简介:生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过CaCl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因luxAB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明:在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1mmol/L,装液量50mL/150mL,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明:当pH6,IPTG浓度0.08mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。
简介:目的:分离、鉴定海地瓜中的一脂类化合物,测定其体外抗肿瘤活性。方法:对海地瓜干粉用氯仿-甲醇-水体系(体积比4:4:1)萃取,经连续正反相柱层析分离得到1种脂类化合物。采用IR、ESI—MS、NMR、GC—MS等分析手段对该化合物结构进行表征,并用MTT法检测其对S-180细胞增殖的影响。结果表明:该活性脂质为神经酰胺类化合物系列物.主要由2-氨基-1,3~二羟基-15-甲基-4-十七烯长链碱和5种饱和及单不饱和的脂肪酸构成。MTT试验表明其对S-180小鼠肉瘤细胞的增殖具有较好抑制活性,表现出显著的时间一剂量依赖效应,72h时的IG50值为172.45μg/mL。
简介:目的:了解北京地区居民膳食结构以及膳食营养状况,比较两种不同的膳食调查方法。方法:采用多级分层抽样的方法.从2004年9月至12月对顺义、昌平、朝阳、海淀、宣武以及东城6个区的12个社区,每个社区随机抽取15或16个家庭.共189个家庭503人参加了调查。分别采取称重记录法和重份样品的实际测定两种方法收集并分析数据。15名调查员分别在每个家庭连续6d(包括2个周末)对调查对象所摄取的食物一一称重纪录。同时,在每个社区15个家庭中随机抽取5个家庭,每个家庭各1名成员每天收集摄入的所有食物的重份样品.并对样品中的营养成分进行了测定。结果:了解了北京市居民膳食q-各种食物的摄入量、主要营养素以及矿物质和微量元素的摄入状况.并与国内外膳食结构进行了比较;对两种不同调查方法的结果也进行了比较和评价.