简介：

简介：组织学特殊染色技术及免疫组织化学技术已广泛应用于基础医学和临床医学的科研工作中.本快速染色法即用组织学醛品红染色法和免疫组织化学SP法在同一张切片上对胰岛B细胞和A细胞进行了双重染色,取得较好的效果,现作简单介绍.取大鼠胰腺,Bouin液固定,石蜡包埋,切5μm厚切片.双染步骤如下:第一步,胰岛B细胞的醛品红染色:切片脱蜡到水;入0.25%浓硫酸和0.25%高锰酸钾等量混和液中3min;蒸馏水洗后入5%草酸2min;蒸馏水洗;再经70%酒精后入醛品红染液15min;70%酒精分色后,蒸馏水洗.第二步,胰岛A细胞的免疫组化染色:将经醛品红染色后的切片,入3%甲醇双氧水室温孵育15min;蒸馏水洗后枸橼酸缓冲液(0.01M,pH6.0)(电炉加热煮沸92℃～98℃)进行抗原修复10min;PBS浸泡5min后,用正常羊血清室温封闭30min;弃去多余羊血清,滴加一抗(抗胰高血糖素抗体,1∶1500),37℃,孵育2hr;PBS室温洗10min后,滴加生物素标记的二抗,37℃,孵育40min;PBS室温洗10min后,滴加辣根酶标记的链霉卵白素工作液,37℃,孵育40min;PBS室温洗10min,DAB显色.结果及讨论:此染色方法在同一张切片上所观察到的胰岛B细胞呈蓝紫色,而胰岛A细胞呈棕黄色,两者颜色对比清晰.细胞核不着色.本方法可在一个工作日内完成,即提高了工作效率,又减少了免疫组织化学多重染色中步骤多、时间长,易受外界因素影响的限制,进而降低了非特异性染色.因此,该方法在科研工作中具有一定的应用价值.

简介：2型糖尿病（type2diabetesmellitus，T2DM）是涉及多基因的复杂临床综合征。数项基因组扫描技术已确定控制β细胞发育或功能的T2DM危险位点，强有力地证明β细胞基因易感性决定着T2DM的发病危险。一旦糖尿病（DM）的病理机制形成，高血糖、高血脂随之发生，对β细胞造成损害或毒性效应。

简介：摘要胰岛β细胞功能障碍是糖尿病发病的重要病理基础，因此，保护胰岛β细胞功能是防止糖尿病发生的关键措施。现已明确，科学合理的运动锻炼能够改善机体的胰岛素抵抗。同样运动对受损的胰岛β细胞功能具有修复作用，同时改善糖、脂代谢，从而使糖尿病个体达到良好的代谢水平。作为简便、经济的干预方式，运动对于糖尿病的预防具有重要意义。

简介：糖尿病是严重危害人类健康的重大疾病之一。且近年来此病的发病率星上升趋势，目前治疗该病的有效方法是胰岛索治疗，给社会和家庭带来了沉重的负担。胰岛移植虽是治疗此病的有效手段，但面临胰岛供体匮乏，免疫排斥以及使用免疫抑制剂给病人带来痛苦等困难。能找到可以避免上述困难又能有效分泌胰岛素的细胞将给亿万糖尿病病人带来福音。

简介：糖尿病是由于胰岛素分泌或作用不足引起以血糖增高为主要特征的代谢性疾病，糖尿病严重威胁人类的健康和生命，其发病率呈逐年上升趋势。对于糖尿病的治疗多采用药物和外源性胰岛素替代的治疗方法，但仍缺乏根治方法。

简介：目的:探讨灵芝多糖(Gl-PS)对胰岛细胞分泌胰岛素的影响.方法:分离大鼠胰岛细胞,分别观察在葡萄糖为5.6和16.7mmol*L-1时,Gl-PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影响.进一步加入不同的抑制剂观察Gl-PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影响.采用Westernblotting观察Gl-PS对胰岛细胞葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)表达的影响.结果:在5.6mmol*L-1葡萄糖时,100mg*L-1的Gl-PS可明显促进胰岛细胞胰岛素的分泌;当葡萄糖浓度为16.7mmol*L-1时,50和100mg*L-1的Gl-PS均可明显促进胰岛细胞胰岛素的分泌.维拉帕米或维拉帕米+EGTA均可显著抑制5.6和16.7mmol*L-1葡萄糖时胰岛素的分泌,维拉帕米只能部分抑制Gl-PS的促胰岛素分泌作用,而维拉帕米+EGTA则可完全抑制Gl-PS的这种作用.在葡萄糖浓度为5.6和16.7mmol*L-1时,Gl-PS50和100mg*L-1均能明显促进胰岛细胞GLUT2的蛋白表达.结论:Gl-PS可能通过促进胰岛细胞GLUT2蛋白的表达从而有助于葡萄糖转运入B细胞,促进葡萄糖的代谢,引起胰岛细胞外Ca2+内流而起到促胰岛素释放的作用.

