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  • 简介:用PCR方法扩增了人的BAF53全长cDNA序列,用酶切后的ΔBAF53cDNA片段构建了表达质粒.转化大肠杆菌后,经IPTG诱导表达,再经包涵体裂解、纯化,得到hBAF53抗原多肽.从免疫动物身上获得实验动物的抗血清.通过斑点印迹方法测得hBAF53抗血清的特异性和效价,又用已提取的HeLa细胞核蛋白(含有天然BAF53蛋白)进行免疫印迹分析,证明天然BAF53蛋白是该抗血清的抗原,说明获得的抗血清具有比较高的特异性,可用于染色体改构复合物各亚基间相互作用分析及调控基因转录机理方面的研究.

  • 标签: hBAF53 多克隆抗体 制备 活性 染色质改构复合物亚基 基因转录调控
  • 简介:近似所有人的癌症表演正常TP53基因表示的一半但是MDM2或MDMX的异常overexpression。这个事实建议有希望的癌症在指向在p53和MDM2/MDMX之间的相互作用的治疗学的策略。为了帮助,实现开发有效禁止者破坏p53-MDM2/MDMX相互作用的目标,我们系统地调查了结构并且有它和从用随机的分子的动力学模拟的一个原子论的观点的MDM2和MDMX的相互作用的禁止者的p53的相互作用特征。我们发现在MDM2和MDMX玩的结构的某特定的helices在他们的绑定给角色调音到禁止者,并且氢契约在MDM2或MDMX与它的对应物由p53的Trp23残余形成了,这在vivo从MDM2-p53建筑群决定MDM2-p53相互作用的混乱和p53的代替的动态比赛过程。结果在这报导纸被期望为设计功能的禁止者并且认识到癌症基因治疗的新策略提供基本信息。

  • 标签: MDM2 相互作用 竞争机制 结构效应 P53 肿瘤治疗
  • 简介:TheDNA-dependentproteinkinasecatalyticsubunit(DNA-PKcs)playsamajorroleinDNAdamagesignalingandrepair,andisalsofrequentlyover-expressedintumormetastasis.WeusedisogeniccelllinesexpressingdifferentlevelsofDNA-PKcstoinvestigatetheroleofDNA-PKcsinmetastaticdevelopment.Interestingly,ourresultsshowedthatX-rayirradiationinducedthemetastasisofDNA-PKcspositive(M059K)butnotnegative(M059J)cells;however,genisteincouldsuppresstheradiation-inducedmetastaticpotentialofM059Kcells(Fig.1).Theconcretemechanismsunderlyingthisphenomenonwillbeinvestigatednextyear.

  • 标签: DNA-PKCS POSITIVE CELLS