简介:摘要目的探讨白介素(IL)-35修饰间充质干细胞(MSC)抑制小鼠心脏移植排斥反应的作用及机制。方法体外构建稳定表达IL-35的MSC(IL-35-MSC)。建立小鼠腹腔异位心脏移植模型,根据干预方式不同分为同系对照组、生理盐水对照组、MSC处理组及IL-35-MSC实验组(每组各12只)。各组随机选取6只小鼠术后第5天处死,HE染色观察移植心脏病理变化,ELISA检测外周血IL-35浓度,流式细胞术(FCM)检测脾脏T淋巴细胞亚群比例。剩余6只用于记录移植物存活期。结果成功构建小鼠心脏移植模型,同系对照组移植物术后28 d均存活;相较于生理盐水对照组存活(6.50±0.55)d及MSC处理组存活(12.00±0.89)d,IL-35-MSC实验组移植物存活期(18.50±1.64)d明显延长(n=6,P<0.01)差异有统计学意义。相较于其他组,IL-35-MSC实验组移植术后第5 d脾脏Th17比例和Th1/Th2比值降低,CD4+Foxp3+Treg细胞比例增高,差异具有统计学意义(n=6,P<0.01)。结论IL-35-MSC能够有效减轻小鼠心脏移植排斥反应,以IL-35-MSC为基础的细胞免疫疗法有望成为诱导移植术后免疫耐受的新途径。
简介:摘要目的探讨卵巢低反应(POR)患者应用黄体期促排卵(LPS)方案行体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)助孕的临床效果。方法收集2013年6月至2018年12月期间于河北医科大学第四医院生殖医学科应用LPS方案行IVF/ICSI助孕的134例POR患者临床资料,对其临床、实验室数据及冻融胚胎移植的临床妊娠结局进行回顾性分析。结果134例患者共行142个LPS促排卵周期,其中未取卵周期8个,占5.63%(8/142);未获卵周期11个,占7.75%(11/142);无冷冻胚胎周期占比37.32%(53/142),总周期取消率50.70%(72/142)。尿促性腺激素(hMG)使用时间是(10.04±3.51) d,用量(2 330.00±890.48) IU。有24.64%(35/142)周期在扳机日孕酮降至1 μg/L以下。获卵数为(3.13±2.60)枚,获卵率为76.04%(419/551);MII卵数为(2.98±2.25)枚,MII卵率为86.63%(363/419);双原核(2PN)数为(2.17±1.69)枚,2PN率为69.97%(254/363);可利用胚胎数为(2.04±1.53)枚,可利用胚胎率为91.34%(232/254);优质胚胎数为1(0.2)枚,优质胚胎率为46.06%(117/254)。2016年6月前优质胚胎冷冻后,非优质胚胎进行培养,囊胚形成率为15.22%(7/46),2016年6月后可利用胚胎全部培养,囊胚形成率为41.98%(55/131)。50例患者共行60个冻融胚胎移植周期,移植周期临床妊娠率为41.67%(25/60),流产率为44.00%(11/25),活产率为23.33%(14/60)。结论POR患者行LPS周期取消率较高,如有冷冻胚胎进行复苏移植可获得较满意临床妊娠率,但流产率较高。
简介:摘要目的探讨白细胞介素17(IL-17)修饰的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对异体小鼠皮肤移植的影响及机制。方法(1)取5只BALB/c小鼠(均为雌性,4~8周龄,性别、鼠龄下同),处死后取股骨、胫骨和肱骨,采用全骨髓密度梯度离心联合贴壁分离法分离纯化培养BMSC,取第3代细胞行形态学观察,该代细胞经成骨、成脂诱导分化鉴定。第4代细胞经干细胞表面标志物鉴定。取第3~6代BMSC,经终质量浓度50 ng/mL小鼠重组IL-17预处理5 d后,行形态学观察。取IL-17预处理的BMSC和未经IL-17预处理BMSC标记碳花青荧光染料(CM-Dil),行形态学观察并计算标记率。(2)取45只C57BL/6J小鼠,按随机数字表法分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组13只、单纯BMSC组16只、BMSC+IL-17组16只。在小鼠皮肤移植术前1 d,单纯BMSC组13只小鼠经尾静脉注射5×106个/mL未经CM-Dil标记的BMSC 0.1 mL,另3只小鼠经尾静脉注射5×106个/mL CM-Dil标记的BMSC 0.1 mL;BMSC+IL-17组13只小鼠经尾静脉注射5×106个/mL未经CM-Dil标记的IL-17预处理的BMSC 0.1 mL,另3只小鼠经尾静脉注射5×106个/mL CM-Dil标记的IL-17预处理的BMSC 0.1 mL;PBS对照组13只小鼠经尾静脉注射0.1 mL PBS。