

所有菌株选取标准规范，排除影响检测结果的因素。仪器与试剂选用人IgG、四氧化三铁磁流体、无水乙醇、分析纯正己醇以及环己烷等。

1.2方法

采用金属螯合免疫磁性微球，通过显微相机来观察磁性微球的形状和大小，其表面的基团吸收峰由红外检测仪进行测定。采用该磁性微球分离SPA进行SA的检测工作。具体分析SA的分布特征、磁性微球表面特征、SA耐药性以及磁性微球对于SA的检测性能。操作方法和规范根据美国临床和实验室标准化协会于2009年制定的相关标准，当头孢西丁抑菌环在25mm以上时则评定为敏感，在25以下或25时则评定为耐药。

1.3统计学方法

应用SPSS17.0统计软件进行数据处理。对照比较采用t检验；计数资料以率（%）为单位，比较采用X?检验。以P<0.05具有统计学意义。

2.结果

所有SA菌株分离自痰液56例，分泌物32例，血液7例，胆汁2例，器械导管3例。经检测发现46例甲氧西林敏感SA。在耐药率方面，对青霉素G（93%）、庆大霉素（23%）、左氧氟沙星（13%）、红霉素（54%）、克林霉素（56%）。剩余54例甲氧西林耐药SA，在耐药率方面，对青霉素G（92%）、左氧氟沙星（61%）、复方磺胺甲恶唑（21%）、庆大霉素（29%）、克林霉素（76%）。磁性微球的分散性较好，对于SA样品的检测灵敏度教导，达到100CFU，并且在特定情况下可保持3周较高活性。磁性微球表面特征上，磁性微球分散性较好，直径在5到15μm之间。根据红外广谱显示强吸收峰位于在波长1610和3420cm处，表示有IDA-Cu以及羟基存在。

分离SPA蛋白试验显示，蛋白谱的峰值在43520.46m/z处，与SPA相对分子质量4.2*10?比较相符。SA检测灵敏度试验结果显示免疫磁性微球处理35min即可检测出100CFU的SA样品。磁性微球稳定性试验结果显示免疫磁性微球于温度为4℃、浓度为1mol/L、pH值为6的磷酸盐缓冲液中可以保持较高活性。

表一所有SA菌株分离情况

3.讨论

SA菌株的一般来源为痰液和分泌物标本等，在胆汁、血液以及一些其他标本中也可以检测得到[2]。痰液标本的检测对于SA感染的患者非常重要，可以有效检测出病原菌。根据相关SA耐药性研究分析结果表示，MRSA对于多数的抗菌药物都有不同程度的耐药反应，而对于复方磺胺甲恶唑和庆大霉素的耐药率则比较低[3]。

免疫磁性微球技术是在免疫学理论的基础上建立起来的，能够同具有抗原的靶物质发生结合从而产生新的复合物，作为目前一种新兴的免疫学检测方式，已经在致病菌的快速检测上广泛使用，具有非常重要的临床价值。相比之下，以往传统的SA检测方式的缺陷比较明显，免疫磁性微球技术能够在较短的时间内便完成快速分离并鉴定SA，并且，免疫磁性微球制备成本较低，对于检测成本没有压力[4]。在本文的研究中，免疫磁性微球具有较好的分散性，直径在5到15μm之间，表面有IDA-Cu和羟基的存在，蛋白谱峰值同SPA相对分子质量比较相近，对SA样品的检测灵敏度较高，达到100CFU，并且在温度为4℃、浓度为1mol/L、pH值为6的磷酸盐缓冲液中可以保持较高活性。因此，临床中需要高度重视SA感染的诊断，通过对药敏试验结果的深入分析，选择较为合理的用药方案，并对检测出MRSA的患者及时采取针对性的治疗方法。本文研究中所采用的免疫磁性微球技术测速快，成本低，检测过程更加灵活，适于SA的常规监测。

综上所述，经过检测研究表明SA菌株在耐药性方面较强，免疫磁性微球技术在SA的迅速检测中有非常重要的意义，具有推广价值。

参考文献

[1]陈伶俐,刘琳琳,曾力希,等.金黄色葡萄球菌及SPA快速分离检验新技术的研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2011,19(2).112-114.

[2]刘琳琳.免疫磁性微球快速分离检验金黄色葡萄球菌新技术的研究[J].山东医学高等专科学校学报，2011，39﹙7﹚：579-615.

[3]黄洋，赵辉，张宗显，等.SPA方法快速检验食品志贺菌的研究[J].湖北化工2009：73-75.

[4]曹同雪，唐中今.SPA协凝试验法快速检验肉中沙门氏菌[J].肉品卫生，2012,15(9):2974.