简介:摘要目的建立RP-HPLC法测定熊去氧胆酸片中熊去氧胆酸含量的方法。方法使用KromasilC18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.025mol?L-1磷酸溶液(体积比4555,用20%氢氧化钠调PH至2.5±0.3)为流动相;流速为1.2mL/min,检测波长为205nm,柱温为30℃。结果熊去氧胆酸片中熊去氧胆酸及有关物质在测定范围内线性关系良好,测试方法精密度、稳定性、重现性良好(RSD<2%),平均回收率为98.5%~100.4%。结论RP-HPLC应用于熊去氧胆酸中熊去氧胆酸及相关物质含量的测定具有简便、灵敏度高、准确性强的优势,能有效控制熊去氧胆酸片的质量。
简介:目的探讨一种简便、稳定、可重复的大鼠成年神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型的制备方法。方法以来自于成年Fisher344大鼠的海马神经干细胞系为研究对象,以无血清培养基培养并传代.并用nestin和DAPI免疫荧光双染确认其生物学特性。将三气培养箱氧气浓度调至1%以制备缺氧环境,将培养基换为不含葡萄糖的Earle’s平衡盐溶液,分别缺氧缺糖2h、4h、6h、8h、10h后取出细胞,恢复正常条件继续培养24h后倒置显微镜下观察细胞形态学变化,CCK-8比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率。同时设置常氧常糖的正常对照组。结果与正常对照组相比.缺氧缺糖2h组细胞吸光度值明显升高,细胞存活率有一定的增长,但差异无统计学意义(P〉0.05)。随着缺氧缺糖时间延长,神经干细胞形态学损伤逐渐加重,细胞吸光度值逐渐下降.缺氧缺糖6h后与正常对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05);缺氧缺糖6h起细胞存活率均较正常对照组明显下降,比较差异有统计学意义伊〈0.05);神经干细胞凋亡率逐渐增高,且均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P〈0.05),其中缺氧缺糖6h时细胞的凋亡率已超过50%。结论利用三气培养箱物理缺氧方法可成功建立一种简便、有效的神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型。
简介:摘要目的探讨不同浓度氧对高糖培养的大鼠肾成纤维细胞(NRK)血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响。方法按照常规方法体外培养NRK细胞,同步化后随机分为6组,包括正常对照组、高糖对照组、缺氧对照组、5%氧浓度组、12%氧浓度组、20%氧浓度组。采用半定量RT-PCR测定NRK细胞中VEGF和PEDF的表达变化情况。并用ELISA法检测培养液上清中VEGF与PEDF蛋白水平。结果①正常对照组中,VEGF和蛋白有弱表达,PEDF和蛋白有强表达;②高糖组的VEGF表达较正常对照组明显升高,PEDF表达明显下降,且呈时间依赖性;③缺氧对照组VEGF表达较高糖对照组明显升高,PEDF表达下降,且呈时间依赖性;④不同氧浓度组的VEGF表较达正常对照组均明显降低,PEDF表达明显上升,且呈剂量依赖性;⑤不同氧浓度组的VEGF表达较高糖对照组均明显降低,PEDF表达明显上升,且呈剂量依赖性;⑥在不同氧浓度组中,随着时间的延长,VEGF表达逐渐增加,而PEDF表达逐渐减少;比较P<0.05,差异均具有统计学意义。结论缺氧会导致高糖培养的NRK细胞中VEGF和PEDF表达失衡,分析其可能是导致糖尿病肾病发病的主要因素之一。
简介:摘要目的探讨心脏手术与氧中毒发生的关系。方法对心脏手术发生氧中毒的15例临床资料进行回顾性分析。结果心脏手术后早期的氧中毒与心脏术中体外循环高氧密切相关。讨论心脏手术中行体外循环高浓度氧注入可能导致氧中毒,在保证氧供的情况下,尽量降低氧流量。