取45只BALB/c小鼠作供体,将前述3组处理后的45只C57BL/6J小鼠作为受体,建立背-背全厚皮移植模型。于移植术后第2天,再次对3组小鼠注射与移植术前1 d一样的等量相应细胞或PBS。于移植术后第7天,分别取单纯BMSC组和BMSC+IL-17组中注射CM-Dil标记的BMSC和CM-Dil标记的IL-17预处理BMSC的3只小鼠,脱颈处死后采用荧光显微镜观察BMSC的CM-Dil示踪并计数。于移植术后第6天拆除敷料后,从单纯BMSC组注射未经CM-Dil标记的BMSC的13只小鼠和BMSC+IL-17组注射未经CM-Dil标记的IL-17预处理BMSC的13只小鼠及PBS对照组13只小鼠中选取7只小鼠,记录移植皮片的存活时间。于移植术后第8天,从3组剩余的6只小鼠中分别取3只小鼠进行移植皮片的大体观察,酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中γ干扰素、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)的水平,流式细胞仪检测脾脏CD4+CD25+叉头翼状螺旋转录因子p3(Foxp3)+调节性T细胞(Treg)比例,行苏木精-伊红染色观察移植皮片的组织形态。于移植术后第14天,取3组剩余3只小鼠同前行组织形态观察。对数据行独立样本t检验、单因素方差分析、LSD检验。结果(1)培养5 d,经IL-17预处理的BMSC与未处理的BMSC形态和大小并无明显差别。(2)CM-Dil标记后,经IL-17预处理的BMSC与未处理的BMSC生长状态均较良好,标记率几乎可达100%。(3)移植术后第7天,单纯BMSC组小鼠皮片及邻近皮下组织CM-Dil标记阳性的BMSC数量为每100倍视野下(6.2±2.6)个,明显少于BMSC+IL-17组CM-Dil标记阳性的IL-17预处理BMSC的每100倍视野下(15.0±5.3)个(t=-2.962,P<0.05)。(4)单纯BMSC组和BMSC+IL-17组小鼠移植皮片的存活时间分别为(13.3±1.2)、(17.0±1.5)d,明显长于PBS对照组的(8.7±0.8)d(P<0.01),而BMSC+IL-17组小鼠移植皮片的存活时间明显长于单纯BMSC组(P<0.01)。(5)移植术后第8天,PBS对照组小鼠移植皮片大部分发黑变硬且结痂坏死,单纯BMSC组小鼠移植皮片大部分存活良好,BMSC+IL-17组小鼠移植皮片均存活良好。(6)移植术后第8天,与PBS对照组相比,单纯BMSC组和BMSC+IL-17组小鼠的血清中IL-10和TGF-β含量明显升高(P<0.01),γ干扰素含量明显降低(P<0.01);与单纯BMSC组相比,BMSC+IL-17组小鼠的血清中IL-10和TGF-β含量明显升高(P<0.01),γ干扰素含量明显降低(P<0.01)。(7)移植术后第8天,单纯BMSC组和BMSC+IL-17组小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg比例明显高于PBS对照组(P<0.01),BMSC+IL-17组小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg比例明显高于单纯BMSC组(P<0.01)。(8)移植术后第8天,PBS对照组小鼠移植皮片可见大量炎性细胞浸润,表皮、真皮坏死;单纯BMSC组小鼠移植皮片可见局灶性的炎性细胞浸润,仅有轻微的表皮变性;BMSC+IL-17组小鼠移植皮片皮肤附属器存活完好,同时有血管形成。移植术后第14天,单纯BMSC组小鼠移植皮片可见广泛的炎性细胞浸润,并有较重的表皮变性和局灶性坏死;BMSC+IL-17组小鼠移植皮片可见局灶性的炎性细胞浸润和轻微表皮变性;PBS对照组小鼠移植皮片已完全坏死。结论IL-17可通过提高小鼠BMSC诱导免疫耐受的能力和增强BMSC的归巢能力,最终起到减轻异体皮片移植后免疫排斥反应,延长小鼠移植皮片存活时间的作用。