简介：对于胰岛β细胞初始胰岛素治疗基础胰岛素和餐前胰岛素替代治疗方案哪一个更好,格列美脲加睡前基础胰岛素治疗组,而应用格列美脲加睡前基础胰岛素治疗后真胰岛素原仅轻度增加

简介：摘要胰岛β细胞功能进行性衰竭是2型糖尿病发生发展的重要因素之一，随着糖尿病病程的延长，β细胞功能和数量逐渐下降，胰岛素进行性分泌不足，血糖控制难度增加。因此，研究β细胞的发育、功能维持及数量调节对未来防治糖尿病有积极意义。该文对胰岛β细胞的分化、功能调控及凋亡再生等方面作一综述。

简介：目的总结无功能胰岛细胞癌的诊断治疗经验。方法对1980年5月至2003年5月收治的12例无功能胰岛细胞癌临床病理资料进行分析。结果平均年龄45岁。最常见临床表现为上腹部包块和不适。所有病人经超声和CT检查确定了肿瘤部位，但仅2例术前考虑为内分泌肿瘤。手术证实7例存在淋巴结转移，3例存在肝转移。11例施行肿瘤切除，1例肿瘤无法切除，施行胆囊吻合解除梗阻性黄疸。5和10年生存率是50％和17％。结论无功能胰岛细胞癌手术切除率高，虽治愈率低，但多数病人获得较长的生存期。

简介：摘要在胰岛细胞凋亡的进程中，免疫机制尤其是一系列的细胞因子发挥着重要作用。本文将阐述近年来细胞因子尤其是新发现的胰腺衍生因子PANDER参与β细胞凋亡的研究进展。

简介：摘要胰岛素样生长因子-1(IGF-1)具有促进胰岛素分泌，减少细胞凋亡功效，还能够作用于机体其他系统，与糖尿病及其并发症关系密切。目前国内外对其机制研究报道较少，本文从抗凋亡、促分泌方面做一概述，对临床指导糖尿病治疗有重要意义。

简介：本研究探讨胰岛素对Reh细胞胰岛素受体（IR）和胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF-ⅠR）表达的影响及对Reh细胞的促增殖作用。用CCK-8法检测Reh细胞的增殖;采用实时PCR法检测Reh细胞IR和IGF-ⅠRmRNA的表达。结果表明,胰岛素对Reh细胞具有浓度和时间依赖性的促增殖作用,当胰岛素浓度为10-9mol/L时其促增殖作用最强,进一步提高浓度,胰岛素的促增殖作用不再增强。与对照组相比,胰岛素有明显的促增殖作用（P〈0.05）。胰岛素10-9mol/L作用24、48及72h,IRmRNA表达量与对照组相比的比值分别为2.2520±0.7431、1.9956±0.9692和3.9766±1.3189,IGF-ⅠR表达量与对照组相比的比值分别为1.0803±0.2238、1.6026±0.6158和3.1013±0.1008。胰岛素刺激后IR和IGF-ⅠR的mRNA相对表达量与对照组相比均明显增加,差别有统计学显著意义（P=0.022和P=0.00）。结论：胰岛素能促进Reh细胞的增殖,其机制可能与IR和IGF-ⅠR上调有关。IR和IGF-ⅠR的高表达与白血病细胞的生长有着密切关系。

简介：摘要目的利用流式细胞技术建立一种检测胰岛β细胞去分化状态的方法。方法实验研究。常规培养胰岛Min6（小鼠β细胞系）、αTC1-6（小鼠α细胞系）、HepG2（人肝癌细胞）和F9细胞（小鼠畸胎瘤细胞）。白细胞介素1β（IL-1β）合并肿瘤坏死因子α（TNFα）或棕榈酸（PA）过夜处理Min6细胞制备β细胞去分化模型。细胞染色采用抗-嗜铬粒蛋白A（ChgA）、抗-胰岛素（Ins）、抗-胰高血糖素（Gcg）、抗-SRY盒转录因子9（Sox9）和抗-八聚体结合转录因子4（Oct4）抗体进行，流式细胞技术鉴定细胞蛋白表达情况。统计学方法采用独立样本t检验。结果流式细胞实验结果显示Min6细胞高度表达Ins和ChgA，αTC1-6细胞高度表达Gcg，HepG2细胞高度表达Sox9，F9细胞高度表达Oct4，阳性率在90%左右。炎性因子（IL-1β+TNFα）处理Min6细胞导致Ins染色阳性细胞数量明显降低（92.775%±1.702%比97.125%±0.246%，P=0.045），Sox9染色阳性细胞增加（41.675%±0.390%比25.875%±3.348%，P=0.003），但ChgA和Oct4染色无明显变化（P值均>0.05）。PA处理Min6细胞后，Gcg染色阳性细胞数量上升（54.500%±3.597%比41.160%±3.007%，P=0.022）。实时荧光定量PCR检测mRNA结果与流式细胞仪检测结果的趋势一致。结论利用流式细胞技术可检测各去分化模型中不同标志蛋白的表达情况，为判断胰岛β细胞的去分化状态提供了新的手段。

