葡萄糖测定

葡萄糖测定

任松涛

任松涛(黑龙江省黑河市第一人民医院164300)

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)2-0107-02

【摘要】体液中葡萄糖含量的高低是标志着人体健康状况的重要指标，尤其是糖尿病人的血液葡萄糖监控。葡萄糖浓度的突然升高与降低都预示着一种异常情况的发生。许多葡萄糖测定的电化学和光化学方法已经被报道并应用于不同样品的分析。

【关键词】葡萄糖采血管检验

(一)葡萄糖氧化酶法

1.原理葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生一分子过氧化氢。在过氧化物酶(POD)和色原性氧受体(如联大茴香胺，4-氨基安替比林偶联酚)的存在下，过氧化氢分解，释放出初生态氧，氧化色素原，生成有色化合物。

2.试剂推荐使用有批准文号的优质市售试剂盒。配制方法如下(仅供参考)：

(1)0.1mol／L(pH7.0)磷酸盐缓冲液：溶解无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g于800ml蒸馏水中，用1mol／L氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L。

(2)酶试剂：取葡萄糖氧化酶l200U、过氧化物酶1200U、4-氨基安替比林10mg、叠氮钠100mg，加上述磷酸盐缓冲液至80ml左右，调节pH至7.0，加磷酸缓冲液至100ml。置冰箱保存，至少可稳定3个月。

(3)酚试剂：重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中(酚在空气中氧化成红色，可先配成500g／L的溶液，用时稀释)。贮存于棕色瓶中。

(4)酶酚混合试剂：酶试剂及酚试剂等量混合，在冰箱内可以存放1个月。

(5)葡萄糖标准贮存液(100mmol／L)：无水葡萄糖(预先置80℃烤箱内干燥恒重，移置于干燥器内保存)。称取1.802g，以12mmol／L苯甲酸溶液溶解并移入100ml容量瓶内，再以12mmol／L苯甲酸溶液稀释至100ml刻度处，放置2小时后方可应用。

(6)葡萄糖标准应用液(5mmol／L)：吸取葡萄糖标准贮存液5ml，于100ml容量瓶中，用12mmol／L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。

(二)己糖激酶(HK)法

1.原理在己糖激酶催化下，葡萄糖和ATP发生磷酸化反应，生成葡萄糖6-磷酸(G-6-P)与ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)催化下脱氢，生成6-磷酸葡萄糖酸(6-GP)，同时使NADP+还原成NADPH。

2.试剂

(1)酶混合试剂的成分与浓度

三乙醇胺盐酸

缓冲液(pH7.5)50mmol/L

MgSO42.0mmol/L

ATP2.0mmol/L

NADP+2.0mmol／L

HK≥1500U／L

G-6-PD2500U／L

根据试剂盒说明书复溶后，混合配制成酶试剂，置棕色瓶中放冰箱保存，约可稳定7天。

(2)5mmol／L葡萄糖标准应用液：见葡萄糖氧化酶法。

(三)葡萄糖脱氢酶法

1.原理葡萄糖脱氢酶(GDH)催化葡萄糖脱氢，氧化生成葡萄糖酸(D-葡萄糖酸-δ-内酯)。

2.试剂

(1)磷酸盐缓冲液(pH7.6)：120mmol／L磷酸盐、150mmol／L氯化钠和1.0g/L叠氮钠，用磷酸或氢氧化钠调节至pH7.6(25℃)然后分装成100ml／瓶，冰箱保存。

(2)酶混合液：用上述磷酸盐缓冲液配制，酶混合液中含GDH≥4500U／L、异构酶≥90U／L和NAD2.2mmol／L，置冰箱保存，可稳定12周。若试剂吸光度>0.4(波长340nm，光径1.0cm，用蒸馏水调零)时，提示酶混合液需要重新配制。

(3)5mmol／L葡萄糖标准应用液：见葡萄糖氧化酶法。

(四)临床意义

1.血糖增高引起血糖增高的原因很多，除病理性原因外，也有属生理变化者。根据血糖升高程度不同分为：轻度(7.2～7.8mmol／L)、中度(8.3～10mmol／L)、重度(>10.5mmol／L)升高。

(1)生理性或暂时性高血糖：饭后1～2小时，注射葡萄糖后，情绪紧张时肾上腺素分泌增加或注射肾上腺素后。

(2)病理性高血糖

①胰岛素分泌不足：胰岛素相对不足或绝对不足，临床表现为糖尿病，青年型的糖尿病患者常为胰岛素的绝对不足(分泌量低于正常)，成年型的糖尿病患者常为胰岛素相对不足(分泌量不低于正常，甚至超过正常，但仍不能满足机体的需要量)。

②升高血糖的激素分泌增加：如腺垂体功能亢进，肾上腺皮质功能亢进、甲状腺功能亢进、嗜铬细胞瘤、胰岛α细胞瘤等。

③颅内压增高：颅内压增高可刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等。

④由于脱水引起的高血糖：如呕吐、腹泻、高热等。

⑤麻醉、窒息、肺炎等急性传染病、癫痫、子痫等疾病：由于加速肝糖原分解，使血糖增高，甚至形成酸中毒。

2.低血糖有病理性与生理性低血糖，根据血糖降低程度不同分为：轻度(3.3～3.9mmol／L)、中度(2.2～2.8mmol／L)、重度(<1.7mmol／L)低血糖。

(1)生理性或暂时性低血糖：运动后和饥饿时、注射胰岛素后、妊娠、哺乳期和服降糖药后。

(2)病理性低血糖

①胰岛素分泌过多：如胰岛β细胞瘤。

②升高血糖激素分泌减少：如垂体功能减退、肾上腺功能减退和甲状腺功能减退。

③血糖来源减少，肝糖原贮存不足：如长期营养不良、肝炎、肝坏死、肝癌、急性重型肝炎、糖原累积病和磷及砒中毒等。

④组织对糖的利用增加：如注射胰岛素过量、甲状腺切除术后、胸腺淋巴体质进行性萎缩等。

⑤血糖损失过多：如根皮甙引起的肾小管中毒性糖尿。

参考文献

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[2]陈爱静.3种样本管血液葡萄糖测定的稳定性比较《检验医学与临床》2009年08期.

[3]韦寿莲，邓光辉.一种简单的葡萄糖测定方法《分析化学》2001年04期.

[4]章博.基于旋光效应的糖浓度检测[D];黑龙江大学;2007年.