简介:【摘要】目的:探讨小儿湿疹采取丁酸氢化可的松联合透明质酸凝胶治疗对降低患者皮肤破损和减轻炎症反应的效果。方法:将我院 2019年 1月 -2020年 1月 80例小儿湿疹患儿,信封随机法分二组。对照组给予丁酸氢化可的松治疗,实验组实施丁酸氢化可的松联合透明质酸凝胶治疗。比较两组治疗开始和治疗后炎症反应因子、小儿湿疹疗效、皮肤破损发生率、不良反应。结果:实验组炎症反应因子、小儿湿疹疗效、皮肤破损发生率和对照组比较,存在显著差异, P< 0.05。两组均无不良反应。结论:小儿湿疹患儿实施丁酸氢化可的松联合透明质酸凝胶治疗可加速病情恢复,改善皮肤情况,减少破损,减轻炎症反应,安全性高。
简介:摘要目的分析新生儿痤疮皮损和健康婴儿面部正常皮肤表面脂质(SSL)的差异。方法2018年6-8月在首都儿科研究所附属儿童医院皮肤科收集36例新生儿痤疮(痤疮组)面部皮损及36例健康婴儿(对照组)面部皮肤脂质标本。采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术得到脂质图谱,用多元数据分析方法得到脂质成分的具体信息。采用SPSS19.0软件进行独立样本t检验分析两组间差异。结果与对照组相比,痤疮组患儿面部皮肤甘油脂类和孕烯醇酮脂类显著增加(均P < 0.001),但脂肪酸类、甘油磷脂类、鞘脂类、固醇脂类、糖脂类、多聚乙烯类显著下降(P < 0.01或0.05)。进一步分析显示,痤疮组脂质总量、甘油二酯、蜡酯、角鲨烯平均相对含量均高于对照组(P < 0.001或0.05),但亚油酸平均相对含量低于对照组(P < 0.001)。结论新生儿痤疮面部皮损脂质总量较健康婴儿明显增加,脂质成分也存在明显差异。
简介:摘要目的通过干预体外培养人膝骨关节炎软骨细胞中的骨桥蛋白(OPN)-整合素ɑνβ3配体受体反应,观察其对软骨细胞透明质酸(HA)表达水平的影响。方法从人膝骨关节炎软骨组织标本中获取并体外培养软骨细胞,实验分为三组:对照组加入1 μg/ml重组人骨桥蛋白(rhOPN)干预;整合素ɑνβ3阻断组先采用整合素ɑνβ3阻断剂GRGDSP peptide(100 μg/ml)干预软骨细胞1 h以阻断OPN-整合素ɑνβ3的结合后再加入1 μg/ml rhOPN进行干预23 h,整合素ɑνβ3同型组先采用整合素ɑνβ3同型剂GRGESP peptide(100 μg/ml)干预软骨细胞1 h后再加入1 μg/ml rhOPN进行干预23 h。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测各组透明质酸合成酶HAS1、HAS2和HAS3 mRNA表达,采用ELISA法检测HA水平。结果显微镜下观察膝骨关节炎软骨细胞与正常软骨细胞培养后的形态,正常软骨细胞呈多角形,而膝骨关节炎软骨细胞伪足增多,形态多不规则。另外,与对照组(1.01±0.10)相比,整合素ɑνβ3阻断组HAS1、HAS2、HAS3 mRNA表达水平[(0.70±0.01)、(0.68±0.05)、(0.55±0.03)]显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);而整合素ɑνβ3同型组HAS1、HAS2、HAS3 mRNA表达水平[(1.09±0.14)、(0.95±0.06)、(1.04±0.08)]与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组[(884.0±7.6)pg/ml]比较,整合素ɑνβ3阻断组HA水平[(578.4±13.8)pg/ml]显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);而整合素ɑνβ3同型组HA水平[(882.1±10.1)pg/ml]与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论OPN可以通过与整合素ɑνβ3配体受体反应刺激软骨细胞HAS分泌进而诱导HA表达。
简介:摘要: 提质煤又称半焦、兰碳,是以低阶不粘煤和弱粘煤为原料,采用中低温干馏工艺生产的一种高固定碳含量的碳素材料,因提质煤只有原低阶煤污染物含量的 10%~20%左右,特别是硫仅为原煤的 10%,所以具有良好的环保属性,所以被认为是清洁能源的一种。提质煤的生产工艺也是目前成本最低的低阶煤分级利用转化路径,与煤液化相比,属于部分气化,不需要催化、加氢、加压等,投资小,成本低,资源利用效率高。由于提质煤固定炭高、比电阻高、化学活性高、低硫、低磷等特性,部分产品可取代冶金焦,用作高炉喷吹煤与金属硅铁、铅锌冶炼等还原剂。可运用于化工、冶金、造气等行业。提质煤产业发展大致经历了土法炼焦、机制兰炭和规模生产的三个时期。