简介：胰岛β细胞功能减退是2型糖尿病的主要病因之一，也是2型糖尿病治疗面临的主要挑战之一。随着2型糖尿病自然病程的进展，患者的胰岛β细胞功能逐渐趋向衰竭。因此，如何在早期保护甚至恢复胰岛β细胞功能日益成为学术界关注的重点。

简介：糖尿病（diabetesmellitus，DM）足一种严重威胁人类健康和生命的高发性代谢性疾病：虽然滓射外源性胰岛素可以有效控制血糖，但无法改善血糖的生理性代谢，解决DM并发症问题。自1966年美国第1例胰腺移植，1970年Younoszai等全球首例胰岛移植以来，挑战了传统外源性胰岛素治疗1型糖尿病（T1DM），并产生了较好的影响^[1]。

简介：目的研究Wistar大鼠胰岛细胞分离、纯化和培养的改良方法和条件,为进行细胞电生理实验提供胞膜完整、活性良好的胰岛细胞。方法水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。结果采用该方法分离、纯化胰岛的获得率稳定;急性分离、培养的胰岛细胞12h～24h贴壁,（4～5）d胰岛细胞生长状态最佳,胞膜完整,折光性好。结论逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心为一种有效的分离、纯化胰岛细胞的方法,培养的胰岛细胞（4～5）d达到最佳状态,适合进一步研究的要求。

简介：目的观察不同月龄大鼠的糖代谢指标变化,了解在基础和糖刺激下增龄对大鼠胰岛β细胞功能的影响。方法以4月龄（青年组,n=15）、14月龄（中年组,n=15）和24月龄（老年组,n=15）健康雄性Wistar大鼠为研究对象,进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素释放试验（IRT）,比较三组间基础血糖和胰岛素水平的差异,计算糖负荷后胰岛素增值与血糖增值的比值（ΔI10/ΔG10）,120min葡萄糖、胰岛素曲线下面积（AUCg,AUCi）,葡萄糖与胰岛素曲线下面积比值（AUCi/g）,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）等,以分析各组间胰岛功能的差异。结果随着月龄的增长,空腹血糖有升高的趋势,但未达到统计学差异。OGTT后老年组大鼠表现为血糖达峰时间延长,血糖峰值增加,OGTT2h血糖及AUCg增加,即老年组大鼠出现糖耐量异常状态,主要表现为餐后高血糖。青年组、中年组和老年组大鼠空腹胰岛素水平分别为（0.59±0.14）、（1.60±0.15）、（2.37±0.04）μg/L（两两相比均P〈0.01）;IRT中,老年组大鼠胰岛素达峰时间延迟,ΔI10/ΔG10降低,AUCi增加（P〈0.05）。使用稳态模型评估,HOMA-β在青年、中年和老年组中呈递增趋势,但未达到统计学差异;而HOMA-IR在青年、中年和老年组分别为3.09±0.80、8.34±0.72、13.14±1.59（两两相比均P〈0.01）。结论正常老龄大鼠存在一定的胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,但由于胰岛素分泌的早期时相受损,仍然出现糖负荷后血糖增高状态。

简介：摘要目的分析简易胰岛素释放试验对于胰岛B细胞功能评定中的效果。方法将120例２型糖尿病患者分为A组（胰岛素低值组）、B组（胰岛素正常组）以及C组(胰岛素高值组)，同期选取50名健康人群作为正常的耐糖量组(NGT组)，比较分析四组患者的试验结果。结果B组患者在空腹状态下与餐后一小时的血清胰岛素与NGT组比较没有明显差异（P＞0.05），而餐后两小时的血清胰岛素则存在明显差异（P＜0.05）；A组、C组患者空腹状态下、餐后一小时、两小时的血清胰岛素和NGT组相比差异显著（P＜0.05）。结论通过简易胰岛素的释放试验，可以准确了解患者各个时点的血清胰岛素情况，能够为临床治疗提供指导与参考。

简介：摘要目的探讨2型糖尿病早期胰岛素强化治疗改善胰岛β细胞功能的临床效果。方法选取96例2型糖尿病患者随机进行分组；对照组采取多次胰岛素皮下注射，观察组采取早期胰岛素强化治疗；对比两组患者的血糖控制效果，综合评价患者的胰岛β细胞功能。结果治疗后，两组患者的FPG、GHbA1c、2hPG水平均显著低于治疗前水平（P＜0.05），且观察组患者的FPG、GHbA1c、2hPG水平改善程度显著大于对照组（P＜0.05）；治疗后，两组患者的HOMA-IR显著小于治疗前水平，HOMA-β显著大于治疗前水平（P＜0.05），观察组患者的HOMA-IR显著小于对照组水平，HOMA-β显著大于对照组水平（P＜0.05）。结论早期胰岛素强化治疗2型糖尿病的效果确切，可显著控制血糖代谢，稳定血糖水平，提高胰岛β细胞功能，抑制胰岛素抵抗，整体改善患者的预后。