简介：摘要：目的 为达到 PulseNet China 网络实验室监测技术能力标准化和规范化，实现数据有效传输和分析，要求PFGE实验完成的图像要符合质量标准。方法 按照国家疾控中心出台的标准操作规程及结合各网络实验室开展实验以来积累的操作经验。结果 PFGE实验按操作规程认真、仔细操作，完成的图像就能够达到质量标准。

简介：摘要目的监测伤寒沙门菌株对青霉素和其他抗生素的耐药情况。分析多重PCR基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性，分析血清型青霉素耐药菌株的脉冲电场凝胶电泳(PFGE)图型，初步了解耐药菌株分子流行病学上的特点。方法(1)抗生素药物敏感试验;（2）用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)结果发现23株多重耐药鼠伤寒沙门菌,其中耐4～5种抗生素的9株(40%)，耐6～9种抗生素的8株(35.13%)，耐10种抗生素的6株(26.10%);可分为16个PFGE型,其中5个PFGE型的菌株数超过1株。结论伤寒沙门菌分离株的多重耐药性严重,PFGE分型方法对鼠伤寒沙门菌的分型能力较好。

简介：目的通过研究肺炎链球菌血清学、耐药脉冲均凝胶电泳（PFGE）关联性,完善和补充区域性肺炎链球菌传播及流行的鉴定标准和预警体系。方法随访调查2012-2015年四川省泸州市人民医院肺炎链球菌流行性,并通过免疫学、血清生化和分子生物学手段鉴定和分析肺炎链球菌的感染特性,进一步分析细菌种类及耐药的相关性。结果（1）流行发现,儿童（≤14岁）患者的比例（68.3%）明显高于青少年及成人（〉14岁）患者（31.7%）,无性别差异;7种血清分型结果中,19型占比最高（66.67%）,13型和15型最少。（2）血清型与耐药相关分析,发现血清3型的耐药率最高。（3）PFGE带型与耐药相关分析,17种PFGE带型,总耐药率达到75.83%,其中5种药物耐药及SPS16.CN011耐药比率最高。结论该院2012-2015年流行的肺炎链球菌主要发生于儿童（≤14岁）患者,PFGE型对肺炎链球菌的鉴别和诊断优于血清学方法;但对其耐药性分析发现,血清型与耐药性关联作用大于PFGE分型,这可能与细菌本身的致病物质荚膜抗原密切相关。

简介：目的了解我国食品中分离的110株大肠埃希菌O157的耐药及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型特征,完善我国食品中大肠埃希菌O157菌株特征的基础信息,为该菌的风险评估提供依据。方法使用琼脂稀释法对确认的110株大肠埃希菌O157进行药敏试验,完成耐药特征的分析。参照美国疾病预防控制中心PulseNet试验方法,对110株大肠埃希菌O157,运用XbaⅠ酶进行酶切并完成PFGE分析,利用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析。结果1110株菌中,43株菌至少对一种抗生素有抗性。耐药率最多的前三种抗生素依次是四环素（30.0%,33/110）,磺胺甲恶唑（29.1%,32/110）,萘啶酸（26.4%,29/110）;2一共有24个耐药谱,耐两种以上抗生素的菌株有34株,耐3种以上抗生素的多重耐药菌株有32株。最常见的三种耐药谱依次是SMX（6）,AMP-NAL-SMX-SXT-TET（6）,AMP-CHL-NAL-SMX-SXT-TET（4）/AMP-SMX-SXT-TET（4）/TET（4）;3大肠埃希菌O157非H7（O157∶hund）对所测试的抗生素的耐药率明显高于大肠埃希菌O157∶H7（χ2=72.010P〈0.05）。其中37株携带了志贺毒素基因的大肠埃希菌O157∶H7仅对磺胺甲恶唑（2.7%,1/37）、萘碇酸（2.7%,1/37）有耐药,没有多重耐药菌株;4通过不同种类食品中大肠埃希菌O157菌株耐药率比较发现,从生猪肉、生禽肉中分离的菌株耐药率相对高于其他食品种类;5PFGE分子分型研究显示菌株具有基因多态性,且可以很好将大肠埃希菌O157非H7和大肠埃希菌O157∶H7菌株区分开。结论我国食品中分离的大肠埃希菌O157耐药现象严重。我们应加强养殖环节和零售环节食源性致病菌,特别是大肠埃希菌O157（包括产志贺毒素大肠埃希菌O157）菌株药敏特征的监测,探明食品与养殖环节菌株耐药的传播关系,并为国家制定科学的养殖业抗生素用药提供依据。

简介：目的检测并分析某教学医院住院患者与环境中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）携带情况，分析住院患者与环境分离MRSA菌株的同源性。方法在上海市某教学医院采集住院患者样本418例和医院环境样本204例，分离鉴定MRSA，采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）对MRSA进行基因分型，并分析同源性。结果共分离MRSA43株，其中从患者样本中分离17株，环境样本中分离26株，医院环境中公共用品分离率（23．5％）最高，与医护人员直接接触物品分离率（3．1％）差异有统计学意义。PFGE分型显示43株MRSA可分为23个基因型，其中A型（27．9％）最多，F型（9．3％）和L型（7．0％）其次，其余型别分离1～2株。部分相同或高度相似的PFGE型别的MRSA在不同患者和医院环境中都有检出。结论该院医院环境中MRSA检出率较高，且与住院患者样本中检出的MRSA呈现一定的同源性，应加强环境消毒和医护人员防控意识，最大限度减少交叉感染的发生。